雨生红球藻八氢番茄红素脱氢酶pds基因上游序列的分离和分析     

梁成伟  檀琮萍  苏忠亮  魏魏  秦松 《海洋通报》2009,28(6)

在某些蓝藻、绿藻和高等植物中,八氢番茄红素脱氢酶是β-胡萝卜素合成过程中的一个关键酶之一,应用巢式PCR方法从雨生红球藻中克隆了八氢番茄红素脱氢酶基因约1kb的5’上游序列。通过生物信息学方法进行序列分析,发现pds基因上游序列中包含了一些可能的顺式元件,如ABRE调控元件、C-repeat/DRE调控元件等。同时,构建了由pds-启动子控制报告基因的重组载体,并转化到雨生红球藻细胞中,进行了报告基因瞬间表达的检测。结果表明,克隆的pds启动子区域具有启动子活性,可以驱使报告基因进行瞬间表达。  相似文献   

半滑舌鳎病原鳗利斯顿氏菌表型及分子特征研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

张晓君  秦国民  阎斌伦  徐静  毕可然  秦蕾 《海洋学报》2009,31(5):112-122

2008年12月,江苏赣榆某渔场养殖半滑舌鳎出现大量死亡,症状主要表现为:头部、鳃盖及鳍基出血,尾鳍腐烂,腹腔膨胀并积有大量腹水,部分病鱼肠管脱出肛外。从病鱼肝脏、腹水中分离出大量优势生长的细菌,人工感染试验证明其对半滑舌鳎有较强的致病性。对3株分离菌进行了形态特征、理化特性、胞外酶及溶血素活性等表型生物学性状检验;测定了代表菌株的16S rRNA和gyrB基因序列,分析了16S rRNA和gyrB两种基因序列的同源性,并构建了系统发生树,比较了两种基因对分离菌的鉴定能力;结果表明gyrB基因用于细菌种间鉴定更具优越性;基于16S rRNA和gyrB基因的系统发育学分析表明分离菌与鳗利斯顿氏菌具有高同源性,根据分离菌的表型及分子特征,判定分离菌为利斯顿氏菌属(Listonella MacDonell and Colwell 1986)的鳗利斯顿氏菌[Listonella anguillarum (Bergeman 1909) MacDonell and Colwell 1986]。胞外酶活性及溶血活性检测表明3株分离菌均具有淀粉酶、蛋白酶、卵磷脂酶等胞外酶活性,在含7%家兔脱纤血液营养琼脂培养基上呈β型溶血,PCR检测3株供试菌均可扩增出大小约493 bp的溶血素基因和大小约248bp的金属蛋白酶基因。分离菌的耐药谱测定结果显示,对供试49种抗菌药物中的青霉素G等13种药物耐药,对羧苄青霉素等6种药物存在敏感与耐药的株间差异。  相似文献   

一株海洋细菌铁吸收调节蛋白(Fur)基因的克隆和表达     

李俊峰  姚淑敏  李红芳  田智刚  郭庆杰 《海洋湖沼通报》2009,(4)

对海洋细菌来说铁是一种必需元素,对铁吸收与利用的调控在细菌生长和防止铁毒性中起重要作用,在革兰氏阴性细菌中,铁的代谢由铁吸收调节蛋白(Fur) 来调控.橙色交替单胞菌是1种具有广泛抑菌谱的有益菌,本研究克隆表达了橙色交替单胞菌的fur基因,并分析了其相关特征.该基因序列中包含447bp的开放阅读框,编码148个氨基酸残基的蛋白,推导的相对分子量为16.637 kD,与GenBank报道的革兰氏阴性菌的相应序列同源性很高,其中氨基酸序列的中段从G47位至D104位,为高度保守区域.在限铁和富铁培养条件下铁载体分泌量的结果分析表明,fur基因可在大肠杆菌中大量表达,为进一步研究Fur蛋白的结构与功能打下基础.  相似文献   

牙鲆GHR基因Promoter区微卫星序列多态性与生长性状关系的初步研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

倪静  尤锋  于深辉  张培军  徐冬冬  吴志昊  文爱韵  徐永立 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2008,38(5)

采用牙鲆GHR基因5'端Promoter区的1个微卫星标记,对胶南和日照2个牙鲆养殖群体进行了群体遗传多样性的研究,并探索该基因多态性位点与牙鲆生长性状之间的相关性.结果表明,2个群体在该座位的等位基因数为12和9个,有效等位基因数为6.26和5.04个,多态信息含量为0.84和0.80.2个群体该座位的Hardy-Weinberg遗传偏离指数均为正值,并没有显示出杂合子缺失,但各基因型分布频率都在一定程度上偏离Hardy-Weinberg平衡(P<0.01).连锁分析中发现,在胶南群体中,IM基因型对应的个体在全重、全长、体长、头长、体高和眼径形态学数据中均是最大的;在日照群体中,BC基因型对应的个体在全重、全长、体高、尾柄高、尾柄长和眼径数据中均是最大的;而CJ基因型对应的个体在体长和头长这两组数据中是最大的.该结果为研究GHR基因的变异对鱼类生长发育的影响及探索将该基因作为生长遗传标记的可行性奠定了实验基础.  相似文献   

Cloning and characterization of largemouth bass (<Emphasis Type="Italic">Micropterus salmoides</Emphasis>) myostatin encoding gene and its promoter     

Shengjie Li  Junjie Bai  Lin Wang 《中国海洋大学学报(英文版)》2008,7(3):304-310

  相似文献   

野生二粒小麦 Triticum dicoccoides抗杀锈病基因 YrH52分子定位的初步研究(英文)     

PengJ.H.  FahimaT.  RoderM.S.  LiY.C.  DahanA.  GramaA.  NevoE. 《广东海洋大学学报》1999,(4)

主要对以色列野生二粒小麦赫尔蒙种群中分离获得的一个抗条锈病基因进行了分子定位研究 ,将源于赫尔蒙山具抗杀锈病的种系 T.dicoccides H52与普通的栽培种 Langdon进行杂交并创建了 F2 代遗传图。研究发现 H52种系抗条锈病的能力由一种显性基因控制 ,将其暂定名为 Yr H52。从 1 2 0个微卫星标记中 ,已经检测到来自亲本 91 %的多态性 ,而且从其中 56个微卫星分子标记中产生了 79个分离的位点 ,有 9个位点显示出了与 Yr H 52基因连锁 ,其重组率 0 .0 2～ 0 .3 5,遗传距离 2 .0 0～ 4 3 .3 7cm之间 ,L OD值 3 .56～ 54.2 2。由 1 0个微卫星位点和 Yr H52构建的染色体 1 B遗传图 ,其图距全长为 1 0 1 .5cm。Yr H52基因位于 Xgwm2 64 a和 Xgwm2 64 c之间 ,且与 Xgwm2 64 a、Xgwm1 8紧密连锁 ,两侧依次分别与 Xgwm1 3 1 a、Xgwm63 6b、Xgwm2 64 c、Xgwm4 0 3 a、Xgwm1 53、Xgwm550 a和 Xgwm1 2 4连锁。同时 ,Yr H52也与 REL P标记物 N or1紧密连锁 ,图距 1 .4 cm,L OD2 9.62。这显然与野生二粒小麦另一个抗条锈病基因 Yr1 5不同 ,研究证明 Yr1 5与 N or1图距是 1 1 .0 cm。  相似文献   

大口黑鲈抗菌肽hepcidin cDNA序列和结构分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

白俊杰  刘碧莲  劳海华  叶星  简清 《广东海洋大学学报》2008,28(1):1-5

以大口黑鲈为材料,提取肝脏总RNA,经RT-PCR扩增出hepcidin cDNA的开放阅读框(ORF)及3′端非编码区序列,应用5′RACE方法得到大口黑鲈hepcidin cDNA5′末端。将所获得的两个片段分别克隆到T载体后进行测序,并拼接成大口黑鲈hepcidin全长cDNA。序列分析表明:大口黑鲈hepcidin全长cDNA为564bp,含有一个258bp的ORF,编码86个氨基酸残基,由信号肽(24个残基)、前肽(42个残基)和成熟肽(20个残基)3部分组成hepcidin前体。在前肽部分具有前肽转化酶典型的RX(K/R)R基元,成熟肽部分含有8个保守的半胱氨酸残基,可形成四个链内二硫桥,使β-折叠结构保持稳定。大口黑鲈Hepcidin与其他鱼类的同源性在29.7%~90.5%间,尤其是信号肽区域,与鳜、尼罗罗非鱼、真鲷、花鲈、黑鯛、金眼狼鲈仅有2~3个氨基酸的差别。  相似文献   

溶藻弧菌asp基因在大肠杆菌中表达活性研究及条件优化   总被引：1，自引：0，他引：1  

蔡双虎  鲁义善  吴灶和  简纪常  汤菊芬  黄郁葱 《广东海洋大学学报》2008,28(3)

为进一步研究溶藻弧菌碱性丝氨酸蛋白酶(ASP)蛋白生物学活性和功能,将构建的pET23d-asp在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,对表达产物进行纯化分析,并优化表达条件。结果表明:在咪唑洗脱缓冲液浓度为100 mmol/L时,表达的可溶性ASP被大量洗脱,纯化的ASP相对分子质量约为42 000,具有蛋白活性;在诱导温度28℃、异丙基-β-D硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)浓度1 mmol/L及诱导时间16 h时,表达的活性ASP蛋白最多。  相似文献   

BOOK REVIEWS     

《The Professional geographer》1988,40(3):347-378

Books reviewed in this article: The Mexican Colonial Copper Industry. Elinore M. Barrett . The Control Revolution: Technological and Economic Origins of the Information Society . James R. Beniger . Land Degradation and Society . Piers M. Blaikie And Harold C. Brookfield , Eds . La carte, mode d'emploi. Roger Brunet . France: les dynamiques du territoire . Roger Brunet AND Jacques Sallois , EDS. At the Crossroads—The Mineral Problems of the United States . Eugene N. Cameron . A Census of One Billion People , Papers for International Seminar on China's 1982 Population Census. Li Chengrui , ED. Les Milieux “Naturels” du Globe . Jean Demangeot . The Geophysiology of Amazonia: Vegetation and Climate Interactions : Robert E. Dickinson , ED. Tenn-Tom Country . James F. Doster And David C. Weaver . Family Farming in Europe and America . Boguslaw Galeski And Eugene Wilkening , EDS. The Geography of Urban Transportation . Susan Hanson , Ed. Combating Desertification in Developing Countries . J. K. Jain , ED. Cartography in France—1660–1848. Science, Engineering and Statecraft . Josef W. Konvitz . Distribution of Distances in Pregeographical Space . Hans Kuiper . Physical Geography Lab Manual: A New Experimental Approach . Neal G. Lineback And John M. Harlin . Physical Geography: A Landscape Appreciation , 2nd ed. Tom L. Mc Knight . The Desert Is No Lady: Southwestern Landscapes in Women's Writing and Art . Vera Norwood And Janice Monk , EDS. France: A Geographical, Social, and Economic Survey . Philippe Pinchemel , translated, by D. Elkins and T. H. Elkins. Gene Banks and the World's Food . Donald L. Plucknett , Nigel J. H. Smith , J. T. Williams , And N. Murthi Anishetty . Latin American Development: Geographical Perspectives . David Preston , Ed. Making Sense of Development: An Introduction to Classical and Contemporary Theories of Development and Their Application to Southeast Asia . P. W. Preston . The History of the Countryside. Oliver Rackham . The Third World in Perspective . H. A. Reitsma AND J. M. G. Kleinpenning . The Industrial Geography of Australia . David C. Rich . The Recruiting Game , 2nd Ed., revised. John F. Rooney , JR. A Cultural Geography of North American Indians . Thomas E. Ross AND Tyrel G. Moore , EDS. Eastern Europe . Dean S. Rugg . Human Territoriality: Its Theory and History . Cambridge Studies in Historical Geography: 7. Robert David Sack . Experimental Fluvial Geomorphology . Stanley A. Schumm , M. Paul Mosley , AND William E. Weaver . The New Urban Landscape . David Schuyler . Atlas of American Women . Barbara Gimla Shortridge . Impacts of Hazardous Technology: The Psycho-Social Effects of Restarting TMI-1 . John Sorensen , Jon Soderstrom , Emily Copenhaver , Sam Carnes AND Robert Bolin . Modern Physical Geography , 3rd Ed., (Third Edition). Arthur N. Strahler AND Alan H. Strahler . India: Economic Resource Base and Contemporary Political Patterns . B. L. Sukhwal .  相似文献   

NF1~180mut表达载体构建及其在脑血管细胞中的表达     

Ajigul Mamut  Mamattursun Eziz  Anwar Mohamm  Mattohti Anayit  Atiyagul Rixit 《寒旱区科学》2017,9(5):467-475

目的 前期研究中发现一合并脑血管狭窄的Ⅰ型神经纤维瘤病家系,为探索血管狭窄的病因,本研究构建该家系患者NF1基因共同突变产物NF1~180mut的过表达质粒,观察该质粒在脑血管细胞中的表达。方法 设计NF1~180mut全长序列的相应引物,采用pEGFP-N1作为载体框架,构建pEGFP-N1/NF1~180mut表达载体,通过Western blot法及共聚焦检测其蛋白表达;之后采用脂质体转染重组质粒于脑血管平滑肌细胞或内皮细胞中观察NF1~180mut在两种脑血管细胞中的表达。结果 ①成功构建了NF1~180mut表达载体;②该表达载体可在脑血管内皮细胞及平滑肌细胞内表达;③初步通过细胞计数研究及增殖实验显示NF1~180mut对脑血管平滑肌细胞和血管内皮细胞的生长及增殖有一定的作用。结论 本研究中构建了NF1-Q181X突变后的产物NF1~180mut表达载体,为进一步深入研究NF1~180mut导致脑血管狭窄发生的通路提供了良好的体外研究工具。  相似文献