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嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)wl的超氧化物歧化酶基因在Escherichia coli BL21(DE3)中进行表达,采用Ni-NTA agarose亲和层析获得重组超氧化物歧化酶,比活力达565 U/mg.重组酶的相对分子质量为110.9 kDa,亚基相对分子质量为28.3 kDa,该酶为同聚四聚体蛋白.重组酶对氯仿-乙醇和SDS敏感,对H2O2不敏感,并且它的紫外最大吸收波长位于279 nm,判断其属于锰超氧化物歧化酶类型.1.0 mmol/dm3Mn2+对重组酶有激活作用,同浓度的其他金属离子Mg2+、Ca2+、Ba2+、Co2+、Cu2+、Zn2+和Fe2+对重组酶活力都有抑制作用,其中以Co2+的作用最强,抑制了约64%的酶活性.重组酶在70℃下处理1 h,保持原有活力的60%,即使在90℃下处理1 h,仍保持原有活力的35%.在pH值为4.0～11.0的缓冲液中25℃下处理1 h,保持65%以上的原始活力.由此可见,重组锰超氧化物歧化酶具有高的热稳定性和宽pH稳定性,在工业上具有巨大的应用潜力. 相似文献
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斑纹鲟凝集素(CFL)的初步研究Ⅱ.CFL的分子组成及性质鉴定 总被引：3，自引：0，他引：3
采用生化方法对斑纹鲟(Charybdis feriatus)凝集素进行了初步研究.结果表明,斑纹鲟的血清中有动物红细胞和微生物细胞凝集活性的凝集素(Charybdis feriatuslectin,CFL),其活力表现依赖于Ca2+,并为多种糖所抑制;CFL对40℃以上的温度敏感,其活力在pH6.0~8.0内稳定.经巯基乙醇处理和未经巯基乙醇处理的CFL在SDS-PAGE上均为一条蛋白带,说明斑纹鲟凝集素不含二硫键,且只有一种亚基,分子量为40.8 kDa,CFL氨基酸组成分析表明其富含酸性氨基酸. 相似文献
3.
ZHU Yanbing LI Hebin ZHANG Xuqin ZHANG Chunyan XIANG Jionghu LIU Guangming 《海洋学报(英文版)》2011,30(6):95-103
A thermostable superoxide dismutase (SOD) from the inshore thermophile Thermus sp. JM1 was purified to homogeneity by steps of fractional ammonium sulfate precipitation, DEAE-Sepharose chromatography and Phenyl-Sepharose chromatography. The specific activity of the purified native enzyme was 1 656 U/mg. A sod gene from this strain was cloned and overexpressed in Escherichia coli (E. coli). The prepared apo-enzyme of the purified recombinant SOD (rSOD) was reconstituted with either Fe or Mn by means of incubation with appropriate metal salts. As a result, only Mn 2+ - reconstituted rSOD (Mn-rSOD) exhibited the specific activity of 1 598 U/mg. SOD from Thermus sp. JM1 was Mn-SOD, judging by the specific activities analysis of Fe or Mn reconstituted rSODs and the insensitivity of the native SOD to both cyanide and H 2 O 2 . Both the native SOD and Mn- rSOD were determined to be homotetramers with monomeric molecular mass of 26 kDa and 27.5 kDa, respectively. They had high thermostability at 50 ° C and 60 ° C, and showed striking stability across a wide pH span from 4.0 to 11.0. 相似文献
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A new extracellular κ-carrageenase, namely CgkP, 34.0 kDa in molecular weight, was purified from Pseudoalteromonas sp. QY203. CgkP showed relatively high activity at acidities ranging from pH6.0 to pH9.0 and temperatures ranging from 30℃ to 50℃ with the highest activity at 45℃ and pH7.2. Sodium chloride increased its activity markedly, and KCl increased its activity slightly. The divalent and trivalent metal ions including Cu2+ , Ni2+ , Zn2+ , Mn2+ , Al3+ and Fe3+ significantly inhibited its activity, while Mg2+ did not. CgkP remained 70% of original activity after being incubated at 40℃ for 48 h, and remained 80% of the activity after being incubated at 45℃ for 1 h. It exhibited endo-κ-carrageenase activity, mainly depolymerizing the κ-carrageenan into disaccharide and tetrasaccharide. CgkP was more thermostable than most of previously reported κ-carrageenases with a potential of being used in industry. 相似文献
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论有机质生烃潜能与生源的关系及干酪根的成因类型 总被引：1，自引：0，他引：1
作者对我国若干盆地数百个样品的综合分析表明,（1）藻类等低等水生浮游植物来源的有机质经过一定程度的沉积 成岩氧化可形成贫氢的腐泥型干酪根（Ⅲ型或Ⅳ型）:（2）不仅高等植物的某些特殊生化组分可对富集形成壳质型干酪根,其木质纤维组分办可形成相对富氢的腐植型干酪根;（3）不同类型十酪根中的镜质组分的化学结构明显不同;（4）沉积成岩条件对有机质的活化能和热稳定性具有重要影响 相似文献
6.
蛋白质三级拓扑结构对热稳定性贡献的初步探讨 总被引：1，自引：0，他引：1
搜集来自数据库和文献的127个已测定熔解温度和PDB结构的热稳定蛋白,计算了每个蛋白PDB结构的9种拓扑参数,并对各个参数与其自身熔解温度做了线性相关性分析。现有数据结果表明只有CC这个参数与Tm的相关性系数达到了0.33。CC参数表征蛋白结构作为天然接触的网络来处理时的簇系数,因此这一关系表明组成蛋白的基团接触的越紧密,蛋白的热稳定性就越高,这与之前的研究结论相一致。而其它的参数没有发现与Tm有显著的关系。作者从拓扑结构这个方面进行研究为蛋白质的热适应机理研究提供了新的思路。 相似文献
7.
以印尼热泉菌为材料,采用以褐藻酸钠为唯一碳源的培养基筛选产褐藻胶裂解酶的菌株,通过16S rDNA序列对产酶菌株进行种属鉴定,并通过硫酸铵沉淀、离子交换层析和凝胶过滤层析从高产酶菌株Aly-B5发酵液上清中纯化获得褐藻胶裂解酶,并对该酶的酶学性质进行了研究。结果表明:高产酶菌株经鉴定为Bacillus属;聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)显示纯化的褐藻胶裂解酶Aly-B5分子量为45kDa,该酶最适作用温度为65°C,75°C时的半衰期为110min,最适pH为7.0;Zn~(2+)、Mg~(2+)、Fe~(2+)对酶活具有明显的抑制作用,但该酶对乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)并不敏感;同时,底物特异性实验表明Aly-B5是一种偏好降解聚古罗糖醛酸(poly G)的双功能裂解酶,降解产物主要是二糖。该酶优良的耐热性使其在海藻高值化利用领域具有潜在的应用前景。 相似文献
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研究了安徽明光富镁坡缕石和江苏盱眙贫镁坡缕石热处理后的结构变化,结果表明:富镁坡缕石八面体片对称性好,晶体结构稳定性高,结晶度高,热稳定性好;贫镁坡缕石八面体片中存在连续八面体空位,对称性差,晶体结构稳定性低,结晶度差,热稳定性差。在脱除结晶水和羟基过程中,富镁坡缕石由正交晶系转变为单斜晶系,层间距变小,孔道变形、塌陷但一直保持链层结构,显示晶质特性;而贫镁坡缕石的晶体结构发生折叠,链层结构逐步破坏,700℃煅烧后部分四面体片遭到破坏,虽然显示多晶特性为主,但开始出现非晶化现象。 相似文献
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氧化—还原条件对有机质的生烃能力及热稳定性的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
在南华北石炭、二叠纪含煤岩系中发现了沉积—成岩阶段氧化程度逐渐加深的陆生高等植物来源的有机质系列,对该系列有机质的综合研究表明:随氧化程度加深,高等植物的类脂组分基本保持不变,而木质纤维组分可形成由镜质体到惰性体的连续系列,镜质体反射率逐渐增大,有机质的生烃能力逐渐减小,但经过高度氧化的有机质(Ⅳ型干酪根)仍具有一定的生油能力;有机质的热稳定性逐渐减弱;干酪根的碳同位素组成逐渐加重。 相似文献
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寒区桩基热稳定性研究进展 总被引：1，自引：1，他引：0
桩基础锚固长度大、埋置深,对地温场的扰动小、回冻快,在青藏高原多年冻土区被广泛使用。寒区桩基热稳定性研究是一个交叉面广、综合性较强的问题,它涉及到传热学、冻土学、桩基础的设计、桩-土相互作用等多方面的内容。在大量文献基础上,从现场试验、模型试验、理论计算等角度,对寒区桩基热稳定研究现状进行了总结和分析,文献研究表明：土体回冻过程受众多因素影响,而影响程度最大的是混凝土浇筑时的水化热释放;在全球变暖的情形下,未来50年青藏高原冻土退化严重,对桩基热稳定性构成威胁,需要采取相应的保护措施。 相似文献