盐藻的一种盐诱导碳酸酐酶基因转录起始点的确定及表达载体的构建     

柴玉荣  侯卫红  王天云  王宁  袁保梅  王建民  薛乐勋 《海洋科学》2005,29(4):26-30

采用5′RACE和巢式PCR的方法确定盐藻(Dunaliella salina)一种盐诱导碳酸酐酶基因的转录起始位点,通过序列分析得出转录起始位点为A,从而确定核心启动子及上游调控区的位置。应用巢式PCR技术分别扩增盐藻这种碳酸酐酶基因上游调控区的2个片段,长度大约分别为0．8和1．2kb,序列经测定无误后分别与带β-葡糖苷酸酶(GUS)报告基因的载体相连接,经酶切鉴定这两种表达载体构建正确。用基因枪法将这两个载体导入盐藻细胞中,经染色检测,GUS基因在转化藻株中得到瞬时表达。  相似文献   

Efficient gusA Transient Expression in Porphyra yezoensis Protoplasts Mediated by Endogenous Beta-tubulin Flanking Sequences     

GONG Qianhong)  YU Wengong)  *  DAI Jixun)  LIU Hongquan)  )  XU Rifu)  GUAN Huashi)  and PAN Kehou) ) College of Medicine  Pharmaceutics  Ocean University of China  Qingdao  P. R. China ) College of Marine Life Sciences  Ocean University of China  Qingdao  P. R. China ) College of Fisheries  Ocean University of China  Qingdao  P. R. China 《中国海洋大学学报(英文版)》2007,6(1):21-25

1 Introduction Porphyra yezoensis is one of the most widely con-sumed and cultivated seaweeds in the world. Over the past decades, much effort has been made in improving the cultured stocks and developing breeding techniques of alga. At present, nuclear transformation systems of eu-karyotic algae such as green unicellular alga Chlamydo-monas reinhardii (Rochaix and Dillewijn, 1982), diatom Phseodactylum tricornutum (Lioudmila et al., 2000) and simple multicellular green alga Volvox carteri (…  相似文献   

用基因枪将GUS基因导入褐藻细胞中表达   总被引：18，自引：2，他引：18  

秦松  张健  李文斌  王希华  童顺  孙勇如  曾呈奎 《海洋与湖沼》1994,25(4):353-356

于１９９３年１１月－１９９４年２月，用高压氦气式基因枪，将ＰＨ１２２１质粒装有ＧａＭＶ ３５Ｓ启动子，ＧＵＳ基因以及ｎｏｓ的３＇调控区导入海带和裙带菜组织切块中。４８ｈ后，在海带假根细胞和裙带菜中肋部叶片细胞中检测到ＧＵＳ基因的表达。实验表明，微粒子轰击法是外源基因导入大型褐藻的一个有效途径。ＧａＭＶ ３５Ｓ启动子能够驱动外源基因在海洋藻类中的表达，可作为藻类基因工程的启动元件。  相似文献   

内源β-微管蛋白侧翼序列调控下条斑紫菜原生质体GUS基因的瞬间表达     

宫倩红于文功  戴继勋刘红全徐日富  管华诗潘克厚 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2007,37(2):228-228

内源β-微管蛋白启动子经常被用在绿藻外源基因表达载体中，但在条斑紫菜瞬间表达载体中应用内源β-微管蛋白启动子尚未见报道。为检测内源的β-微管蛋白启动子在紫菜瞬间表达中的效率构建了瞬间表达载体和对照载体。质粒pA由pCATR3-enhancer载体的骨架构建而成，瞬间表达载体则是将条斑紫菜β-微管蛋白基因的5’侧翼序列（Tub5’），β-葡萄糖醛酸苷酶（GUS）基因（gusA）和β-微管蛋白的3’侧翼序列（Tub3’）插入载体pA。而对照载体pA—GUSTub3只包含gusA和Tub3’。利用电击法进行条斑紫菜原生质体的瞬间表达。电击后24h开始进行GUS活性定量检测。结果表明在微管蛋白基因侧翼序列的控制下实现了GUS基因的瞬间表达，但是24h后GUS活性降低。同pBI221相比，利用pATubGUS电击后，原生质体表现出更强的GUS活性。结果显示内源微管蛋白启动子是条斑紫菜遗传转化的1种有潜力的调控元件。  相似文献