三疣梭子蟹几丁质酶基因(PtCht6)的克隆及其在免疫中的功能分析     

宋柳  吕建建  王磊  孙东方  刘萍 《海洋与湖沼》2019,50(5):1080-1090

几丁质酶(chitinase)在甲壳动物的蜕皮、消化和免疫等很多生物学过程中发挥重要功能,为深入探讨几丁质酶的免疫防御机制,本实验利用RACE技术克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)PtCht6基因。该基因cDNA全长2736bp,开放阅读框(ORF)2103bp,编码700个氨基酸,具有几丁质酶GH18家族典型特征。利用实时荧光定量技术分析PtCht6在三疣梭子蟹不同组织、不同蜕皮阶段、不同病原感染以及低盐胁迫(11)下的表达特征,结果显示:PtCht6在各组织中均有表达且在肝胰腺中的表达量最高;在不同蜕皮时期的肝胰腺中,其表达量由蜕皮后期(A/B)、蜕皮间期(C)、蜕皮前期(D)依次递减(P0.05);人工感染WSSV和副溶血弧菌后.PtCht6的表达量在肝胰腺中分别于12h、72h达到最大值,在血细胞中均于12h达到最大值,且相较于对照组,整体显著上调表达(P0.05);低盐胁迫能够显著抑制该基因的表达,最高抑制73倍(P0.05)。同时发现,低盐环境下感染WSSV后,该基因达到峰值的时间明显延迟(至少延迟12h.P0.05)。该研究结果预示PtCht6作为免疫因子参与三疣梭子蟹的病原防御,且低盐胁迫在一定程度上抑制了该基因的免疫功能。  相似文献   

2018年9月4日新疆伽师MS5.5地震序列及发震构造讨论     

宋春燕  高荣  刘建明  刘萍  郭寅  温少妍 《中国地震》2019,35(2):256-268

2018年9月4日新疆伽师发生M_S5.5地震，震中处于塔里木地块西北缘，位于1997~1998年伽师强震群震区内。此次伽师地震前发生了M_S4.7前震，截至9月30日最大余震震级为M_S4.6（M_L5.0），初步判定为前-主-余型地震序列。序列精定位结果显示，余震沿近NE向展布，主震震源深度与1997~1998年伽师强震主震基本一致，发震断层陡立。本文从区域的构造环境、地震震源机制解和余震分布特征等方面分析认为，地震发生在伽师隐伏断裂东南端部，为1997~1998年伽师强震群震区的一次新的构造活动。序列参数、视应力等计算结果显示，伽师M_S5.5地震的预测最大余震震级与最大余震震级M_S4.6接近，表明序列最大余震已经发生。  相似文献   

脊尾白虾蜕皮抑制激素基因全长cDNA的克隆及其对环境胁迫的响应     

张美  刘萍  李吉涛  李健 《海洋与湖沼》2015,46(4):764-775

为研究脊尾白虾蜕皮抑制激素基因(MIH)在环境适应中的作用,本文采用RACE技术从蜕皮间期脊尾白虾眼柄中克隆获得MIH-like基因全长c DNA序列,命名为Ec MIH。该基因全长1218bp,包括360bp的开放阅读框,420bp的5'端非编码区和394bp的3'端非编码区;开放阅读框编码120个氨基酸,包括41个氨基酸组成的信号肽和79个氨基酸组成的成熟肽,预测蛋白分子量为13.71k Da,理论等电点p I为8.02。同源性比较分析发现,脊尾白虾MIH-like基因与日本沼虾和罗氏沼虾同源性最高,分别为87%和86%。荧光定量PCR分析结果表明,脊尾白虾MIH-like基因在眼柄中的表达量最高,在卵巢中的表达量最少,而在肝脏、肌肉、鳃和血细胞中不表达。环境胁迫后该基因具有明显的时序性。p H6.5胁迫后24h和48h,眼柄和腹神经节中MIH-like基因的表达量较对照组均显著增加(P0.05);4mg/L氨氮浓度组胁迫后12h和24h,眼柄和腹神经节中MIH-like基因的表达量较对照组均显著增加(P0.05);盐度39胁迫后12h和24h,眼柄和腹神经节中MIH-like基因的表达量较对照组均显著增加(P0.05)。本研究结果表明脊尾白虾mih基因参与了环境胁迫后的机体应激反应。  相似文献   

中国对虾选育群体“黄海1号”和野生群体不同组织基因组DNA甲基化的MSAP分析     

何玉英  杜盈  李健  刘萍  王清印  李朝霞 《海洋学报(英文版)》2015,34(12):175-180

DNA甲基化在调节动物生长发育和组织分化中发挥了重要作用。本研究主要从酶切、预扩和选扩等方面优化了中国对虾DNA甲基化分析的MSAP技术,给出了适合中国对虾MSAP分析的最近反应程序和体系,并采用该技术分别对中国对虾选育群体"黄海1号"和野生群体的肌肉、鳃和血细胞三种组织基因组DNA的CCGG甲基化水平进行分析。研究结果表明,中国对虾野生群体肌肉、鳃和血细胞的DNA甲基化比例分别为23.1%、22.3%和19.7%,选育群体"黄海1号"肌肉、鳃和血液的甲基化比例分别为21.4%、19.6%和18.9%。鳃组织的DNA甲基化水平在两群体中差异极显著(P <0.01),肌肉间的甲基化水平差异显著(P <0.05),而血细胞中甲基化水平差异不显著(P >0.05)。中国对虾野生群体和"黄海1号"同一组织间的甲基化水平不同(P ≤ 0.05),而不同组织间的甲基化水平也各不相同(P ≤ 0.05)。DNA甲基化多态性分析表明,野生群体和选育群体"黄海1号"的鳃和血细胞组织的甲基化多态性比例变化明显,而肌肉组织甲基化水平较稳定,这些变化趋势与CCGG位点的甲基化和去甲基化有关。  相似文献   

Transcript profiles of mitochondrial and cytoplasmic manganese superoxide dismutases in Exopalaemon carinicauda under ammonia stress     

任海  李健  李吉涛  刘萍  梁忠秀  吴建华 《中国海洋湖沼学报》2015,33(3):714-724

  相似文献   

Molecular detection of microbial communities associated with Microcystis vs Synechococcus dominated waters in Tianjin,China     

霍达  陈友信  刘萍  李一鸣  乔之怡  李仁辉 《中国海洋湖沼学报》2018,(4)

Harmful cyanobacterial blooms cause many ecological disasters worldwide. During the development of cyanobacterial blooms, the diversity and domination of cyanobacterial taxa are of a particular concern. In this study, the microbial community structure within a water system, such as in Yuqiao Reservoir and Haihe River in Tianjin City, China, was compared by using next-generation sequencing. A total of 5 001 operational taxonomic units were obtained and clustered from filtered 16 S rDNA V3–V4 region sequences. The cyanobacterial and microbial structures greatly differed in these two water areas. Microcystis was dominant in Yuqiao, whereas Synechococcus was dominant in Haihe. Proteobacteria species were dominant among all detected samples. The relative abundances of Bacteroidetes and Planctomycetes were higher in Yuqiao Reservoir than in Haihe River, whereas Firmicutes and Verrucomicrobia were relatively abundant in Haihe River. Further analyses indicated that the domination of both cyanobacteria was strongly related to several environmental factors, such as total nitrogen, total phosphorus, and dissolved oxygen, reflecting the role of trophic states in shaping the dominance of cyanobacterial taxa. The present study provided the example for Microcystis and Synechococcus dominance along a cyanobacterial bloom in north China. Applying highthroughput sequencing could offer a wide field of vision in analyzing microbial community structures.  相似文献   

用16S rRNA基因的内切酶图谱快速鉴别几种对虾病原菌   总被引：4，自引：0，他引：4  

孔杰  刘萍  张岩  杨丛海  叶军  徐怀恕  郭华荣 《海洋与湖沼》1997,28(5):449-452

坎普氏弧菌是青岛海洋大学生物系微生物实验室于１９８９－１９９０年自对虾养殖场中国对虾红腿病心脏及血淋巴中分离并鉴定的菌株，副溶血菌和溶藻胶弧菌两菌株于１９９４年９月得自中国科学院微生物研究所，为建立快速、准确的中国对虾病原菌的诊断技术，根据几种细菌的１６ＳｒＲＮＡ基因的序列，设计并合成该基因的多聚酶反应的引物ＰＬ１和ＰＬ２。并用该对引物分别从坎普氏弧菌、副溶血弧菌和溶藻胶弧菌的ＤＮＡ要品中扩增出分  相似文献   

高温处理中国对虾受精卵对性比结构的影响   总被引：6，自引：0，他引：6       下载免费PDF全文

杨丛海  王清印  孔杰  于佳  刘萍  王印庚 《海洋科学》1993,17(4):1-2

应用物理或化学方法处理受精卵,在育种方面主要是进行多倍体诱导,以产生三倍体或四倍体。这在海产动物特别是贝类中,已有许多成功的例子。应用温度刺激来处理受精卵的技术不仅可以改变染色体的倍数,对某些种类动物的性别也能产生重要的影响,如蛙类、鳄鱼以及其他动物等。在进行对虾雌性化的研究中,我们应用热冲击(Thermal shock)方法处理中国对虾  相似文献   

对虾一种无包涵体杆状病毒病原的PCR检测   总被引：4，自引：0，他引：4  

石拓  孔杰  刘萍  包振民  韩玲玲  徐怀恕 《海洋学报》2000,22(4):96-100

为建立对虾无包涵体杆状病毒的快速诊断技术,应用PCR技术分别对暴发性流行病发生前、流行中和发病后的对虾样品进行了检测.根据已克隆的对虾杆状病毒部分基因组序列而设计的引物能特异性地扩增出靶DNA片段,最低可以检测1pg的病素DNA.由典型发病症状对虾的胃、腮、肝胰腺、中肠、游泳足、肌内和心脏等器官和组织中成功地检测到病毒.不同组织和器官经扩增得到的信号强弱不同:病虾的胃扩增得到的信号最强,中肠、肌肉、心脏和游泳足次之,腮和肝胰腺信号最弱,说明病毒在不同组织和器官中数量及感染程度不同.在对虾发病前及发病后,用二次PCR还能检测表面不发病呈隐性感染状态的对虾携带的病毒;而对野生健康虾的检测结果为阴性.研究表明,PCR是检测对虾暴发性流行病快速、灵敏而准确的方法,对病毒病的早期诊断、防治和高健康对虾品种的选育具有指导意义.  相似文献   

中国对虾染色体制备及染色体形态的研究   总被引：6，自引：2，他引：6  

刘萍  麦明  孔杰  王清印  杨丛海 《海洋科学》1994,18(1):33-37

以中国对虾原肠期胚胎为材料，采用整体低渗法和管渗法均制备了染色体。通过比较发现，管渗法制备的染色体比整体低渗法的形态好。本文对制备中国对虾染色体技术方面的问题进行了探讨。通过作者的观察，了解到中国对虾染色体徐正常特征外，还存在较特别的形态特征，如主缢痕增强，次缢痕变化，同源配对等。并对产生这些形态特征的原因进行了解释。  相似文献