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利用流式细胞仪（FCM）技术检测了杂色鲍血细胞在体内和体外对不同含量荧光微球悬液的吞噬率.其结果表明体内注射法测定吞噬率的方法不可行.在体外吞噬中,当荧光微球含量为血细胞含量的68.2倍时吞噬率达98.43%±1.27%,随着荧光微球含量的降低血细胞吞噬率也随着降低.当荧光微球含量为血细胞含量的6.82倍时吞噬率为63.45%±6.05%,以这一含量进行血细胞吞噬率的测定比较恰当.利用这一含量测定了正常鲍与经过低盐（S=18）海水胁迫24 h后鲍的血细胞吞噬率的变化,正常鲍的吞噬率为68.71%±10.05%,经低盐海水胁迫后鲍的吞噬率为49.49%±10.18%,吞噬率出现了显著的下降（p〈0.05）.实验结果表明利用流式细胞仪技术相比传统的显微镜镜检记数法检测杂色鲍血细胞吞噬率更为方便可靠. 相似文献
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《中国海洋大学学报(自然科学版)》2015,(6)
贝类无特异性免疫系统,细胞吞噬是其免疫防御的重要方式之一。在5、10、15、20和25℃养殖条件下,给栉孔扇贝(Chlamys farreri)分别注射荧光微球、脂多糖和荧光微球混合液。在注射后的0,6,12,18,24,30,36,42和48h抽取血细胞,用荧光标记血细胞以观察其对微球的吞噬状态,用流式细胞术测定血细胞对微球的吞噬率。结果表明,在5个养殖温度下,2个处理组均自6h后扇贝血细胞内即出现吞噬的微球,之后吞噬率逐渐上升,直到18~24h达到最高峰,随后逐渐下降。5、10、15、20和25℃条件下,注射荧光微球组血细胞最大吞噬率分别为8.66%±0.26%、14.00%±0.22%、16.97%±0.55%、25.62%±0.88%和8.97%±0.25%,注射脂多糖和荧光微球混合液组分别血细胞最大吞噬率为9.75%±0.48%、17.49%±0.43%、23.13%±0.57%、34.16%±0.97%和10.42%±0.45%。20℃组的两处理组血细胞吞噬率显著高于其他温度组,其次是15和10℃组,最低是5和25℃组,并且20、15℃组的最大吞噬率出现在18h,其他组均在24h。各养殖温度组中,脂多糖和荧光微球混合液组血细胞吞噬率均高于荧光微球组。研究表明:栉孔扇贝血细胞的吞噬活力受水温影响显著,脂多糖能够显著增强扇贝血细胞的吞噬活力。 相似文献
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为查清免疫促进剂对日本(Charybdis japonica)(俗称石蟹)自身免疫力的增强作用及机理,对脂多糖(LPS)、β-葡聚糖(β-1,3-glucan)、灭活鳗弧菌和灭活哈维氏弧菌对日本酚氧化酶(PO)的产量与活性以及血细胞的数量与超微结构的影响进行了研究.结果表明,经4种免疫促进剂处理后,日本PO产量和总酶活性都有显著增加,但PO的比活性与对照相比没有显著差异.日本血细胞超微结构观察显示,多糖处理组小颗粒细胞和大颗粒细胞的糙面内质网和线粒体数量增加,颗粒数量减少、体积增大,而透明细胞的超微结构没有显著变化;灭活弧菌处理组小颗粒细胞中的颗粒数量明显减少,透明细胞中线粒体的数量显著增加.由此可见,多糖类和灭活弧菌类免疫促进剂对日本非特异性免疫系统的影响不同,多糖类免疫促进剂主要提高酚氧化酶原激活组分PO的产量,进而提高PO总酶活性,而灭活弧菌类免疫促进剂主要提高透明细胞和小颗粒细胞的吞噬活性. 相似文献
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研究凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)对多巴胺的免疫响应。结果表明:注射多巴胺对凡纳滨对虾血细胞数量、吞噬率和血淋巴酚氧化酶、溶菌、类α2-巨球蛋白活力影响显著(P<0.05),而对照组各免疫指标无明显变化。在实验时间内,多巴胺处理组各指标均呈峰值变化,3类血细胞、总血细胞数量和血淋巴类α2-巨球蛋白活力在3h时分别达到最小值和最大值,而血淋巴酚氧化酶、血细胞吞噬率和血淋巴溶菌活力于6h时分别达到最大值和最小值,同时各免疫指标变化与多巴胺的注射剂量具有明显的负、正相关性;其中颗粒细胞、半颗粒细胞数量和血淋巴酚氧化酶、类α2-巨球蛋白活力在12h后趋于稳定,透明细胞、总血细胞数量和吞噬率于18h后保持稳定,而溶菌活力在24h后保持平稳,稳定后各免疫指标均恢复至对照组水平。这说明多巴胺对凡纳滨对虾血细胞具有明显的调节作用,能在短时间内引起对虾免疫力的显著下降,并表现出明显的剂量效应性。 相似文献
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流式细胞术比较研究4种双壳贝类血细胞的分群 总被引：11，自引：0，他引：11
应用流式细胞术对太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)、海湾扇贝(Argopecten irradians)、虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)和毛蚶(Scapharca subcrenata)4种双壳贝类的血细胞分类进行了比较。根据其血细胞的前向角散射光(FSC)和侧向角散射光(SSC)特性的不同将血细胞分群,FSC和SSC二维图分析发现太平洋牡蛎、海湾扇贝和虾夷扇贝的血细胞都可分为3个亚群,即透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞,而毛蚶的血细胞只可区分为透明细胞和颗粒细胞2个亚群。同时还对这4种双壳贝类各种血细胞所占比例进行了比较研究,发现各亚群细胞所占比例差异很大。 相似文献
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为查清免疫促进剂对日本蟳（Charybdis japonica）（俗称石蟹）自身免疫力的增强作用及机理，对脂多糖（LPS）、β葡聚糖（β—1，3-glucan）、灭活鳗弧菌和灭活哈维氏弧菌对日本蟳酚氧化酶（po）的产量与活性以及血细胞的数量与超微结构的影响进行了研究。结果表明，经4种免疫促进剂处理后，日本蟳PO产量和总酶活性都有显著增加，但PO的比活性与对照相比没有显著差异。日本蟳血细胞超微结构观察显示，多糖处理组小颗粒细胞和大颗粒细胞的糙面内质网和线粒体数量增加，颗粒数量减少、体积增大，而透明细胞的超微结构没有显著变化；灭活弧菌处理组小颗粒细胞中的颗粒数量明显减少，透明细胞中线粒体的数量显著增加。由此可见。多糖类和灭活弧菌类免疫促进剂对日本蟳非特异性免疫系统的影响不同，多糖类免疫促进剂主要提高酚氧化酶原激活组分PO的产量，进而提高PO总酶活性，而灭活弧菌类免疫促进剂主要提高透明细胞和小颗粒细胞的吞噬活性。 相似文献
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中国对虾血细胞酶细胞化学的初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
运用电镜酶细胞化学技术 ,对中国对虾 (Penaeus chinensis)的血细胞和血清中的酚氧化酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和过氧化物酶的酶活性部位进行标记。实验结果显示 :酚氧化酶主要以酶原形式存在于大颗粒细胞的颗粒体中 ,酸性磷酸酶和碱性磷酸酶以酶原形式存在于小颗粒细胞的颗粒体中。健康虾和患病虾血细胞中酶活性的表现形式不尽相同 ,在病理情况下 ,颗粒细胞能以细胞解体的方式 ,排出细胞内的颗粒 ,转化成有活性的酶 ,以此提高血淋巴中这几种酶的活性。透明细胞可以吞噬排放颗粒后的颗粒细胞 ,透明细胞中由高尔基体合成的酸性磷酸酶等溶酶体酶主要用于透明细胞的细胞内消化作用。研究认为 :3种血细胞因含有不同的免疫酶以及酶的作用方式不同而具有不同的免疫功能 相似文献
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以长蛸(Octopus variabilis)、短蛸(Octopus ocellatus)、真蛸(Octopus vulgaris)和曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)的血细胞为研究对象,通过光镜和电镜观察对血液中的血细胞形态结构进行比较。根据观察结果,将头足类血细胞分成3种类型:透明细胞,小颗粒细胞和颗粒细胞,但在真蛸血细胞中有一定数量的血细胞其细胞核呈马蹄形,因此将此类细胞独立划为马蹄形核细胞。通过比较发现,曼氏无针乌贼的血细胞与其它3个种存在明显的差异,其胞质内的颗粒数量与性质均与其它3个种有较明显的区别差异。从总体来看,头足类血细胞内含颗粒数量较少,其颗粒的数量与免疫力的强弱无直接关联。通过对比,推断真蛸血细胞中的马蹄形核细胞为透明细胞到小颗粒细胞的中间类型,从而得出此4个类型细胞有从透明细胞→马蹄形核细胞→小颗粒细胞→颗粒细胞的发育进程。 相似文献
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Mikel A. Marquiegui Florencio Aguirrezabalaga 《Estuarine, Coastal and Shelf Science》2009,84(4):598-604
The colonization process by macrobenthic infauna after the completion of managed realignment on the fertile plain of Jaitzubia, along the Bidasoa estuary, is assessed here. The benthic invertebrate fauna was sampled annually for three years in the newly recovered intertidal areas. The results show a rapid colonization process. Six months after the completion of the restoration works, all the stations exhibited a large number of small opportunistic benthic species, as well as some large individuals of Hediste diversicolor, that dominated the biomass of the community. One year later, a new stage of development or succession towards the settlement of the Scrobicularia plana–Cerastoderma edule community was observed, showing a reduction of both abundance and species richness, and an increase in biomass, mainly due to the presence of individuals of S. plana (which were absent previously). The following year, a further reduction in the abundance and number of species was observed, as well as an increase in biomass, but on this occasion S. plana was the main contributor to community biomass. Evidence of the importance of passive or active dispersion in the adult stage of the species H. diversicolor and S. plana in the recovery process was also observed. 相似文献
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Nereis diversicolor is generally considered to be a predator and deposit feeder, but have also been found to graze on benthic algae in shallow coastal areas. In this study we investigated the grazing effects on the development and growth of green algae, Ulva spp. Algal growth was studied in an experiment including two levels of sediment thickness; 100 mm sediment including macrofauna and 5 mm sediment without macrofauna, and three treatments of varying algal biomass; sediment with propagules, sediment with low algal biomass (120 g dry weight (dwt) m− 2) and sediment with high algal biomass (240 g dwt m− 2). In the 100 mm sediment, with a natural population of macrofauna, N. diversicolor was the dominating (60% of total biomass) species. After three weeks of experimentation the result showed that N. diversicolor was able to prevent initial algal growth, affect growth capacity and also partly reduce full-grown algal mats. The weight of N. diversicolor was significantly higher for polychaetes in treatments with algae added compared to non-algal treatments. There were also indications that a rich nutrient supply per algae biomass counteracted the grazing capacity of N. diversicolor. 相似文献
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本研究利用本实验室构建的脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)血细胞c DNA文库中的C-型凝集素基因EST序列,采用c DNA末端快速扩增(rapid amplification of c DNA end,RACE)技术克隆获得脊尾白虾C-型凝集素基因c DNA全长,命名为Ec CTL。该基因全长1285 bp,包含1041 bp的开放阅读框,编码346个氨基酸组成的蛋白质,分子量为38.56 k Da,为甘露糖型凝集素。同源性分析表明,脊尾白虾Ec CTL基因氨基酸序列与秀丽白虾(Palaemon modestus)的同源性最高,达到91%。荧光定量PCR分析结果表明,Ec CTL基因在血细胞、肝胰腺、肌肉等组织中均有表达,其中在肝胰腺当中的相对表达量最高。感染鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)后6~12 h,脊尾白虾血细胞和肝胰腺中Ec CTL的表达量较对照组均显著增加(P0.05),且具有明显的时间差异性。本研究证明脊尾白虾C-型凝集素在其免疫反应中起到重要作用,为进一步探索脊尾白虾免疫系统打下基础。 相似文献
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A. Ait Alla P. Gillet B. Deutsch A. Moukrim H. Bergayou 《Estuarine, Coastal and Shelf Science》2006,70(4):633
Field investigations on the population dynamics of Nereis diversicolor were carried out from January 2002 to December 2003 in the estuary of Oued Souss (southwestern Morocco) to determine the changes caused by setting up of a domestic and industrial wastewater purification plant (M'zar) before and after by the end of wastewater discharges in November 2002 on the structure of the ecosystem. Samples of N. diversicolor were collected monthly in the intertidal zone at low tide before (during 2002) and after (during 2003) the end of wastewater discharges.Separation of cohorts using the Algorithm EM method (McLachlan, G.J., Krishnan, T., 1997. The EM algorithm and extensions. Wiley Series in Probability and Statistics. Wiley, New York, 274 pp.) allowed determination of the growth rate (mm day−1) by cohort and the annual production. The data showed significant differences between populations of Nereis diversicolor before and after the end of wastewater discharges. During the wastewater discharge period (2002), the population had a mean annual density of 1992 ind m−2, a mean annual biomass of 75.52 g DW m−2 and an annual secondary production of 141.3 g DW m−2 with a P/B ratio of 1.87. After the end of discharges (2003), density, biomass and secondary production decreased significantly. The annual averages for these parameters were 740 ind m−2, 14.16 g DW m−2 and 23.83 g DW m−2, respectively, with a P/B ratio of 1.68.The important decrease observed in density, biomass and secondary production of Nereis diversicolor may be attributed (a) to the environmental changes observed after the end of wastewater discharges in the estuary of Oued Souss, namely the increase of salinity and the decrease of organic matter content, and (b) to the migration of this species towards other areas. 相似文献
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Runt结构域转录因子家族(Runx)在哺乳动物体内存在三种基因型,分别起着造血,骨生成和控制上皮细胞增殖的作用。本文应用反转录和c DNA末端快速扩增(RACE)技术,首次在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)中克隆并测序了一种Runt(lvrunt)基因全长。lvrunt c DNA全长1754bp,含有1个663bp长的开放阅读框,编码221个氨基酸,理论分子量为23.6k Da,具有Runt-family结构域。对凡纳滨对虾鳃、肠、肝胰腺、类淋巴、心脏、肌肉组织和血淋巴lvrunt的转录特征进行分析,结果显示该基因几乎特异性地在血淋巴细胞中表达,而在其他组织中表达较低。肌肉注射重组造血激素蛋白(r AST)或白斑综合征病毒(WSSV)粗提液均可显著提高lvrunt在凡纳滨对虾体内的转录表达。上述结果提示,lvrunt主要在血细胞发挥作用,可能作为造血激素的下游基因起到调节血细胞增殖和分化的作用,并在受到病毒感染后,参与提升血细胞数量或者促进血细胞分化的过程。 相似文献
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泥蚶(Tegillarca granosa)是我国传统养殖贝类,细菌性疾病导致的死亡已成为制约泥蚶养殖业发展的重要因素,血细胞是泥蚶免疫防御的执行者,血细胞能直接吞噬异物,能通过包囊作用将异物包裹,血细胞还在炎症反应和伤口修复中发挥作用。采用RNA-seq测序技术研究了溶藻弧菌体外刺激后泥蚶血细胞3h和6h时转录组动态变化,与未受刺激血细胞相比,3h时1790个基因表达发生显著改变,包括1319个上调基因和471个下调基因;6h时3183个基因表达发生显著改变,包括2629个上调基因和554个下调基因。KEGG通路富集分析发现溶藻弧菌刺激后免疫相关多个信号通路或生物学过程发生显著改变,如吞噬体、细胞凋亡、蛋白酶体、内质网加工、局部黏附等。部分免疫相关基因表达丰度3h时变化不显著而6h时发生显著改变,部分免疫相关基因3h和6h时表达丰度均显著改变。研究结果为泥蚶血细胞早期免疫反应提供了新的见解,为泥蚶抗病机理研究提供了理论基础。 相似文献
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以哈维弧菌(Vibrio harveyi)、鲍类疱疹病毒(Abalone herpesvirus,Ab HV)悬液对杂色鲍(Haliotis diversicolor)注射刺激,研究其血淋巴中可溶性总蛋白浓度,免疫相关酶超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、酸性磷酸酶(Acid Phosphatase,ACP)、碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,AKP)活性的变化,杂色鲍外套膜、鳃、肝胰腺、腹足中血蓝蛋白(Hemocyanin,Hc)基因Hc1、Hc2相对表达量的变化以及感染后杂色鲍无细胞血浆的抑菌性。结果显示:(1)杂色鲍血淋巴中可溶性总蛋白浓度变化显著,呈现出先升高后降低的趋势。(2)无细胞血浆中的SOD、ACP、AKP活性与对照组相比变化显著,哈维弧菌注射组的SOD活性在感染后第6小时显著升高;Ab HV注射组SOD活性与对照组比较在注射后的各个时相均呈下降趋势,从注射后6 h各个时相的SOD活性与对照组相比均差异显著(P0.05)。哈维弧菌注射组ACP活性在注射后的第48小时显著升高;Ab HV注射组ACP活性在注射后的第12小时显著升高。哈维弧菌注射组AKP活性在注射后48 h显著升高;AbHV注射组AKP活性在注射后第12小时显著升高。(3)杂色鲍外套膜、鳃、肝胰腺以及腹足中血蓝蛋白两个基因Hc1、Hc2的相对表达量均在注射后的不同时间点出现升高。(4)杂色鲍无细胞血淋巴对哈维弧菌、创伤弧菌和溶珊瑚弧菌这三种贝类病原均表现出了不同程度的抑菌性增强的作用。这些结果表明细菌和病毒的刺激引起了杂色鲍免疫相关因子的变化,使得血淋巴的抑菌性增强。本研究为今后进一步研究杂色鲍的非特异性免疫以及在生产实践中应用免疫技术防治病害提供参考。 相似文献