几种鱼类培养细胞对不同干扰素敏感性的研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

张义兵  王铁辉 《海洋湖沼通报》2000,(3):1-5

本文研究了四种鱼类培养细胞ＣＩＫ、ＣＡＢ、ＧＣＢ、ＢＲＥ对Ｈｕｉｆｎ－ａ,ＣＩＫ、ＣＡＢ、ＧＣＢ、ＧＲＥ、ＦＨＭ等五种鱼类培养细胞干扰素作用的敏感性。这四种鱼类培养细胞对ＨｕＩＦＮ－ａ不敏感,对五种鱼类培养细胞干扰素表现出相对一致的敏感性差异,其中ＧＲＥ细胞对鱼类干扰素最敏感,其次为ＣＡＢ、ＧＣＢ。ＣＩＫ细胞能产生高滴度的干扰素但对鱼类干扰素不敏感。不同病毒对干扰素作用的敏感性也不同。  相似文献   

用逆转录聚合酶链式反应检测草鱼出血病病毒的研究   总被引：4，自引：1，他引：4  

王铁辉  李军  易咏兰  周立冉  刘汉勤  陆仁后  陈宏溪 《海洋与湖沼》1997,28(1):1-6

于1994年5月-1995年7月，根据已克隆的草鱼出血病病毒GCHV-861株cDNA的部分序列，设计合成了两对PCR引物，采用RT-PCR技术对GCHV-861及GCHV-873两病毒株的dsRNA进行扩增。结果表明，两对引物仅能特异地检测出GCHV-861病毒株核酸的存在，而不能对GCHV-873病毒株的核酸进行特异扩增，该方法最小可检测出0.1Pg纯化的GCHV-861病毒dsRNA;采用该方法对GCHV-861人工感染的草鱼和稀有鲫组织进行RT-PCR检测，不仅能检测到发病期显症病鱼中GCHV-861病毒的存在，还能检测发病前期及愈后无出血病症状的病毒携带者中病毒的存在;利用该方法还从本所关桥实验场出血病流行季节收集的发病草鱼体内检测出GCHV的存在，说明所设计的引物具有一定的实际意义;利用该法还能检测出感染病毒的组织培养细胞系GCK和CIK上清液中GCHV的存在。还建立了简易的模板制备方法，采用该方法整个检测过程只需3-4h，可大大缩短检测时间。由此可见，RT-PCR技术是检测GCHV的快速、灵敏而特异的方法，发展和完善该技术对草鱼出血病的早期诊断和防治、抗病育种具有重要意义。  相似文献   

草鱼出血病病毒的研究进展   总被引：13，自引：1，他引：12  

李军  王铁辉  陆仁后  陈宏溪 《海洋与湖沼》1999,30(4):445-453

根据８０－９０年代中国关于草鱼出血病病毒研究的进展,就草鱼出血病病毒的发现、形态结构特征、理论特性、基因组结构及其所编码的多肽、基因组的转录和翻译过程,病毒的繁殖动态、体外细胞培养特性,病毒对鱼体的致病机理和宿主范围,草鱼出血病的诊断和防治等问题进行综合评述,总结概括了草鱼出血病病毒的研究现状以及研究中需要亟待解决的问题,并提出该领域以后的重点研究方向。  相似文献   

鱼类病毒检测技术   总被引：5，自引：0，他引：5  

李军  王铁辉 《海洋湖沼通报》1996,(2):58-65

鱼类病毒病是危害养殖鱼类最严重的一类疾病，宿主几乎遍及所有养殖鱼类。近年来，鱼虾病毒性病害给鱼类增养殖业带来巨大的经济损失。由于病毒独特的生物学特性以及鱼类特定的水生环境特点，使得鱼类病毒病的预防及治疗较其他陆生动物更加困难。目前还没有控制鱼类病毒的有效药物，因而，对付鱼类病毒性疾病的主要措施是预防感染，而监测健康鱼以及对病毒携带者的有效检测和鉴定是有效预防的基础。本文简要综述应用于鱼类病毒检测和鉴定的主要技术。一、电子显微镜技术电镜技术是研究微观世界的强有力的武器，病毒学研究中应用最多，成效卓…  相似文献   

逆转录聚合酶链式反应中dsRNA模板的快速制备     

李军  王铁辉  陆仁后  徐怀恕 《中国海洋大学学报(自然科学版)》1996,(4)

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测草鱼出血病病毒。建立了一种快速、简易而可靠的ｄｓＲＮＡ模板的制备方法。应用该方法制备模板进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增，可以有效地检测出病鱼组织及病毒感染的培养细胞裂解液中的草鱼出血病病毒，且全过程只需３～４ｈ，大大缩短了检测时间  相似文献   

用逆转录聚合酶链反应检测草鱼出血病病毒的研究   总被引：3，自引：1，他引：3  

王铁辉  李军 《海洋与湖沼》1997,28(1):1-6,T001

于１９９４年５月－１９９５年７月，根据已克隆的草鱼出现血病病毒ＧＣＨＶ－８６１株ｃＤＮＡ的部分序列，设计合成了两对ＰＣＲ引物，采用ＲＴ－ＰＣＲ技术对ＧＣＨＶ－８６１ＧＣＨＶ－８７３两病毒株的ｄｓＲＮＡ进行扩增，结果表明，两对引物仅能特异地检测了ＧＣＨＶ－８６１病毒株核素的存在，而不能对ＧＣＨＶ－８７３病毒株的核酸进行特异扩增，该方法是最小可检测出０．１ｐｇ纯化的ＧＣＨＶ－８６１病毒ｄｓＲＮＡ，采用  相似文献