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1.
张大力 《中国海洋大学学报(自然科学版)》1983,(1)
原生质体是研究植物遗传工程的好材料。自从Cocking(1960)首次用酶解法从蕃茄根尖分离出大量原生质体以来,高等植物原生质体的研究已经开展得比较广泛,但由于技术上的原因,目前从原生质体诱导出完整植株的还只限于烟草、矮牵牛、石刁柏、油菜和马铃薯等十余种。而藻类方面的工作则报道甚少。Miroslav(1970)用蜗牛消化腺提取液处理尾丝藻(Uronema gigas)得到了原生质体。用含有葡萄糖和果胶的培养基培养,观察到了细胞壁的再生和细胞分裂。Rietema(1973)由枝丝藻(Derbesia tenuissima)挤压出原生质体,并得到了再生植株。 近年来,植物原生质体已被广泛地用来研究体细胞融合。Callson(1972)首次 相似文献
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紫菜营养细胞和原生质体的分离和培养 总被引：22，自引：0，他引：22
唐延林 《山东海洋学院学报》1982,12(4):37-50
六十年代初，Cocking(1960)(1)采用酶法大量分离植物原生质体获得成功。二十多年来，植物单细胞和原生质体的分离、培养的研究，得到了广泛的开展，并取得很大成就。这些成就的取得，为植物遗传育种和遗传学理论的研究开辟了广阔前景。 相似文献
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裙带菜原生质体的分离和培养 总被引：1，自引：0，他引：1
吴少波 《中国海洋大学学报(自然科学版)》1988,(4)
本文以裙带菜(Undaria pinnatifida(Harv.)Suringar)为材料,进行原生质体分离和培养研究。取得以下结果: 1、使用海螺酶(sea snail enzymes)和纤维素酶(cellulase,Onozuka R-10),酶解裙带菜细胞壁,在一定的条件下,能够大量地分离成活的裙带菜原生质体。 2、实验表明,氯化钠可作为分离裙带菜原生质体研究中的一种理想的渗透刑。 3、荧光增白剂染色镜检法可作为鉴定裙带菜原生质体的一种辅助方法,并适用于原生质体再生壁的观察。 4、光照(2000—2500Lux)能促使原生质体再生细胞壁,含有蔗糖(W/V,1％)的培养液有助于原生质体再生细胞壁。 5、分离的裙带菜原生质体,经培养,已能长成幼体。 相似文献
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唐延林 《中国海洋大学学报(自然科学版)》1982,(4)
前言 六十年代初,Cocking(1960)采用酶法大量分离植物原生质体获得成功。二十多年来,植物单细胞和原生质体的分离、培养的研究,得到了广泛的开展,并取得很大成就。这些成就的取得,为植物遗传育种和遗传学理论的研究开辟了广阔前景。 但是,大型藻类的单细胞和原生质体的分离和培养工作开展的比较少。关于单细胞的分离工作,仅见到几例,主要用机械的方法分离单细胞并进行培养。用酶 相似文献
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钝顶螺旋藻部分原生质体及单细胞的制备与培养 总被引：21，自引：0，他引：21
于1992年1月-1994年4月，进行超声波处理方法制备钝顶螺旋藻部分原生质体以作为基因工程受体，以及制备单细胞用于固体平板克隆化培养的研究。研究结果表明：超声波以20kHz频率、15W功率作用30s，可使藻丝体断裂成15．0±1．6个细胞长度；延长作用时间，至2－6个细胞长度时，细胞壁结构遭到破坏，形成部分原生质体；继续作用，可形成少量原生质体和大量单细胞。断裂藻丝体、部分原生质体、单细胞以及原生质体均可涂布于固体培养基上再生或生长。以一定密度涂布单细胞与原生质体，能够形成彼此分开的单个克隆，可用于筛选及遗传分析。本文提供了一种节省溶菌酶的制备螺旋藻透性体的方法，超声波作用利于外源基因的导入，而涂布培养利于进一步的筛选和形成克隆。 相似文献
6.
复合酶对卡德藻溶壁效果的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
早在１８９２年 ,Ｋｌｅｒｃｋｅｒ就用机械法从藻类中分离到原生质体。该法靠手工操作 ,难度非常大 ,原生质体的得率非常少 ,费时费力。１９６０年 ,英国Ｃｏｏｋｉｎｇ首先采用酶解法从番茄幼苗根尖中的细胞用纤维素酶把原生质体分离出来 ,从而开创了酶法大量获得原生质体的新时期。由于此法的创立 ,才使原生质体培养、融合、转化等的一系列研究得到很大的发展。尽管该技术被应用于陆生植物已有很长时间 ,但由于海藻多样独特的细胞壁组成和结构 ,其应用仍处于发展阶段。海洋微藻类因其结构简单和易于培养等特点 ,成为原生质体制备、细胞融… 相似文献
7.
五种海产贝类消化酶对紫菜细胞的分离 总被引：3，自引：1，他引：3
酶法制备高等植物细胞的原生质体的研究,已有25年的历史,这为植物原生质体的培养、再生和细胞杂交等生物工程技术的基础研究和应用研究,开辟了一条广阔的道路。但是,由于高等植物的构造复杂和操作技术等各种原因,目前从原生质体再生成植株,还不广泛。仅在茄科、豆科和十字花科等十余个科计有70余种植物,获得了再生植株。 相似文献
8.
江蓠原生质体分离和培养的初步研究 总被引：2，自引：0，他引：2
以江蓠Ｇｒａｃｉｌａｒｉａｖｅｒｒｕｃｏｓａ（Ｈｕｄｓ．）Ｐａｐｅｎｆｕｓｓ为材料,用微生物发酵法提取的琼胶酶成功地分离到江蓠的原生质体,经初步培养,原生质体发育为愈伤组织,为江芳江生物工程研究和育苗利用提供了可能。 相似文献
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于2011年9月至2013年1月,在海南陵水热带海藻实验基地,利用篮子鱼(Siganus fuscessens)内脏研磨制备消化酶,开展了酶解制备大型产胶红藻长心卡帕藻(Kappaphycus alvarezii)和细齿麒麟菜(Eucheuma denticulatum)的原生质体研究,观察了不同酶解条件对两种产胶海藻原生质体产量和产率的影响。结果表明,细齿麒麟菜原生质体得率高于长心卡帕藻;在藻泥与酶浓度配比中,长心卡帕藻或细齿麒麟菜藻泥越多,所制备出的原生质体产量越高,而其制备效率却越低;在温度(20~30℃)梯度中,有最高原生质体产量和效率的酶解温度为25℃;在pH 6.0~8.0的实验酶解梯度中,酶解pH 6.0时的酶解效果最好;在12~48 h实验酶解时间梯度中,酶解时间为48 h时原生质体产量和得率最高;酶解时间越长,长心卡帕藻或细齿麒麟菜原生质体制备效率越高。为此建议在25℃和pH6.0条件下,适当增加海藻藻泥用量和延长酶解时间,以更有效获得原生质体。 相似文献
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《山东海洋学院学报》1984,14(4):57-57
海螺酶Ⅰ号、Ⅱ号是用于海藻单细胞和原生质体制备的活性较高的两种工具酶。我院海洋生物学系海螺酶研制小组从1980年开始，开展了对海螺酶的试制研究，1981年初步试制出了样品酶。近三年来又对酶制剂的生产工艺作了进一步的改进，对酶制剂的性质进行了分析测试。 相似文献
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海藻解壁酶研究 总被引：1，自引：0，他引：1
海藻生物技术始于50年代初期,其发展较陆生高等植物要缓慢得多。在海藻中缺乏特殊的海藻解壁酶是制约海藻生物技术发展的重要因素,因此在今后的研究中,迫切需要解决海藻解壁酶问题[14]。海藻解壁酶的种类很多,但主要有两个类源[1,2,10,12,14,18,21,22,27～30]。1 动物源的海藻解壁酶研究1980～1984年刘万顺等[23]从海螺消化系统中制备了海螺酶,并用于紫菜、海带、裙带菜和江蓠的单细胞和原生质体分离,为开辟海洋动物源的海藻解壁酶奠定了基础,同时也是酶法制备红藻和褐藻原生质体的首次成功。1982年,唐延林[7]用海螺酶制备紫菜原生质体并再… 相似文献
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海螺酶解壁作用的研究 总被引：8，自引：0，他引：8
朱仁华 《山东海洋学院学报》1983,13(4):47-57
一、前言 研究和分离植物细胞的亚细胞成分，进行植物原生质体培养以及通过细胞融合、培育新杂交品种，必先除掉包裹于细胞周围的障壁。目前，用微生物提取酶分解胞壁，已在陆生植物中获得成功，如日本的onazaka R-10酶和我国植生所的EA3-867纤维素酶。 相似文献
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利用琼胶作为唯一的碳源从青岛太平角海域的海水和红藻样品中筛选分离得到一株高产琼胶酶的海洋菌F-6,对其最适的产酶条件,利用琼胶酶分离条斑紫菜的原生质体和原生质体的培养进行研究。结果表明,通过单次单因子和正交实验确定琼胶降解菌株F-6最适产酶培养基配方为(W/V):琼胶0.7%;酵母粉0.3%;蛋白胨0.5%;NaCl2.0%;K2HPO40.1%;CaCl20.02%;MgSO4·7H2O0.05%;FeSO4·7H2O0.002%;起始pH=7.5,最适的发酵产酶条件为:26℃培养36h。经条件优化后,粗酶液的酶活高达631.6U/ml。发酵液经过6000g离心30min得到粗酶液,粗酶液经过8k分离膜超滤,加入1mol/L渗透剂,0.22μm滤膜过滤除菌后降解条斑紫菜组织块,成功地分离得到大量的紫菜原生质体,其产率为3×106个原生质体/g新鲜紫菜组织。原生质体经初步培养发育成愈伤组织,其成活率为60%。 相似文献
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坛紫菜和拟线形紫菜的原生质体融合及培养 总被引：1，自引：1，他引：1
应用PEG 法和电融合法进行了坛紫菜和拟线形紫菜的原生质体融合试验,探讨了PEG 的浓度、处理时间以及洗涤液种类与融合的关系。结果表明,PEG 法的融合率为4.9%～10.2%,电融合率高达32.3%。融合细胞经诱导长成多细胞团的愈伤组织,从愈伤组织上升出小紫菜。 相似文献