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鲜浒苔稀硫酸水解产糖工艺研究 总被引：1，自引：1，他引：0
分别用质量分数为0.6%、1.0%、1.4%、1.8%、2.2%的稀硫酸在121℃高温高压的条件下水解鲜浒苔30、60、90 min,浒苔水解残留物再用纤维素酶酶解,用DNS法测定上述各步骤中的还原糖产量。结果表明,浒苔总糖含量为67.2%。稀硫酸水解工艺中,硫酸质量分数为1.8%、水解90 min,浒苔还原糖转化率最高,达59.9%,每克干质量浒苔可产生447.0 mg还原糖。稀硫酸水解残留物纤维素酶酶解工艺中,浒苔还原糖转化率较低,在硫酸质量分数为0.6%、水解时间为60 min时还原糖转化率出现最大值,仅为6.5%。结果显示浒苔稀硫酸水解产还原糖效果显著,但并不能促进纤维素酶酶解。浒苔糖化可单独采用稀硫酸水解工艺,本实验条件下的最佳工艺条件为1.8%硫酸水解90 min。本研究探索了浒苔糖化工艺条件,对后续的浒苔燃料乙醇发酵研究具有一定的参考意义。 相似文献
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Synechococcus sp.CC9311 is a marine cyanobacterium characterized by type IV chromatic acclimation(CA).A genetic transformation system was developed as a first step to elucidate the molecular mechanism of CA.The results show that Synechococcus sp.CC9311 cells were sensitive to four commonly used antibiotics:ampicillin,kanamycin,spectinomycin,and chloramphenicol.An integrative plasmid to disrupt the putative phycoerythrin lyase gene mpeV,using a kanamycin resistance gene as selectable marker,was constructed by recombinant polymerase chain reaction.The plasmid was then transformed into Synechococcus sp.CC9311 via electroporation.High transformation efficiency was achieved at a field strength of 2 kV/cm.DNA analysis showed that mpeV was fully disrupted following challenge of the transformants with a high concentration of kanamycin.In addition,the transformants that displayed poor growth on agar SN medium could be successfully plated on agarose SN medium. 相似文献
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海藻共附生细菌密切参与宿主的生长发育、营养吸收等重要过程,浒苔(Ulva prolifera)是构成黄海绿潮的唯一优势种,对其共附生细菌开展群落结构分析,有望为成灾机制研究提供重要线索。由于植物叶绿体基因组同时具备原核特征和高拷贝数,会严重干扰共附生细菌基于16S rDNA的序列扩增。高等植物中开发了通用引物799F,利用其3′末端与植物同源区的非配对双碱基,可实现对细菌来源序列的特异性扩增。本文针对多个浒苔群体样本,首次评价了引物799F在藻类中的适用性,发现799F的3′末端与浒苔叶绿体同源区仅存在非配对单碱基,其扩增仍会受到浒苔叶绿体严重干扰。在引物799F的基础上,设计了新引物800F,与通用反向引物1492R配对扩增细菌16S rDNA中具高分辨率的V5-V9可变区,配合使用具热启动功能、同时不具校对功能的DNA聚合酶,可基本完全避免浒苔叶绿体来源序列的扩增,并阐明了方法的原理。优化的引物扩增方案可用于浒苔共附生细菌群落结构分析。 相似文献
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Lipolytic enzymes, including esterases and lipases, represent a group of hydrolases that catalyze the cleavage and formation of ester bonds. A novel esterase gene, scsEst01, was cloned from a South China Sea sediment metagenome. The scsEst01 gene consisted of 921 bp encoding 307 amino acid residues. The predicted amino acid sequence shared less than 90% identity with other lipolytic enzymes in the NCBI nonredundant protein database. Scs Est01 was successfully co-expressed in E scherichia coli BL21(DE3) with chaperones(dnaK-dna J-grp E) to prevent the formation of inclusion bodies. The recombinant protein was purified on an immobilized metal ion affinity column containing chelating Sepharose charged with Ni2 +. The enzyme was characterized using p-nitrophenol butyrate as a substrate. Scs Est01 had the highest lipolytic activity at 35℃ and p H 8.0, indicative of a meso-thermophilic alkaline esterase. Scs Est01 was thermostable at 20℃. The lipolytic activity of scs Est01 was strongly increased by Fe2 +, Mn 2+ and 1% Tween 80 or Tween 20. 相似文献
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采用响应面法对重组大肠杆菌生物合成别藻蓝蛋白(holo-apc A)的发酵条件进行优化,提高了蛋白的表达量。以对重组别藻蓝蛋白α亚基在大肠杆菌中表达量影响较大的几种因素用于中心组合设计;中心组合设计试验结果表明诱导温度、培养基初始p H和诱导时机对诱导结果影响显著;经Design Expert 8.0软件优化后的最佳诱导条件为:诱导温度28℃,培养基初始p H 8.5,IPTG终浓度0.1 mmol/L,以及诱导时机3 h。最后验证试验得到的蛋白表达量在已有文献报道结果的基础上提高了70%~580%。中心组合设计-响应面法能够在有限的实验次数下,对影响生物过程的因子进行优化及对其交互作用进行评价,蛋白表达量达20.4 mg/L;IPTG用量由原来的1 mmol/L减少至现在的0.1 mmol/L,降低了发酵成本。 相似文献
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对重组别藻蓝蛋白类荧光蛋白基因工程菌在装有150 mL液体培养基的250 mL摇瓶中的发酵条件进行优化.对起始pH值、接种量、诱导起始时间、诱导温度和时长以及IPTG浓度对重组荧光蛋白表达量进行了分析.结果表明,在装有150 mL液体培养基的250 mL摇瓶中,在起始pH值为7.5,6%接种量,培养温度为37℃,培养时长为3～5 h,诱导温度为22℃,IPTG浓度为0.2 mmol/L,诱导时长为7～8 h的条件下发酵重组别藻蓝蛋白类荧光蛋白,其表达量最高. 相似文献
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将凡纳滨对虾(litopenaeus vannamei)血淋巴细胞中提取的总RNA,经RT-PCR扩增溶菌酶基因(LvLys 基因)的开放阅读框,将其克隆至pMD18-T并测序.用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ双酶切取目的基因并与表达载体pET-28a(+)连接,构建重组质粒pET-28(a+)/LvLys,转移到BL21(DE3)中诱导表达.经亲和纯化得到凡纳滨对虾重组溶菌酶.抑菌活性检测表明重组溶菌酶对大肠杆菌TOP10有一定抑制作用. 相似文献
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