漠斑牙鲆养殖群体RAPD遗传多样性的初步分析   总被引：8，自引：0，他引：8  

尤锋  吴志昊  王伟  徐冬冬  许建和  倪静  孙威  张培军  徐永立  杨学宋  孙寿科 《海洋科学》2006,30(2):86-90

利用RAPD技术对由美国引进的漠斑牙鲆(Paralichthys lethostigma)养殖子一代群体的遗传多样性进行了研究。实验用漠斑牙鲆鱼苗于2004年10月取自山东莱州大华水产有限公司,共24尾,全长平均为16.6 mm±1.99 mm。活体取其肌肉,用高盐法抽提获得总DNA,琼脂糖电泳检测,Beckman DU-6100型紫外分光光度仪定量后用随机引物进行PCR扩增,从25个随机引物中筛选出11个用于群体遗传学分析,共获得77条清晰重复性高的DNA片段,大小在100~2 000 bp之间,多态谱带比例和群体平均杂合度分别为66.23%和0.352 6。  相似文献   

大黄鱼雌核发育二倍体的人工诱导   总被引：2，自引：0，他引：2  

许建和  尤锋  吴雄飞  蒋宏雷  徐永立  张培军 《海洋科学》2006,30(12):37-42

采用紫外线照射对大黄鱼(Pseudosciaena crocea Richardson)精子遗传物质进行完全灭活,灭活后精子与卵子受精获得雌核发育单倍体受精卵,再通过冷休克对单倍体受精卵进行倍性恢复,成功诱导出大黄鱼雌核发育二倍体。实验结果表明:(1)在紫外照射过程中照射剂量与大黄鱼精子和卵子受精后其成活率和孵化率呈现出明显的Hertwig效应,紫外照射时间超过2 min(剂量>2 400 ergs/mm2),可使大黄鱼精子遗传物质完全灭活。大黄鱼雌核发育诱导中精子遗传灭活的最适紫外照射时间为2.5 min(剂量为3 000 ergs/mm2);(2)冷休克法可成功抑制大黄鱼受精卵第二极体排放,诱导效果受处理时刻、处理时间和处理温度三因素的影响。综合雌核发育二倍体的诱导率、处理后受精卵早期胚胎存活率和仔鱼孵化率等因素,较适合的染色体加倍条件为23℃培育水温下授精后2 min,在3-4℃海水中处理10 min。  相似文献   

中国近海带鱼分种的研究   总被引：4，自引：2，他引：4       下载免费PDF全文

王可玲  张培军  刘兰英  尤锋  徐成 《海洋学报》1993,15(2):77-83

1976～1992年,主要用生化遗传方法并辅之以形态学资料,共分析了中国近海的1 400余尾带鱼的样品.生化遗传资料分析了11种同工酶,共记录出24个基因座位,其中4种酶9个基因座位具有种的特异性.结果表明中国近海带鱼存在3个种,它们之间的遗传距离在0.2230～0.3822之间.形态学资料与生化资料的结果是一致的,也表明中国近海带鱼存在3个种,它们之间存在着明显的不连续的差异.3种带鱼中有2个新种,分别命名为南海带鱼Trichiurus nanhaiensis Wanget Xusp. nov.和短带鱼Trichiurus brevis Wanget You sp.nov.  相似文献   

牙鲆dmrt1 基因的克隆及其与P450arom 基因的组织表达分析     

文爱韵  尤锋  孙鹏  徐冬冬  吴志昊  马得友  李军  张培军 《海洋科学》2010,34(11):97-102

通过基因组步移和3’RACE获得了牙鲆(Paralichthys olivaceus)dmrt1的cDNA全序列,该基因开放阅读框全长909bp,其编码的蛋白具有高度保守的DM结构域,5’UTR区含有性别相关转录因子Sox9和Sox5的结合位点。牙鲆dmrt1基因只在牙鲆的性腺中表达,且在精巢中的表达明显高于卵巢,表明牙鲆的dmrt1可能是一种性别相关基因。同时,对牙鲆的另一性别相关基因P450arom在成体各组织的表达分析结果表明,该基因除在牙鲆的性腺中有表达外,在肾脏、脾脏、鳃和脑等其他组织中也有不同程度的表达。牙鲆P450arom基因在性腺中的表达也存在两性差异,其表达模式与dmrt1的正好相反,在卵巢中的表达量明显高于精巢。  相似文献   

Preliminary study on chromosomes of induced triploid in the red sea bream,Pagrosomus major   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘静  尤锋 《中国海洋湖沼学报》2000,18(2):190-192

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＣｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎｉｓｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄｔｏｂｅｖｅｒｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｆｏｒｐｒａｃｔｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎｆｉｓｈｂｒｅｅｄｉｎｇ.Ｔｒｉｐｌｏｉｄｙｈａｓｂｅｅｎｏｆｉｎｔｅｒｅｓｔｂｅｃａｕｓｅｔｒｉｐｌｏｉｄｆｉｓｈａｒｅｓｕｐｐｏｓｅｄｔｏｂｅｓｔｅｒｉｌｅｄｕｅｔｏｔｈｅｆａｉｌｕｒｅｏｆｔｈｅｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓｙｎａｐｓｉｓｄｕｒｉｎｇｅａｒｌｙｇａｍｅｔｏｇｅｎｅｓｉｓ(ＳｕｇａｍａａｎｄＴ…  相似文献   

牙鲆芳香化酶Cyp19a多克隆抗体制备及其应用     

舒畅  王丽娟  邹聪聪  邹玉霞  王国玉  吴志昊  李泽  尤锋 《海洋科学》2022,46(11):83-93

芳香化酶Cyp19a在鱼类性别决定和性别分化中起关键作用,通过调控体内雌、雄激素的转化来影响鱼类性别表型形成。为深入研究Cyp19a在牙鲆(Paralichthys olivaceus)性腺分化和发育过程中的表达规律及作用机制,本文从牙鲆cDNA中克隆获得1557bp的cyp19a基因编码序列,并成功构建了原核重组表达质粒。经体外重组与纯化获得较高纯度的重组Cyp19a蛋白;以此作为抗原免疫兔子,制备多克隆抗体。用间接酶联免疫吸附剂测定(ELISA)技术检测抗血清效价,评估其免疫原性。结果表明免疫结束后得到的抗体血清效价超过了1∶50000,且纯化后抗体具有较好活性。Western Blot(WB)检测结果表明Cyp19a兔多抗可以特异性识别牙鲆重组Cyp19a蛋白和内源性Cyp19a蛋白。蛋白水平的雌雄性腺差异表达分析显示,牙鲆Cyp19a蛋白在卵巢中高表达,在精巢中微量表达。利用Foxl2和Dmrt1重组蛋白处理牙鲆性腺分化期幼鱼可分别显著上调和下调Cyp19a的表达(P<0.05)。综上所述,本研究成功制备了牙鲆Cyp19a多克隆抗体并进行了应用,为深入研究牙鲆等鱼类性别分化机制提供有力工具。  相似文献   

牙鲆受精的细胞学研究          下载免费PDF全文

孙威  尤锋  张培军  许建和  倪静  朱香萍  徐永立 《海洋科学》2009,33(5):80-85

通过组织切片,对牙鲆(Paralichthys olivaceus)的受精过程进行细胞学观察发现,这一过程包括精子入卵、卵母细胞第二次成熟分裂排出第二极体、雌雄原核形成与融合,直到合子进行第一次有丝分裂,在受精的整个过程中所有观察过的受精卵都只发现一个精子形成原核,并最终与卵原核结合形成合子,由此判断牙鲆的受精方式是单精受精.本实验的研究结果,不仅能够从理论上丰富海水鱼类的受精生物学基础研究资料,又可为生产中牙鲆染色体操作遗传育种提供依据.  相似文献   

牙鲆性腺分化的组织学研究   总被引：2，自引：0，他引：2       下载免费PDF全文

孙鹏  尤锋  张立敬  文爱韵  吴志昊  徐冬冬  李军  徐永立  张培军 《海洋科学》2009,33(3):53-58

运用组织学方法对牙鲆(Paralichthys olivaceus)的性腺分化和发育过程进行了观察.结果表明,牙鲆的性腺发育可分为3个阶段,即原始性腺阶段、性腺分化阶段和性腺分化后阶段.培育水温为18℃～20℃下,孵化后第45天、平均全长为22.0 mm±2.8 mm的牙鲆,其性腺分化尚未开始,属于原始性腺.70日龄、平均全长为38.0 mm±1.7 mm的牙鲆,部分个体中观察到卵巢的雏形,其余个体中性腺变化并不大;到了第110天、平均全长达到86.5 mm±5.9 mm时,雌性个体卵巢的卵巢腔进一步增大,并出现卵原细胞向卵母细胞的转变.精巢的分化开始于90日龄、平均全长为63.5 mm±3.4 mm的幼鱼,此期精原细胞快速增殖,体细胞进行有丝分裂并逐渐形成输精管原基;进一步的细胞学分化则出现在100日龄、平均全长为76.0 mm±8.6 mm的个体中,此时可以看到精小叶的形成;在平均全长为140.0 mm±15.2 mm时,精巢中出现初级精母细胞,标志着性腺分化的基本完成.  相似文献   

RAPD对圆斑星鲽和条斑星鲽养殖群体的遗传多样性研究   总被引：1，自引：1，他引：0       下载免费PDF全文

杨奔  尤锋  李军  徐冬冬  吴志昊  于道德  倪静  徐世宏  徐永立  张培军 《海洋科学》2009,33(8):26-29

应用RAPD分子标记技术对圆斑星鲽(Verasper variegatus)和条斑星鲽(Verasper moseri)的养殖群体进行群体遗传多样性分析.每个群体各取鱼30尾,并从78条随机引物中筛选出20条用于群体遗传学研究.两个群体共扩增出218条DNA片段,大多数片段大小为250～1500 bp,其中圆斑星鲽185条,条斑星鲽183条.多态片段比例分别为56.76%和64.48%,Nei的多样性指数和Shannon的信息指数分别为0.232 2和0.278 1、0.339 1和0.398 9.这两种星鲽养殖群体间的遗传相似性系数和遗传距离分别为0.672 0和0.397 5.  相似文献