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目的：采用Box-Behnken响应面法优化半夏多糖双水相提取工艺。方法：基于单因素试验,选取超声时间、聚乙二醇(PEG)6000用量和 (NH4)22SO4用量为考察指标,将分配系数、相比和提取率的总评归一值作为响应值,以Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果：最佳的半夏多糖双水相提取参数为超声时间44 min,PEG 6000用量1.3 g, (NH4)22SO4用量2.3 g;基于该提取条件测得多糖平均提取率为44.76%,OD值平均值为0.8761,偏差为1.69%。结论：采用PEG 6000- (NH4)22SO4双水相体系分离半夏多糖,其含量高于传统醇沉法,并具有操作简便、成本低、有机溶剂使用少等优点,具有良好的应用前景。 相似文献
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钝顶螺旋藻藻胆蛋白的提取及其特性初报 总被引：3，自引：0，他引：3
作者采用细胞破碎,等电点沉淀的方法,提取、分离螺旋藻的藻胆蛋白,并在藻胆蛋白中检测到17种氨基酸。文中还研究了在500～700nm波长范围内不同外界因子对藻胆蛋白理化特性的影响,结果表明:(1)不同的pH值,藻胆蛋白液颜色及其吸收光谱的形状和强度不同。当pH为4和5.5时,藻胆蛋白液呈绿蓝色,吸收峰在625nm处,而pH为7,吸收峰移至600nm处,溶液呈蓝色,pH为8.5和10时,出现双峰,分别位于600nm和650nm处。(2)藻胆蛋白热稳定性差,吸收光谱强度随着温度升高而迅速下降。温度在30℃以下,藻胆蛋白较稳定。(3)藻胆蛋白对光照较敏感。(4)10％乙醇、10％蔗糖、1％NaCl对藻胆蛋白均有不同程度的增色效应。 相似文献
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钝顶螺旋藻藻蓝蛋白提取纯化新工艺 总被引：7，自引：0，他引：7
对钝顶螺旋藻（Spirulina platensis）中藻蓝蛋白的提取和纯化方法进行了改进。用磷酸盐缓冲液循环冻融联合超声波破碎法，50％硫酸铵沉淀获得藻蓝蛋白（phycocyanin，PC），提取率达到13．1%。粗蛋白提取液再经过两次羟基磷灰石柱（HA）层析和sephacryl-HR-200凝胶层析对其进行纯化，纯度达到4．71％。纯化后的PC在12％十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）中得到两条带，分别是α和β两个亚基，分子质量分别为21．4ku和17．0ku。结果表明，通过上述分离纯化过程得到了较高提取率和电泳纯度的藻蓝蛋白。 相似文献
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以羟基磷灰石柱层析法从小珊瑚藻(Corallinapilulifera)中提取出藻红蛋白,其纯度可达A565/A280大于3,得率为0.173g/kg。该藻红蛋白在498nm和565nm处有两处荧光激发峰,为双峰型。荧光发射光谱检测表明藻红蛋白在pH5.0~10.0溶液中具有较高的稳定性,其中以pH6.0和pH10.0的稳定性最高。该藻红蛋白对光照敏感,光照度800lx照射17h后荧光基本消失。对氧化剂(H2O2)敏感,在9℃以0.1%的H2O2处理24h,荧光基本消失。藻红蛋白不耐高温,80℃处理0.5h,导致蛋白液褪色,荧光消失。 相似文献
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末水条斑紫菜以组织捣碎机粉碎,在10 mmol/L磷酸盐缓冲液(p H 6.8)中反复冻融3次,收集上清液,通过膨化床疏水层析技术分离R-藻红蛋白(R-PE),剩余残渣用于硫酸多糖提取。使用膨化柱分离,粗提液中约17%的藻红蛋白可以被回收,DEAE-Sepharose离子交换树脂纯化后,约12%的R-藻红蛋白得到回收,光谱纯度大于3.2,纯化得率为0.66 mg/g鲜紫菜。吸收光谱、荧光发射光谱以及凝胶电泳均显示该藻红蛋白属于典型三峰型R-藻红蛋白。利用藻红蛋白提取后的残渣,每克条斑紫菜可回收到30.5 mg的粗多糖,其中硫酸基含量为21.8%。实验证明,微波辅助抽提与热水浸提对硫酸多糖得率无显著影响。纯化的R-藻红蛋白与紫菜硫酸多糖可用于食品、化妆品添加,或药品、保健品的开发。本文对探索次等紫菜生物质的综合、高值化利用,进一步促进我国相关产品的开发与应用具有重要意义。 相似文献
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为了研究PHB2蛋白的生物学活性及后续抗体的制备,作者以前期构建的p MD18-T-Lm-PHB2质粒为模板,PCR扩增Lm-PHB2基因全长CDS区,PCR产物经Hind III和Eco R I双酶切后连接至表达载体p ET-32a,构建重组质粒p ET-32a-Lm-PHB2。将鉴定正确的重组质粒转化入大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta Blue,经IPTG诱导表达后,表达产物通过SDS-PAGE和Western blotting进行检测,利用镍柱亲和层析纯化得到纯度较高的目的蛋白r Lm-PHB2。结果表明,经PCR、双酶切和测序鉴定,所构建的重组质粒p ET-32a-Lm-PHB2序列正确,表达产物存在于裂解菌液的上清和沉淀中,经SDS-PAGE和Western blotting证实在约47 ku处有目的蛋白r Lm-PHB2的表达条带。本研究构建了重组七鳃鳗(Lampetra japonica)PHB2蛋白的原核表达载体,并大量表达和纯化目的蛋白,为该蛋白后续的抗体制备及生物活性研究奠定了基础。 相似文献
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紫球藻两种藻红蛋白特性的比较研究——γ亚基在稳定藻红蛋白结构方面的作用 总被引：2，自引：4，他引：2
从紫球藻中分离纯化两种藻红蛋白（B－藻红蛋白和b-藻红蛋白），对它们的吸收光谱和电泳图谱进行比较研究。结果表明，尽管电泳图谱与文献报道的相同，但b-藻红蛋白的吸收光谱与文献报道的有较大的差别，表现在本研究发现b-藻红蛋白在545nm处有一吸收峰。在565nm处仅有一个吸收肩峰，而不是文献中报道的在545nm和565nm无前独立的吸收峰。通过比较B－藻红蛋白和b-藻红蛋白在不完全变性条件下的电泳图谱，发现B－藻红蛋白比b-藻红蛋白要稳定的多，进一步分析认为这主要是因为B－藻红蛋白含有γ亚基，而b-藻红蛋白不含有γ亚基，因为此为γ亚基有稳定分子的作用。 相似文献
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提要改进了以往分离纯化Cytb6f的方法,进行了海洋绿藻——假根羽藻(Bryopsiscorticu-lans)Cytb6f蛋白复合体分离纯的研究。结果表明,该Cytb6f制剂由Cytf、Cytb6、Rieske[Fe-s]蛋白和亚基IV四种主要的多肽亚基以及少量的Chl·a和类胡萝卜素组成。4个多肽亚基的表观分子量分别为34·8、24·0、18·7及16·7kD,该Cytb6f制剂的Cytb6/f比值接近2·0,其纯度值为9·9nmolCytf/mg,其催化电子传递的活性(C10-PQH2→PC)为73e/s。上述分析表明,假根羽藻Cytb6f在组成、纯度和催化活性方面均与已报道的高等植物、淡水绿藻和光合细菌的Cytb6f制剂相似。 相似文献
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贻贝粉酶解液提取复合氨基酸 总被引：1，自引：1，他引：1
报道了以脱脂后的贻贝粉为原料，采用酶解法从其酶解液中分离提取复合氨基酸的工艺。其收率为２０％，纯度约为９０％。其中必需氨基酸（不计色氨酸）约占复合氨基酸总量的５５％，其氨基酸模式与ＦＡＯ／ＷＨＯ组织确定的模式及人乳模式进行了对照，通过适量添加个别氨基酸可使其配比接近人乳模式。 相似文献
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该研究是继天然长牡蛎(Crassostrea gigas)黑色素的提取、可溶性长牡蛎(Crassostrea gigas)黑色素的制备之后,对牡蛎黑色素提纯方面的进一步拓展和延伸。运用半透化学材料分离的方法,选取纳滤透析膜为分离介质,对可溶性长牡蛎黑色素的制取产物中多余的盐类无机物进行分离剔除,进而得到纯度较高、品质优良的可溶性长牡蛎黑色素晶体,通过称质量和盐度测量,计算得出该方法对黑色素脱盐率达到98%,证明了该方法可以进行贝类黑色素的脱盐处理工作。 相似文献
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A vacuum extraction system has been constructed which rapidly and quantitatively extracts radon and other gases from water. The time required to extract radon from a 23-1 sample is 15 minutes with an extraction efficiency of 0.985. Total sample processing time (sample preparation, extraction, purification, and transfer of radon to a counting cell) is 40 minutes for the 23-1 sample. The system has been field tested and used routinely to analyze several hundred seawater samples for radon. The combined variability of sampling and extraction efficiency in the field was determined to be 2 to 3%, from three sets of replicate measurements. 相似文献
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针对1种典型的酸性、高有机质含量类型土壤-红树林土壤,从DNA产量、DNA纯度、土壤腐殖酸类物质的提取量以及DNA提取物PCR(polymerase chain reaction)扩增反应的敏感度等方面比较了不同提取缓冲液对土壤DNA品质的影响.结果表明,酸性SDS(sodium dodecyl sulfate)提取缓冲液所获得的土壤DNA产量及纯度均较低;PVP (polyvinylpyrrolidone)提取缓冲液所获得的土壤DNA产量较高,但土壤腐殖酸类物质的提取量亦远高于其他提取缓冲液;酸性SDS提取缓冲液及PVP提取缓冲液所获得的土壤DNA提取物即使稀释到10-3量级亦不能获得目的基因PCR扩增条带.PVPP(polyvinylpolypyrrolidone)提取缓冲液及CTAB(cetyltrimethylammoniumbromide)+PVPP提取缓冲液所获得的土壤DNA产量较PVP提取缓冲液低,但其纯度较高,并且其纯度随提取缓冲液中PVPP浓度的升高而提高;当2%PVPP提取缓冲液及CTAB+PVPP提取缓冲液所获得的土壤DNA提取物分别稀释到10-2及10-1量级时,均能获得PCR扩增条带.综上所述,酸性提取缓冲液及PVP提取缓冲液不适用于酸性、高有机质含量类型土壤DNA的提取,而2%PVPP提取缓冲液及CTAB+PVPP提取缓冲液均能提高此类土壤DNA的提取品质. 相似文献
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单环刺螠纤溶酶的分离纯化及其性质的初步研究 总被引：3，自引：1，他引：2
从单环刺中制得单一组分的纤溶活性纤溶酶,并对其性质进行初步研究.单环刺体组织液经离心,超滤,离子交换层析,凝胶过滤等方法进行分离纯化,制得单一洗脱峰酶组分,经Native-PAGE电泳分析,SDS-PAGE电泳分析和飞行质谱分析,鉴定了酶制品纯度和相对分子量,进行了体外溶血栓试验.所得纯品UFEIa水解酪蛋白的比活力为442.0 U/mg,纯化倍数为12.1倍,回收率为27.0%.UFEIa为单一组分,相对分子量约23 800 Da.体外溶血栓实验表明此纤溶活性蛋白酶与蚓激酶相比具有很好的溶血栓活性. 相似文献
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Pleistocene climatic and oceanographic changes have influenced the distribution of marine biodiversity in southern Africa. Most evidence, however, has been derived from rocky shore or demersal taxa; data on sandy shore species are limited, despite severe threats to many sandy beach ecosystems. To test the effects of past climatic changes on sandy shore species, we sampled 140 smooth plough shell Bullia rhodostoma individuals from eight localities and generated phylogeographic data derived from the mtDNA cytochrome c oxidase subunit 1 (COI) marker. Nuclear markers (ATPSα, ATPSβ, ANT, SRPS4, TBP, LTRS and ZMP) showed no sequence variation. Bullia rhodostoma exhibited shallow genetic differentiation (ΦST = 0.07, p < 0.05) across its range. Isolation-by-distance suggests a stepping-stone model of migration, which is expected given the species’ direct-development life-history strategy. Demographic reconstruction suggests a post-LGM (Last Glacial Maximum) range expansion, concordant with the signal of shallow genetic differentiation. Phylogeographic patterns obtained suggest that, during lower sea levels than current, B. rhodostoma could have been restricted to the South-West Coast, the central Agulhas Bioregion and probably also the East Coast. When climatic conditions changed and temperatures began to rise after the LGM, the species began a rapid westward range expansion from these refugial regions. 相似文献