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121.
122.
123.
124.
为构建南极冰藻Chlamydomonassp.ICE-L的cDNA文库,提取对数生长期南极冰藻ICE-L的总RNA,以此为模板,通过PowerScript逆转录酶逆转录合成第一链cDNA;再以第一链cDNA产物为模板,用LD-PCR合成第二链cDNA。该cDNA产物经分级分离转入大肠杆菌中,即获得南极冰藻ICE-L的cDNA原始文库,其滴度为1.6×106cfu/mL。扩增后的cDNA文库的滴度为1.0×1010cfu/mL。用PCR方法测得文库的重组率大于97%,插入cDNA的长度为0.5~1.8 kb,0.9 kb以上插入片段占50%以上。取适量扩增文库稀释并铺平板,挑取72个独立菌落,对其中22个独立菌落所插入的cDNA进行测序,克隆到了一个具有5′和3′非编码区的40S ribosomalprotein S5全长基因序列,GenBank收录号为AM167929。  相似文献   
125.
饲料中维生素B6对皱纹盘鲍幼鲍蛋白质代谢的影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
以皱纹盘鲍(Haliotis discus hannaiIno)幼鲍为研究对象,探讨维生素B6对其蛋白质代谢的影响。设计了3种维生素B6不同含量(0,40,4 000 mg/kg)的半精制饲料,在循环水养殖系统中养殖幼鲍240 d。结果表明,皱纹盘鲍内脏团和肌肉中磷酸吡哆醛(PLP)的含量随饲料中维生素B6的添加而显著升高(P<0.05)。饲料中不同维生素B6水平对肌肉组织中蛋白含量没有显著影响(P>0.05),而显著升高内脏团中蛋白质的含量(P<0.05)。内脏团和肌肉中的谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活力随着饲料中维生素B6添加量的升高而显著增强,分别在维生素B6的添加量为4 000 mg/kg时取得最大值(P<0.05)。内脏团中所检测的各种氨基酸的含量与饲料中维生素B6添加量没有显著影响(P>0.05)。然而,肌肉中的天冬氨酸(Asp)、苏氨酸(Thr)、丝氨酸(Ser)、牛磺酸(Tau)的含量随着饲料中维生素B6添加量的升高而显著增加,并且分别在维生素B6添加量为4 000 mg/kg时取得最大值(P<0.05)。肌肉中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、蛋氨酸(Met)的含量在两个维生素B6添加组(40 mg/kg和4 000 mg/kg)之间没有显著差异(P>0.05),但均显著高于维生素B6缺乏组(0 mg/kg)的值(P<0.05)。  相似文献   
126.
酶法进行海洋低值蛋白资源高值化利用初探   总被引:7,自引:2,他引:7  
首先分析了Ti鱼与四角哈两种低值海洋蛋白资源的营养成分,然后利用两株高产蛋白酶菌株通过液体发酵制备的蛋白酶制剂对两种蛋白资源进行了酶解,经过比较酶解率和肽含量,表明对于四角蛤,菌株SM98013产生的碱性蛋白酶和SM98011产生的中性蛋白酶都可高效酶解;而对Ti鱼,菌株SM98013产生的碱性蛋白酶的酶解效率较高。文中对海洋低值蛋白资源的高值化利用的途径进行了讨论。  相似文献   
127.
为了建立适于条斑紫菜(Porphyra yezoensis)蛋白质组学分析的的样品提取方法, 作者以条斑紫菜叶状体为材料, 比较了饱和硫酸铵沉淀法、三氯乙酸/丙酮沉淀法和酚提取方法3 种方法对条斑紫菜叶状体总蛋白的提取效果。结果表明, 针对条斑紫菜叶状体细胞中含有大量多糖, 多酚化合物, 色素等干扰物质的特点, 通过酚提取方法能有效去除这些干扰杂质, 得到清晰、稳定、干净的双向电泳图谱和相对较多的蛋白质点数, 为提高其他大型海藻的总可溶性蛋白提取效率提供了重要参考。  相似文献   
128.
双向电泳的技术原理及在水产动物病害研究上的应用展望   总被引:3,自引:0,他引:3  
双向电泳技术作为高效、高分辨率的蛋白质分析手段,在现代生命科学研究中扮演着重要的角色。本文概述了双向电泳技术的应用现状、存在问题及未来发展方向,并对其在水产动物病害研究中的应用进行了简要介绍。  相似文献   
129.
The molecular distribution of dissolved proteins in seawater from coastal marine environments in Uranouchi Bay, Kochi Prefecture, is first reported in this article. Occurrence of bacteria-derived dissolved proteins and their source bacteria were examined using a probe of the antibody (anti-Omp35La) against a porin outer membrane protein (Omp35La) of the fish pathogenic bacterium Vibrio (Listonella) anguillarum. The electrophoretograms of dissolved proteins from coastal seawater showed a large number of discrete and individual proteins overlapped each other over a wide range of molecular masses indicating active processes in coastal environments in transferring proteins from organisms to the inanimate dissolved protein pool. Among the dissolved proteins, 37 kDa- and 18 kDa-proteins reacted with the Omp35La. In order to isolate the source bacteria of such dissolved proteins, bacteria from seawater and diseased fish were screened by colony Western blotting with anti-Omp35La. The reactive strains were further examined in sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE)/Western blotting to verify the presence of Omp35La homologues among the outer membrane proteins of such strains. Outer membrane proteins reacting with anti-Omp35La were detected in only 4 strains of the 129 strains that were positive in the colony Western blotting. The level of possible source bacteria of 37 kDa- and 18 kDa-dissolved proteins was suggested to be 5–6 orders of magnitude lower than the total bacterial count. The present study leads us to hypothesize that a minor portion of the bacterial assemblage is responsible for the dissolved proteins in the coastal waters.  相似文献   
130.
根据刘次全研究员等发现的蛋白质与其编码mRNA二级结构之间可能存在着二级结构单元数目间的对应关系 ,首次尝试参照P53蛋白质N/C末端的编码mRNA二级结构预测P53蛋白质N/C末端相应的二级结构。预测结果显示 ,在P53蛋白质N端 1 -93残基肽段可能存在四个α螺旋结构 (1 4-2 6 ,38-4 6 ,51 -56 ,6 8-70aa)。在P53蛋白质C端单体聚合区以后的区域可能存在另外两个α螺旋 (36 8-373,381 -388aa)。在P53蛋白质N/C端末知二级结构的预测区域内没有发现β层片结构。这些预测结果与法国蛋白质生物和化学研究所 (IBCP)多重序列联配蛋白质二级结构预测方法对照 (其准确率为 73.2 0 %左右 ) ,结果基本一致。在此工作基础上 ,将P53蛋白质N/C端预测的二级结构在SGI-INDIGO2 工作站上分别构建出三维构象模型。与分子生物学研究的资料对照 ,这两个模型较好的解释了P53蛋白质N/C末端特定的生物功能在三维结构上的相应特点。此外 ,在SGI -INDIGO2 工作站上 ,首次选择和利用P53蛋白质突变研究近十年积累的大量资料 ,以及P53蛋白质核心区三维晶体结构数据资料 ,对Arg1 75,Arg 2 49,和Arg 2 48三个P53蛋白质高频率突变点的十种不同的残基替换做了分子动力学研究。结果发现 ,P53蛋白质核心区在经历 1 2 ps的分子动力学过程后 ,其三  相似文献   
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