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藻胆蛋白裂合酶是催化藻胆色素与脱辅基藻胆蛋白亚基共价连接的裂合酶,在藻胆蛋白的生物合成途径中发挥着重要作用。本实验以藻蓝蛋白裂合酶Cpc E/F为研究对象,采用基因工程组合表达技术,构建了pCDFDuet-apcA-cpcE/F-hox1-pebS、pCDFDuet-pecA-cpcE/F-hox1-pebS等重组质粒,并导入大肠杆菌中,在IPTG的诱导下,成功表达得到两种非天然藻胆蛋白ApcA-PEB和PecA-PEB,这表明Cpc E/F不仅可以催化藻蓝胆素和脱辅基藻蓝蛋白的结合,还可以催化藻红胆素(PEB)与别藻蓝蛋白α-亚基(ApcA)和藻红蓝蛋白α-亚基(PecA)的结合,因此是一种多功能的裂合酶。根据重组产物的光谱特征峰分析发现,ApcA-PEB和PecA-PEB作为两种非天然存在的重组藻胆蛋白,具有与对应天然藻胆蛋白有着相近的特征吸收光谱和荧光发射峰,但同时具有明显的波长偏移并伴有色素异化现象,其光谱学性质主要由其所携带的色素基团决定。另外,荧光寿命衰减分析发现,不同脱辅基蛋白对于重组藻胆蛋白的光谱稳定性具有重要的影响。 相似文献
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本研究以一株分离筛选到的产间苯三酚的海洋生境假单胞菌LBF-96为基础,通过传统紫外诱变以及紫外微波复合诱变选育间苯三酚高产菌株,并采用响应曲面法优化突变株的发酵培养基。结果显示：经紫外照射60 s、微波辐照20 s复合诱变获得了一株间苯三酚高产菌YLM96-01,利用肉桂醛显色法测得其间苯三酚产量为0.599 g/L,较原始菌株提高了159%,且产间苯三酚时间提前,降低了发酵培养的成本;经传代培养显示突变株YLM96-01具有良好的遗传稳定性。采用响应曲面法优化培养条件后,突变株YLM96-01间苯三酚的产量提高为0.784 g/L,比优化前提高31%。通过紫外微波复合诱变选育出的间苯三酚高产菌YLM96-01,具有潜在生产应用价值。 相似文献
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