三疣梭子蟹几丁质酶基因(PtCht6)的克隆及其在免疫中的功能分析     

宋柳  吕建建  王磊  孙东方  刘萍 《海洋与湖沼》2019,50(5):1080-1090

几丁质酶(chitinase)在甲壳动物的蜕皮、消化和免疫等很多生物学过程中发挥重要功能,为深入探讨几丁质酶的免疫防御机制,本实验利用RACE技术克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)PtCht6基因。该基因cDNA全长2736bp,开放阅读框(ORF)2103bp,编码700个氨基酸,具有几丁质酶GH18家族典型特征。利用实时荧光定量技术分析PtCht6在三疣梭子蟹不同组织、不同蜕皮阶段、不同病原感染以及低盐胁迫(11)下的表达特征,结果显示:PtCht6在各组织中均有表达且在肝胰腺中的表达量最高;在不同蜕皮时期的肝胰腺中,其表达量由蜕皮后期(A/B)、蜕皮间期(C)、蜕皮前期(D)依次递减(P0.05);人工感染WSSV和副溶血弧菌后.PtCht6的表达量在肝胰腺中分别于12h、72h达到最大值,在血细胞中均于12h达到最大值,且相较于对照组,整体显著上调表达(P0.05);低盐胁迫能够显著抑制该基因的表达,最高抑制73倍(P0.05)。同时发现,低盐环境下感染WSSV后,该基因达到峰值的时间明显延迟(至少延迟12h.P0.05)。该研究结果预示PtCht6作为免疫因子参与三疣梭子蟹的病原防御,且低盐胁迫在一定程度上抑制了该基因的免疫功能。  相似文献   

Molecular detection of microbial communities associated with Microcystis vs Synechococcus dominated waters in Tianjin,China     

霍达  陈友信  刘萍  李一鸣  乔之怡  李仁辉 《中国海洋湖沼学报》2018,(4)

Harmful cyanobacterial blooms cause many ecological disasters worldwide. During the development of cyanobacterial blooms, the diversity and domination of cyanobacterial taxa are of a particular concern. In this study, the microbial community structure within a water system, such as in Yuqiao Reservoir and Haihe River in Tianjin City, China, was compared by using next-generation sequencing. A total of 5 001 operational taxonomic units were obtained and clustered from filtered 16 S rDNA V3–V4 region sequences. The cyanobacterial and microbial structures greatly differed in these two water areas. Microcystis was dominant in Yuqiao, whereas Synechococcus was dominant in Haihe. Proteobacteria species were dominant among all detected samples. The relative abundances of Bacteroidetes and Planctomycetes were higher in Yuqiao Reservoir than in Haihe River, whereas Firmicutes and Verrucomicrobia were relatively abundant in Haihe River. Further analyses indicated that the domination of both cyanobacteria was strongly related to several environmental factors, such as total nitrogen, total phosphorus, and dissolved oxygen, reflecting the role of trophic states in shaping the dominance of cyanobacterial taxa. The present study provided the example for Microcystis and Synechococcus dominance along a cyanobacterial bloom in north China. Applying highthroughput sequencing could offer a wide field of vision in analyzing microbial community structures.  相似文献   

基于微卫星标记的三疣梭子蟹家系系谱认证   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘磊  李健  刘萍 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2012,(Z2):38-44

用6个微卫星标记对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的6个家系进行系谱鉴别和遗传多样性研究。6个微卫星标记在6个家系中显示了高度的遗传差异,6个位点的多态信息含量(PIC)分别为Pot09位点0.6045,Pot14位点0.6072,Pot17位点0.8130,Pot18位点0.6870,Pot25位点0.7839,Pot42位点0.6330。6个多态性位点共发现了32个等位基因,每个位点的等位基因数在4～8个之间。不同位点共发现7个家系特异性等位基因,2#和3#家系中各发现2个,1#、5#、6#家系中各发现1个,4#家系未发现特异性等位基因。根据已知亲本及子代基因型,可推断出6个家系中全部亲本的基因型,据此鉴别各家系。在Pot18位点可将1#家系和6#家系与其他家系相区别;Pot14位点和Pot17位点可将3#家系与其他家系相区别;Pot42位点可将5#与其他家系相区别;Pot17位点和Pot25可将2#家系与其他家系相区别。因此,Pot18位点、Pot14位点和Pot17位点、Pot42位点、Pot17位点和Pot25位点可分别用于鉴别1#和6#家系、3#、5#、2#家系的特异性标记。研究表明,在选用的6个微卫星标记中,最少选用3个标记可鉴别6个三疣梭子蟹家系。  相似文献   

随钻801堵漏剂的性能及其机理     

彭振斌  刘萍 《地质与勘探》1992,28(3):55-58

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脊尾白虾C-型凝集素基因cDNA全长的克隆和表达分析     

王有昆  刘萍  李吉涛  李健 《海洋科学》2016,40(8):27-34

本研究利用本实验室构建的脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)血细胞c DNA文库中的C-型凝集素基因EST序列,采用c DNA末端快速扩增(rapid amplification of c DNA end,RACE)技术克隆获得脊尾白虾C-型凝集素基因c DNA全长,命名为Ec CTL。该基因全长1285 bp,包含1041 bp的开放阅读框,编码346个氨基酸组成的蛋白质,分子量为38.56 k Da,为甘露糖型凝集素。同源性分析表明,脊尾白虾Ec CTL基因氨基酸序列与秀丽白虾(Palaemon modestus)的同源性最高,达到91%。荧光定量PCR分析结果表明,Ec CTL基因在血细胞、肝胰腺、肌肉等组织中均有表达,其中在肝胰腺当中的相对表达量最高。感染鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)后6~12 h,脊尾白虾血细胞和肝胰腺中Ec CTL的表达量较对照组均显著增加(P0.05),且具有明显的时间差异性。本研究证明脊尾白虾C-型凝集素在其免疫反应中起到重要作用,为进一步探索脊尾白虾免疫系统打下基础。  相似文献   

沸石在水产养殖中的应用概况   总被引：1，自引：2，他引：1  

李健  刘萍 《海洋科学》1996,20(4):39-40

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仿刺参(Apostichopus japonicus) mtDNA三个基因片段的序列分析   总被引：10，自引：0，他引：10  

李颖  刘萍  孙慧玲  马甡  高天翔  王清印 《海洋与湖沼》2006,37(2):143-153

采用PCR技术对中国烟台、威海和莱州三个地点仿刺参的16S rRNA、COI、IrRNA-COI三个mtDNA基因片段进行了扩增和测序,分别得到了长度约为570bp、640bp和900bp的三段序列,分析了三个采样点样品的遗传多样性。结果表明,每段基因序列扩增均获得两种单倍型,已在Genbank中注册(注册号码:AY852278—AY852283)。通过比较,三个地点样品的序列差异不显著,无缺失、插入、颠换的现象,只有个别位点出现转换,其中16S rRNA序列最为保守,16S rRNA、COI、IrRNA-COI三段序列A T的平均含量为56·2%、59·2%、61·8%,均大于G C含量。三个采样点样品同源性为99·84%—99·96%。将获得的仿刺参DNA序列和Genbank中的来自东太平洋8个外群进行基因序列比较,结果发现,不同目、科的海参的序列差异显著。采用DNAsp统计了各类位点数;MEGA2·1分析了碱基组成和遗传距离,构建了系统树。系统树体现的分类关系与这些物种的形态学分类关系完全一致。  相似文献   

中国对虾一种C型杆状病毒随机扩增多态性DNA分析   总被引：13，自引：1，他引：13  

孔杰  石拓  刘萍  韩玲玲  徐怀恕  相建海 《海洋与湖沼》1997,28(4):394-398

于１９９４年和１９９５两年的７月从青岛崂山上马镇养虾场中染病的中国地虾中分离纯化出一种Ｃ型杆状病毒。为建立中国对虾病毒的鉴别和检测技术，利用随机扩增多态性ＤＮＡ技术对电泳纯化的病毒ＤＮＡ进行分析和研究。将病虾匀浆、经差速离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得完整病毒粒子；从病毒中提取ＤＮＡ后再进行电泳纯化，收集长度完整，均一的病毒ＤＮＡ：在其他参数保持不变的情况下，对Ｏｐｅｒｏｎ生产的１０碱基随机引物Ｋ试  相似文献   

矿业遗迹的开发和矿山公园的建设   总被引：1，自引：0，他引：1  

侯万荣  黄志强  陈小伍  刘萍  胡鸿飞 《西部资源》2005,(4)

矿业为国民经济发展提供了资源方面的保证,为我国工业化、城市化和农业现代化奠定了基础,推动了经济发展、社会进步和城市化进程。随着社会的发展,人们对生活质量要求的提高, 对自己周围环境的重视,加上可持续发展战略的提出,矿业城市因矿产资源开发造成的环境问题日益引起人们的关  相似文献   

新生单体在中空发展成降雹单体的一次过程分析     

宋丽亚  朱玉民  刘萍 《沙漠与绿洲气象(新疆气象)》2003,26(6):23-25

根据2002年8月5日新疆昭苏盆地的雷达回波资料，对该雹云初始雷达回波的出现及演变过程的主要特征进行分析。  相似文献