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11.
Proteins of the DYRK(dual-specificity tyrosine-phosphorylation-regulated kinase) family are characterized by the presence of a conserved kinase domain and N-terminal DH box.DYRK2 is involved in regulating key developmental and cellular processes,such as neurogenesis,cell proliferation,cytokinesis,and cellular differentiation.Herein,we report that the ortholog of DYRK2 found in zebrafish shares about 70% identity with that of human,mouse,and chick.RT-PCR showed that DYRK2 is expressed maternally and zygotica...  相似文献   
12.
MyoD, Myf5, and myogenin are myogenic regulatory factors that play important roles during myogenesis. It is thought that MyoD and Myf5 are required for myogenic determination, while myogenin is important for terminal differentiation and lineage maintenance. To better understand the function of myogenic regulatory factors in muscle development of flounder, an important economic fish in Asia, real-time quantitative RT-PCR was used to characterize the expression patterns of MyoD, Myf5, and myogenin at early stages of embryo development, and in different tissues of the adult flounder. The results show that, Myf5 is the first gene to be expressed during the early stages of flounder development, followed by MyoD and myogenin. The expressions of Myf5, yoD, and myogenin at the early stages have a common characteristic: expression gradually increased to a peak level, and then gradually decreased to an extremely low level. In the adult flounder, the expression of the three genes in muscle is much higher than that in other tissues, indicating that they are important for muscle growth and maintenance of grown fish. During embryonic stages, the expression level of MyoD might serve an important role in the balance between muscle cell differentiation and proliferation. When the MyoD expression is over 30% of its highest level, the muscle cells enter the differentiation stage.  相似文献   
13.
多倍体诱导会造成物种中不同基因的表达水平变化不同,以内参基因作为对照的相对实时定量PCR是检测基因表达水平变化的一种高效方法,这就需要对多倍体中的内参基因进行筛选以获得较适宜的参比基因。本研究以二倍体和三倍体牙鲆肌肉和脑组织为对象,以绝对定量及2–ΔCt等方法分析管家基因18S rRNA、β-肌动蛋白基因(β-actin),β-2-微球蛋白基因(b2m),3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(gapdh),核糖体蛋白L17基因(rpl17),α-微管蛋白基因(α-tub),延伸因子-1-α基因(ef1-α)和泛素结合酶基因(ubc-e)的表达水平稳定性。绝对定量分析发现18S rRNA和α-tub的表达在牙鲆二、三倍体肌肉之间有显著性差异,其他基因的表达没有显著性差异,利用2–ΔCt分析方法分析发现只有α-tub的表达在二、三倍体牙鲆肌肉之间有显著性差异,其他基因的表达没有显著性差异;在牙鲆三倍体的脑和二倍体的脑之间,这些基因的表达均没有显著性差异。综合基因表达稳定性和Normfinder分析的结果发现,ef1-α是定量分析牙鲆三倍体的肌肉和二倍体的肌肉之间基因表达差异的较适合的内参基因,α-tububc-erpl17β-actin只在其中一种分析方法中符合要求,而其他基因不符合任何一种分析方法的要求;ef1-αrpl17是定量分析牙鲆二、三倍体脑组织之间基因表达差异的比较适合的内参基因,β-actin只在基因表达稳定性上符合要求,其他基因不符合任何一种分析方法的要求。本研究为分析牙鲆二倍体和三倍体同一组织之间基因表达的差异奠定了基础。  相似文献   
14.
大菱鲆(Scophthalmus maximus)为我国北方沿海主要的海水经济品种,其四倍体的获得对种质改良和三倍体的规模化生产具有重要的价值。到目前为止,有关大菱鲆四倍体的人工诱导尚未见报道。本文采用静水压抑制受精卵卵裂的方法,进行了四倍体诱导条件的摸索。结果显示,在14.8—15.5?C培育时,在卵裂前15min用67.5MPa处理6min可获得较好的诱导效果,其孵化率最高可达72%,染色体制片计数法计算其原肠胚期诱导率可达70%,初孵仔鱼流仪检测诱导率最高为73%。诱导组胚胎发育与对照组在形态学上基本一致,仅发育孵化时间比对照组略有滞后。  相似文献   
15.
MyoD,Myf5,and myogenin are myogenic regulatory factors that play important roles during myogenesis.It is thought that MyoD and Myf5 are required for myogenic determination,while myogenin is important for terminal differentiation and lineage maintenance.To better understand the function of myogenic regulatory factors in muscle development of flounder,an important economic fish in Asia,real-time quantitative RT-PCR was used to characterize the expression patterns of MyoD,Myf5, and myogenin at early stages of embryo development,and in different tissues of the adult flounder.The results show that,Myf5 is the first gene to be expressed during the early stages of flounder development, followed by MyoD and myogenin.The expressions of Myf5,MyoD,and myogenin at the early stages have a common characteristic:expression gradually increased to a peak level,and then gradually decreased to an extremely low level.In the adult flounder,the expression of the three genes in muscle is much higher than that in other tissues,indicating that they are important for muscle growth and maintenance of grown fish.During embryonic stages,the expression level of MyoD might serve an important role in the balance between muscle cell differentiation and proliferation.When the MyoD expression is over 30%of its highest level,the muscle cells enter the differentiation stage.  相似文献   
16.
17.
17β-羟类固醇脱氢酶1(17β-HSD1)的主要作用是将雌酮(El)转化为发挥功能的雌二醇(E2)。作者从牙鲆(Paralichthys olivaceus)性腺转录组数据库获得该基因的开放阅读框(ORF)序列,对其进行了验证,并分析了该基因在高温、外源性激素处理条件下性腺分化期性腺组织中的差异表达以及c AMP和转录因子(NR5a2和NR0b1)在精巢原代细胞中对该基因表达的作用。结果显示,牙鲆17β-HSD1基因的ORF为873bp,编码290个氨基酸,与其他鱼类的有很高的相似性。半定量RT-PCR结果表明,该基因在卵巢中高表达,精巢有少量表达,并且在雌性个体的鳃、头肾、肾、脾、胃和肠中也有表达。实时定量RT-PCR结果显示,该基因在卵巢或精巢分化的关键时期表达量较高;在精巢原代培养细胞中,外源信号分子c AMP及转录因子NR5a2可以显著下调17β-HSD1基因的表达(P0.05),且呈现剂量效应,转录因子NR0b1对该基因的调控也与剂量有关。作者推测牙鲆17β-HSD1基因在性腺分化中起一定的作用,其表达受到调控因子的作用,这些结果将有助于增加对鱼类性腺分化和发育的认识。  相似文献   
18.
研究Forskolin处理真鲷胚胎的条件。对加药时期以及Forskolin浓度进行了优化,得到了处理真鲷胚胎的加药时期为受精后6h,Forskolin的浓度为0.01nmol/L和0.02mol/L,在此条件下处理过的胚胎体节由正常的V型变成U型。该研究结果将有利于研究Hh信号对真鲷成肌因子的影响。  相似文献   
19.
牙鲆Myogenin蛋白在大肠杆菌中重组表达的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用大肠杆菌表达系统及pProEXTMHTc表达载体对牙鲆肌肉发生调节因子myogenin基因进行了体外重组表达研究。通过对诱导时间、IPTG诱导浓度以及诱导温度的优化,确定了最佳诱导条件为:诱导温度31℃,IPTG终浓度0.6mmol/L,诱导时间2 h。在该条件下,重组蛋白表达量最高且是可溶性的。Myogenin融合蛋白的成功表达为进一步深入研究其在牙鲆肌肉发育过程中的分子机制奠定了基础。  相似文献   
20.
大菱鲆周期蛋白依赖激酶基因cdk1cdk6克隆及表达分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过同源克隆以及5′/3′RACE的方法扩增得到大菱鲆(Scophthalmus maximus)细胞周期蛋白依赖激酶基因cdk1和cdk6的全长c DNA序列,在m RNA水平上分析了它们组织表达特征,并对比分析了静水压处理对其胚胎期表达的影响。结果显示,cdk1基因全长c DNA序列为1281 bp(Gen Bank登录号:KP339306),编码区为912 bp;cdk6基因c DNA全长1400 bp(Gen Bank登录号:KT186374),编码区长度为978 bp。组织RT-PCR分析表明,cdk1基因表达具有广泛性,在性腺、肾脏等生长发育较快的组织中表达量较高;cdk6基因也在多个组织中表达,在性腺中表达量最高。通过Real time RT-PCR检测基因在胚胎中的表达水平发现,静水压处理组cdk1、cdk6在胚胎发育中,总体变化趋势与对照组类似。大菱鲆胚胎对照组中cdk1在原肠期以前相对神经胚期及以后时期表达量较高,静水压处理组基因表达变化与对照组趋势相同;对照组中cdk6在原肠期出现表达高峰,但静水压处理组在原肠期表达量相对较低。静水压处理对cdk1和cdk6的表达量的影响不同,这可能与基因还有除调控细胞周期的其他功能有关。为解析这两个基因在大菱鲆胚胎发育中的作用及其机制提供了参考。  相似文献   
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