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在动植物病原体的检测中,方法学历经了生物培养、显微镜观察、生化检测、免疫学到分子生物学几个阶段的变更,朝着更特异、更快速、更便捷、更安全、集成化、微量化、定量化、费用低廉化的方向发展。传统病原检测主要依据致病病原体在介质或细胞中的培养、分析病原体表型或血清型特征,或采用组织学检测病原体对宿主器官的影响[1]。这类方法耗时、特异性和灵敏度低,远远不能满足日常快速检测工作的需要。免疫学方法可以在一定程度上缩短检验时间,就灵敏度而言,酶联免疫吸附试验(ELISA)要高于免疫荧光、反向免疫凝胶电泳和免疫扩散,是最常用的免疫学检测病原体方法[2]。 相似文献
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染色法测量坡面流流速的最佳测流区长度研究 总被引：7，自引：0，他引：7
染色法是测定坡面流流速最常用的方法,但对测流区长度的选择没有统一标准.统一测流区长度不仅能减少流速测定误差,还能提高不同试验间的可比性.本文采用室内变坡水槽试验,用染色法测量表面最大流速并计算平均流速时,选择6个常见测流区长度,以流量法计算的平均流速为参照值,选取5个统计参数(RRMSE、RE、NSE、R2、MAE)作为评价指标,将不同测流区长度下染色法与流量法所获得的平均流速进行比较,分析染色法测量坡面流流速的最佳距离.研究结果表明:当测流区长度为2m和3m时,RRMSE都较小;在2m处,RE、MAE达到最小,NSE、R2最接近1,此时染色法测定的流速与流量法计算的流速最为接近.因此,用染色剂法测量坡面流速度的最佳距离应选在2m. 相似文献
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自体荧光是生物体内部组织成分在吸收光时自然发出的荧光,会影响人工标记荧光的有效识别,严重干扰对抗体标记的目的蛋白荧光的观察及数据分析,在珊瑚冰冻切片免疫荧光标记研究中尤为突显。为更有效地去除珊瑚组织切片中的自体荧光,本研究以共生模式种花伞软珊瑚（Xenia sp.）为研究对象,首次尝试在花伞软珊瑚冰冻切片免疫荧光染色中,使用一种在小鼠和人体组织切片中常用的TrueBlack Lipofuscin自体荧光淬灭剂,并与已有研究中的酒精梯度脱水法进行比较。结果表明,使用荧光淬灭剂TrueBlack Lipofuscin后,花伞软珊瑚组织切片中的自体荧光强度是传统的酒精梯度脱水法的52.4%,且在Cy5通道下效果最佳。同时,通过珊瑚免疫荧光标记实验表明使用TrueBlack Lipofuscin的实验组特异性荧光信号强度为对照组的205.3%,背景荧光和自体荧光基本去除。 相似文献
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80年代以来 ,肝胰脏细小病毒病在养殖中国对虾中广泛流行并造成了一定的损失。作者采用免疫金银染色 (immunogold silver staining,IGSS)技术 ,对患病对虾肝胰脏中的细小病毒(Hepatopancreatic parvovirus,HPV)进行了免疫组织化学的研究。结果表明 ,经 IGSS染色的病虾肝胰脏上皮细胞核内出现了黑色的、圆形或椭圆形、大小为 3～ 15μm的结构。由于该结构与 H- E染色切片上出现的肝胰脏细小病毒包涵体在发生部位、形态和大小上皆一致 ,故而认为该结构为HPV包涵体。证明 ,免疫金银染色法是一种可应用于中国对虾肝胰脏细小病毒病诊断的有效方法。 相似文献
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锯缘青蟹精子低温冷藏及精子活力的染色法评价 总被引：11，自引：0，他引：11
采用天然海水配制的台盼蓝染色液和曙约B染色液对低温冷冻的锯缘青蟹精子的活力进行评价研究。结果表明，用这两种染色液染色死活精子呈现出明显不同的特征，进而以无锡离子人工海水（Ca^2 -FSW)为冷冻基础液，分别用10％（V／V）甘油、5％（V／V）二甲亚砜（DMSO）作冷冻剂，进行了4℃液态低温保存的精子实验，对照组不加冷冻剂，以Ca^2 -FSW等量代替，同时采用染色法对保存精子活力进行评价，结果显示台盼蓝不适宜于评价甘油组精子的活力，但却能评价对照组和二甲亚砜组。在24h内，二甲亚砜组精子的存活率达58．7％，而对照组仅为30．2％。可见，染色法可以作为低温冷冻保存的锯缘青蟹精子活力评价的一种有效方法。 相似文献
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目的：观察月华丸（胶囊）对结核分枝杆菌感染巨噬细胞自噬的影响，探寻其抗结核分枝杆菌的药效药理作用及其机制。方法：以月华丸（胶囊）含药血清干预感染结核分枝杆菌小鼠的单核巨噬细胞（RAW264.7），实验共分为5组：阴性对照组、10%月华丸（胶囊）含药血清组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）+月华丸（胶囊）含药血清组、自噬诱导剂雷帕霉素（Rep）组，另设未被感染的细胞为正常组。采用免疫荧光染色法检测LC3。结果：阴性对照组细胞胞浆中未见LC3蛋白颗粒。与阴性对照组比较，3-MA+月华丸（胶囊）含药血清组细胞胞浆中可见少量LC3蛋白颗粒，10%月华丸（胶囊）含药血清组及Rep组细胞胞浆LC3蛋白颗粒均明显增多，3-MA+月华丸（胶囊）含药血清组多于10%月华丸（胶囊）含药血清组。结论：月华丸（胶囊）含药血清能诱导被耐多药结核菌感染巨噬细胞自噬。 相似文献
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为探究神经肽在刺参(Apostichopus japonicus)幼体中的潜在功能,丰富对刺参神经生理学的认识。本研究利用免疫荧光和荧光定量技术初步探究了刺参的luqin型神经肽AjLQ及其前体基因AjLQP在刺参典型的早期发育阶段(囊胚期、原肠胚期、耳状幼虫期、樽形幼虫期和五触手幼虫期)的分布及表达特征。免疫荧光结果显示,在游泳、摄食和附着相关组织中观察到AjLQ阳性信号;荧光定量结果显示,在刺参幼体开始摄食的耳状幼虫期AjLQP基因的表达量显著高于其他早期发育阶段AjLQP基因的表达量。研究结果表明,luqin型神经肽是刺参幼体摄食、游泳和附着的潜在调控子。 相似文献
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间接免疫荧光抗体技术检测活的非可培养状态的副溶血弧菌 总被引：5，自引：0，他引：5
副溶血弧菌 (Ｖｉｂｒｉｏｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ)是在海洋及盐湖环境中分布极为广泛的一种致病性嗜盐细菌 ,一般在冬季用常规方法不易将其检出［１］,并且在冬季的暴发频率和发病水平都远远低于夏季。Ｗｏｌｆ和Ｏｌｉｖｅｒ于１９９２年 ,Ｊｉａｎｇ等［３］均发现副溶血弧菌在低温贫营养的条件下可进入活的非可培养状态 (ＶｉａｂｌｅＢｕｔＮｏｎｃｕｌｔｕｒａｂｌｅＳｔａｔｅ,ＶＢＮＣ),即细菌处于不良环境条件下 ,细胞缩成球形 ,用常规方法培养不能使其生长繁殖 ,但仍然是活的一种特殊存活形式［１］。作者在对副溶血… 相似文献