壳聚糖酶基因在解脂耶氏酵母中的表达及重组酶性质研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘万顺  王娇  杨艳  韩宝芹  董文  刘光磊  池振明 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2011,41(12):58-62

为构建高效表达壳聚糖酶工程菌株,以Microbacteriumsp.基因组为模板扩增壳聚糖酶基因,目的基因与表达载体pINA1317连接构建重组质粒,重组质粒NotⅠ酶切线性化后转化解脂耶氏酵母Y.liPolytica Po1h。所得结果为PCR扩增得到约1000bp的特异性片段,序列分析表明含有壳聚糖酶全长基因,开放阅读框801bp,编码266个氨基酸残基。转化子酶活力为10.4U/mL,是原菌株酶活力的3.15倍。重组蛋白经DEAE-Sepharose FF分离纯化,达到电泳纯,SDS-PAGE显示单一条带,分子量约41kDa。重组酶反应最适温度为45℃,最适pH为5.6,Km和Vmax分别是0.926mg/mL和6.15U/mL。质谱分析酶解产物主要为三糖和五糖。实现了壳聚糖酶在解脂耶氏酵母中的分泌表达,为壳聚糖酶的工业化生产奠定了理论基础。  相似文献   

Simplified approach for design of raft foundations against fault rupture. Part Ⅰ: free-field     

I. Anastasopoulos  N. Gerolymos  G. Gazetas  M. F. Bransby 《地震工程与工程振动(英文版)》2008,7(2)

Over the past few decades, earthquake engineering research mainly focused on the effects of strong seismicshaking. After the 1999 earthquakes in Turkey and Taiwan, and thanks to numerous cases where fault rupture causedsubstantial damage to structures, the importance of faulting-induced deformation has re-emerged. This paper, along withits companion (Part Ⅱ), exploits parametric results of finite element analyses and centrifuge model testing in developing afour-step semi-analytical approach for analysis of dip-slip (normal and thrust) fault rupture propagation through sand, itsemergence on the ground surface, and its interaction with raft foundations. The present paper (Part Ⅰ) focuses on the effectsof faulting in the absence of a structure (i.e., in the free-field). The semi-analytical approach comprises two-steps: the firstdeals with the rupture path and the estimation of the location of fault outcropping, and the second with the tectonically-induced displacement profile at the ground surface. In both cases, simple mechanical analogues are used to derive simplifiedsemi-analytical expressions. Centrifuge model test data, in combination with parametric results from nonlinear finite elementanalyses, are utilized for model calibration. The derived semi-analytical expressions are shown to compare reasonably wellwith more rigorous experimental and theoretical data, thus providing a useful tool for a first estimation of near-fault seismichazard.  相似文献   

基于PCA-GEP算法的边坡稳定性预测   总被引：5，自引：1，他引：4  

谷琼  蔡之华  朱莉  黄波 《岩土力学》2009,30(3):757-761

提出一种基于主成分分析的基因表达式程序设计算法,并将其用于边坡稳定性预测。该算法先采用主成分分析法对样本数据进行预处理,有效地减少预测模型的输入量,消除输入数据间的相关性,再将得到的新样本数据输入基因表达式,构建边坡稳定性的预测模型。利用该预测模型对82个危险圆弧破坏边坡实例中的71个实例进行学习,对另外11个实例进行预测,取得了较好的效果。在保留传统的以误差值作为评判模型优劣标准的同时,引入AIC信息准则法,分别对v-SVR算法和GA-BP网络算法和PCA-GEP算法三种预测模型进行比较分析,结果表明,运用该算法可以获得更优的预测模型,其预测结果比v-SVR算法和GA-BP网络等其他算法得到的结果具有更高的预测精度。工程实例计算表明,该方法是合理、可行的。  相似文献   

秩亏水准网平差公式的一维表达式     

黑志坚  张平 《测绘与空间地理信息》2000,23(2):6-8

秩亏水准网按附加条件法平差的法方程系数阵和参数先验权阵具有对称特性,利用此特性和水准网附加矩阵的特殊形式,以及文献［２］中给出的线性方程组未知数及其函数、系数阵逆阵计算的一维公式,可导出秩亏水准网按附加条件法平差的一维平差计算公式,使秩亏水准网平差计算和程序设计简单易行。  相似文献   

中国两性生殖卤虫各品系碱性磷酸酶、酸性磷酸酶同工酶基因的表达特征     

侯林  王熠  邹向阳 《海洋学研究》2000,18(4):22-28

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法 ,对中国两性生殖卤虫 Artemia sinica的 1 4个品系的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶同工酶基因的表达特征进行了分析 ,并与 Artemia urmiana的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶同工酶基因的表达特征进行了比较研究。结果表明 :中国两性生殖卤虫各品系的 ALP、 ACP同工酶的酶谱相同 ,均为单体酶。 ALP、 ACP同工酶分别由 ALP - 1、 ACP- 1 ,ALP- 2、ACP- 2 ,ALP- 3、ACP- 3三个基因座位编码 ,ALP- 1、ACP- 1座位存在a、 b两个共显性等位基因 ,ALP- 2、ACP- 2存在 a、b、c三个等位基因 ,ALP- 3、ACP- 3座位存在 a、b两个等位基因。共发现 7种基因型 :1 .0 / cc/ bb,2 .0 / bb/ bb,3.0 / aa/ aa,4.0 /ab/ aa,5.0 / ac/ ab,6.0 / ac/ aa,7.ab/ ab/ aa。仅在 A.urmiana中发现 0 / cc/ bb、 0 / bb/ bb基因型 ,而 A.sinica的主要基因型为 :0 / ac/ aa、 0 / ab/ aa、 0 / aa/ aa。仅 GN品系的 ALP - 1、 ACP- 1有基因座位表达。  相似文献   

憧憬未来与"爱""恨"交织的时代之歌——柳亚子辛亥革命前后诗词创作浅论     

谢圣婷 《广东海洋大学学报》2006,26(5):84-87

柳亚子是辛亥革命前后诗坛上影响最大的革命诗人之一.他在辛亥革命前后创作的大量诗词,追求理想,憧憬未来;关注现实,"爱"恨"交织;并以慷慨激昂,苍凉沉郁调子组成一曲曲激荡着宏音巨响的时代之歌,在中国近代的茫茫夜空中激荡震响,这些裹夹着雷霆风云与宏音巨响的诗歌创作在我国民主革命史和近代文学史上产生了重要影响,并放射出璀璨的光辉.  相似文献   

Chromium(VI) reduction by sulphur(IV) in aqueous solutions     

Maurizio Pettine  Daniele Tonnina  Frank J. Millero 《Marine Chemistry》2006,99(1-4):31

The rates of the reduction of Cr(VI) with S(IV) were measured in deaerated NaCl solution as a function of pH, temperature and ionic strength. The rates of the reaction were found to be first order with respect to Cr(VI) and second order with respect to S(IV), in agreement with previous results obtained at concentrations two order higher than the present study. The reaction also showed a first-order dependence of the rates on the concentration of the proton and a small influence of temperature with an apparent energy of activation ΔH_app of 22.8 ± 3.4 kJ/mol. The rates were independent of ionic strength from 0.01 to 1 M. The rate of Cr(VI) reduction is described by the general expression