逆转录聚合酶链式反应中dsRNA模板的快速制备     

李军  王铁辉  陆仁后  徐怀恕 《中国海洋大学学报(自然科学版)》1996,(4)

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测草鱼出血病病毒。建立了一种快速、简易而可靠的ｄｓＲＮＡ模板的制备方法。应用该方法制备模板进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增，可以有效地检测出病鱼组织及病毒感染的培养细胞裂解液中的草鱼出血病病毒，且全过程只需３～４ｈ，大大缩短了检测时间  相似文献   

PCR引物设计   总被引：7，自引：0，他引：7  

王艳秋  张培军 《海洋科学》1995,19(5):9-10

多聚酶链式反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）又称无细胞分子克隆系统，是一种体外扩增特异ＤＮＡ片断的技术，１９８５年由美国Ｃｅｔｕｓ公司和加利福尼亚大学联合创建，是９０年代分子生物学领域的一项革命性突破，很快地在分子克隆、遗传病的基因诊断、法医学、考古学等方面得到了广泛应用。ＰＣＲ技术实际上就是在模板ＤＮＡ（ＴｅｍｐｌｅｔｅＤＮＡ）引物（Ｐｒｉｍｅｒ）和４种脱氧核糖核苷酸（ｄＡＴＰ，ｄＧＴＰ．ｄＣＴＰ，ｄＴＴＰ）存在的条件下依赖于ＤＮＡ聚合酶（Ｔａｑｓｅ）的酶促合成反应…  相似文献   

肿瘤放射治疗中扇贝硒蛋白的作用   总被引：5，自引：2，他引：3  

李翊  王海青  毛文君 《海洋科学》1999,23(2):63-65

以雄性昆明种小鼠为实验对象,在接种瘤株之前ｄ,放疗实验组以及扇贝硒蛋白（Ｓｅｌｅｎｉｕｍ－ＰｒｏｔｅｉｎｏｆＣｈｌａｍｙｓｆａｒｒｅｒｉ（ＳＰＣＦ）胃饲,接种Ｓ１８０瘤株后,继续胃饲,连续２２ｄ,结果表明,扇贝硒蛋白使肿瘤生长减缓,并使荷瘤鼠因放疗而下降的ＧＳＨ－Ｐｘ（Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）,ＳＯＤ（Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｎｔｕｓｅ）ＣＡＴ酶活性增强,ＬＰＯ（Ｌｉｐｉｄ  相似文献   

利用WSBV的引物扩增中国对虾的杆状病毒DNA     

汪岷  苏冬梅  包振民  邵济钧  戴继勋 《中国海洋大学学报(自然科学版)》1998,(4)

利用台湾报道的ＷＳＢＶ的ＰＣＲ引物,成功地扩增出了１４００ｂｐ左右的中国对虾的杆状病毒的ＤＮＡ片段,与预计的产物长度吻合。该引物对经初步离心处理的病虾组织也能扩增出特异性ＤＮＡ条带,而对正常虾组织ＤＮＡ、昆虫杆状病毒（ＡｃＭＮＰＶ）ＤＮＡ进行扩增,均获得阴性结果。说明该引物的特异性较高,对中国对虾的杆状病毒的检测具有一定的实际应用价值。实验结果同时说明ＷＳＢＶ与中国对虾的杆状病毒有同源序列存在,具有一定的保守性;用该引物进行的ＰＣＲ扩增为中国对虾的杆状病毒与其他相关病毒的比较研究提供了一种技术手段。  相似文献   

Transgressions of Late Cretaceous to Early Tertiary in Eastern China     

Qiu Songyu  Lu Bingli  Chen Yongcheng 《海洋地质与第四纪地质》1994,(1)

ＴＲＡＮＳＧＲＥＳＳＩＯＮＳＯＦＬＡＴＥＣＲＥＴＡＣＥＯＵＳＴＯＥＡＲＬＹＴＥＲＴＩＡＲＹＩＮＥＡＳＴＥＲＮＣＨＩＮＡＱｉｕＳｏｎｇｙｕ，ＬｕＢｉｎｇｌｉ，ＣｈｅｎＹｏｎｇｃｈｅｎｇ（ＪｉｌｉｎＨｅａｄｑｕａｒｔｅｒｓＯｆＰｅｔｒｏｌｅｕｍＰｒｏｓｐ...  相似文献   

白斑综合症杆状病毒（WSBV）PCR检测方法的改进及应用   总被引：7，自引：0，他引：7  

吕玲  何建国 《热带海洋》2000,19(2):90-96,T001

斑节对虾Ｐｅｎａｅｕｓ ｍｏｎｏｄｏｎ白斑综合症是由白斑综合症杆状病毒（ＷＳＢＶ）所致。患有典型斑综合症的斑节对虾,用两种提取病毒模板ＤＮＡ的方法,进行ＰＣＲ扩增：一咱是用传统的方法,即蛋白酶Ｋ,ＣＴＡＢ等消化,酚／氯仿抽提,乙醇沉淀得到ＤＮＡ;另一咱是用改进的煮沸法提取病毒ＤＮＡ。对比发现且一种方法稳定性及敏感性比前者高,重复性好。用后一种方法对病虾 的复眼进行检测,ＰＣＲ结果为阳性。应用后一种  相似文献   

南海有毒塔玛亚历山大藻的分子地理标记分析   总被引：10，自引：0，他引：10  

陈月琴  邱小忠  屈良鹄  曾陇梅  齐雨藻  郑磊 《海洋与湖沼》1999,30(1):45-51

采用聚合酶链扩增反应（ＰＣＲ）和限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ）方法,对１９９２年５月和１９９４年１２月采自中国南海大鹏湾,大亚湾,香港海域的赤潮有毒甲藻塔玛亚历山大藻８个不同地理株的核糖体小亚基ＲＮＡ基因（Ｓｓ－ｒＤＮＡ）进行分析,并与北美,西欧等地的比较。结果表明,中国南海的塔玛业历山大藻缺少Ｂ基因,这与北美等地的塔玛亚历山大藻（包括有毒和无毒株）不同,而与西欧,澳洲等地的有毒和无毒株相似  相似文献   

中韩合作南黄海第四纪地质对比研究之进展     

李绍全 《海洋地质与第四纪地质》1997,17(2):8-8,28

中韩合作南黄海第四纪地质对比研究之进展ＰＲＯＧＲＥＳＳＯＦＳＩＮＯ－ＫＯＲＥＡＱＵＡＴＥＲＮＡＲＹＧＥＯＬＯＧＩＣＣＯＲＲＥＬＡＴＩＯＮＳＴＵＤＹＯＦＴＨＥＳＯＵＴＨＹＥＬＬＯＷＳＥＡ黄海是典型的冰后期的边缘海，中韩两国共享南黄海陆架。黄海及其陆架对...  相似文献   

几种鱼类培养细胞对不同干扰素敏感性的研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

张义兵  王铁辉 《海洋湖沼通报》2000,(3):1-5

本文研究了四种鱼类培养细胞ＣＩＫ、ＣＡＢ、ＧＣＢ、ＢＲＥ对Ｈｕｉｆｎ－ａ,ＣＩＫ、ＣＡＢ、ＧＣＢ、ＧＲＥ、ＦＨＭ等五种鱼类培养细胞干扰素作用的敏感性。这四种鱼类培养细胞对ＨｕＩＦＮ－ａ不敏感,对五种鱼类培养细胞干扰素表现出相对一致的敏感性差异,其中ＧＲＥ细胞对鱼类干扰素最敏感,其次为ＣＡＢ、ＧＣＢ。ＣＩＫ细胞能产生高滴度的干扰素但对鱼类干扰素不敏感。不同病毒对干扰素作用的敏感性也不同。  相似文献   

用逆转录聚合酶链式反应检测草鱼出血病病毒的研究   总被引：4，自引：1，他引：4  

王铁辉  李军  易咏兰  周立冉  刘汉勤  陆仁后  陈宏溪 《海洋与湖沼》1997,28(1):1-6

于1994年5月-1995年7月，根据已克隆的草鱼出血病病毒GCHV-861株cDNA的部分序列，设计合成了两对PCR引物，采用RT-PCR技术对GCHV-861及GCHV-873两病毒株的dsRNA进行扩增。结果表明，两对引物仅能特异地检测出GCHV-861病毒株核酸的存在，而不能对GCHV-873病毒株的核酸进行特异扩增，该方法最小可检测出0.1Pg纯化的GCHV-861病毒dsRNA;采用该方法对GCHV-861人工感染的草鱼和稀有鲫组织进行RT-PCR检测，不仅能检测到发病期显症病鱼中GCHV-861病毒的存在，还能检测发病前期及愈后无出血病症状的病毒携带者中病毒的存在;利用该方法还从本所关桥实验场出血病流行季节收集的发病草鱼体内检测出GCHV的存在，说明所设计的引物具有一定的实际意义;利用该法还能检测出感染病毒的组织培养细胞系GCK和CIK上清液中GCHV的存在。还建立了简易的模板制备方法，采用该方法整个检测过程只需3-4h，可大大缩短检测时间。由此可见，RT-PCR技术是检测GCHV的快速、灵敏而特异的方法，发展和完善该技术对草鱼出血病的早期诊断和防治、抗病育种具有重要意义。  相似文献   

厦门港湾沉积物中有机氯农药和多氯联苯的垂直分布特征   总被引：11，自引：0，他引：11  

陈伟琪  张珞平  徐立  王新红  洪华生 《海洋科学》1996,20(2):56-60

从厦门港海区采集两根沉积柱样，研究有机氯农药六六六（ＨＣＨｓ），滴滴涕（ＤＤＴｓ）和多氯联苯（ＰＣＢｓ）在沉积物中的垂直分布，ＨＣＨｓ，ＤＤＴｓ及ＰＣＢｓ含量用ＧＣ法测定，取自厦门港湾口的１号柱样ＨＣＨｓ，ＤＤＴｓ和ＰＣＢｓ的含量范围分别为０．１２～ ０．３２ｎｇ／ｇ，４．６４～１０．５ｎｇ／ｇ和０．０９～０．４６ｎｇ／ｇ取自厦门西港内湾的５号柱样采分别为０．１７～０．３１ｎｇ／ｇ，３．６５  相似文献   

厄尔尼诺异常十年尺度的横越太平洋的传播以及增温效应     

G.A.Jacobs张光威  王圣洁 《海洋地质前沿》1995,(11):11-13

厄尔尼诺异常十年尺度的横越太平洋的传播以及增温效应Ｇ．Ａ．Ｊａｃｏｂｓ等黑潮范围以外区域的观测资料来自卫星测高和红外线遥感数据。海平面高度（ＳＳＨ）大的变动通过Ｇｅｏｓａｔ－ＥＲＭ和ＥＲＳ－１卫星测高数据的分析清晰可见，造成ＳＳＨ变化的原因是１９８８...  相似文献   

进口PC－E500之概况     

曹来发 《海洋技术学报》1994,(4)

进口ＰＣ－Ｅ５００之概况曹来发（华北电力设计院）ＳＨＡＲＰＰＣ－１５００机自１９８２年初问世以来，型号已发展为ＰＣ－１２００系列、ＰＣ－１３００系列、ＰＣ－１４００系列；１９８６年开始，日本ＳＨＡＲＰ公司推出了多ＣＰＵ的ＰＣ－１６００和ＰＣ－１６００...  相似文献   

台湾海峡西部海水二氧化碳体系各分量与环境因子的相关性     

郭水伙 《台湾海峡》1995,14(4):320-327

据１９８４年５月至１９８５年２月调查资料，计算了该水体中二氧化碳体系各分量的含量，研究了它们与ｐＨ，ＨＣＯ＾－３／ＣＯ＾２－３，Ａｌｋ，ＤＩＮ，ＰＯ＾３－４－９，Ｃｈｌ－ａＤＯ，Ｓ，ｔ等环境因子的相关性。结果表明ＰＣＯ３，ＣＯ２（Ｔ），ＨＣＯ＾－３，ＣＯ＾２－３与ｐＨ，ＨＣＯ＾－３／ＣＯ＾２－３呈极显著的线性相关；ＨＣＯ＾－３，ＣＯ＾２－３ΣＣＯ２与Ａｌｋ也呈非常显著的线性相关。  相似文献   

中华鲟随机扩增多态性DNA及遗传多样性研究   总被引：43，自引：5，他引：43  

张四明  邓怀  晏勇  汪登强  吴清江 《海洋与湖沼》2000,31(1):1-7

采用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术进行了连续３年（１９９５－１９９７）共７０尾来源于长江水系中华鲟样本遗传分析,共用了４０个１０ｂｐ长的随机引物,在２６种可供分析的引物中,只有ＯＰＫ０１、ＯＰＫ０２、ＯＰＫ０３、ＯＰＫ０９、ＯＰＫ１４和ＯＰＱ０８ＲＡＰＤ－ＰＣＲ产物有多态现象,多态引物占２３％。２６个引物中共扩增出１０８条稳定的ＤＮＡ带。其中１２条带为多态带,多态座位比例为１１．１％。个体间  相似文献   

西太平洋暖池区气象学特征分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴增茂  张庆荣 《海洋湖沼通报》1994,(2):113-119

本文根据ＴＯＧＡ－ＣＯＡＲＥ强化观测资料及卫星资料分析讨论了西太平洋暖池区１１－２月间海面气象要素的平均特征。分析发现海面气压平均日变化似乎同中纬度区明显不同。文中还分析讨论了在西太暖池区西风爆发、赤道浅涡、信风逆温及ＩＴＣＥ和南太平洋辐合带ＳＰＣＺ的变化特征。  相似文献   

副溶血弧菌菌株1211U的活的非可培养状态   总被引：3，自引：2，他引：1  

姚斐  寇运同  陈刚  纪伟尚  徐怀恕 《海洋科学》2000,24(6):52-54

将副溶血弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）菌株１２１１培养于低温贫养条件下,以平板菌落计数法（ＰＣ）和最大近似数法（ＭＰＮ）检测可培养细菌数,５０￣６０ｄ后表明可培养数下降为零。吖啶橙荧光显微镜直接计数法（ＡＯＤＣ）检测细菌总数,表明细菌总数始终变化不大,而活菌直接计数法（ＤＶＣ）检测到的活菌数保持在１０＾５个／ｍｌ。本实验证明了副溶血弧菌１２１１Ｕ株在一定的条件下或进入活的非  相似文献   

蜈蚣藻和管形藻的RAPD分析   总被引：2，自引：1，他引：1  

王茜  安利佳  杨君  苏乔  王宏伟  康晓慧 《海洋与湖沼》2000,31(5):506-510

于１９９７年９月在大连石庙海区分株采集蜈蚣藻、管形藻和舌状蜈蚣藻,采用ＲＡＰＤ技术在分子水平上对属于红藻门的两种藻类－蜈蚣藻和管形藻进行了分析,所试６０个引物中,有２１个经扩增得到了１２０个多态片段。应用ＰＨＹＮＩＰ软件,按照ＵＰＧＭＡ和ＮｅｉｇｈｂｏｒＪｏｉｎｉｎｇ（Ｎ－Ｊ）法分别构建降类图。分析结果表明,ＲＡＰＤ多态性提示蜈蚣藻和管形藻差异较大,应为两个不同的属。  相似文献   

沃克环流上升区赤道低空强西风带的分析     

李若钝  井传才 《热带海洋》1995,14(1):38-45

采用ＴＯＧＡ／ＣＯＡＲＥ国际合作考察期间（１９９２年１０月－１９９３年２月）获得的２６７次定点（２°Ｓ，１５５°Ｅ）定时高空大气探测资料，进行计算分析，发现１９９２年１２月－１９９３年２月低空存在一支西风急流，有两次分别持续半月之久，而１９９２年１１月的两次赤道西风急流，因无赤道高空急流配合，仅持续２ｄ便消失，本文还指出：（１）赤道低空西风急流是各种海－气指数产生ＥＮＳＯ异常的重要信息；（２）赤道  相似文献   

厦门西港表层沉积物中DDTs,HCHs和PCBs的含量与分布   总被引：5，自引：0，他引：5  

张珞平  陈伟琪 《热带海洋》1996,15(1):91-95

对厦门西港表层沉积物中有机氯农药和多氯联苯的含量与分布进行调查研究。含量范围：ＨＣＨｓ为０．１４－１．１２ｎｇ．ｇ＾－１，ＤＤＴｓ４．４５－３１１ｎｇ．ｇ＾－１，ＰＣＢｓ０．０５－７．２４ｎｇ．ｇ＾－１。与香港维多利亚港表层沉积物含量进行比较，厦门西港表层沉积物的ＰＣＢｓ含量低于维多利亚港，ＤＤＴｓ含量则高于维多利亚港。  相似文献