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1.
《广东海洋大学学报》2020,(5)
【目的】为了进一步挖掘海洋贝类潜在的降血糖功能。【方法】选用华贵栉孔扇贝闭壳肌为原料,以抑制α-葡萄糖苷酶活性为评价指标,采用正交试验法和响应面分析法优化α-葡萄糖苷酶抑制肽的制备工艺。【结果】华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)、马氏珠母贝(Pinctada fucata)和栉江珧(Atrina pectinate)等三种海洋贝类的闭壳肌酶解产物均对a-葡萄糖苷酶、a-淀粉酶和脂肪酶具有抑制活性;正交试验和响应面综合分析结果表明,华贵栉孔扇贝闭壳肌制备a-葡萄糖苷酶抑制肽的最佳工艺:复合蛋白酶酶添加量5 500 U/g,酶解温度57℃,酶解pH=7,酶解时间4 h,其酶解液中小肽含量21.64 mg/mL,a-葡萄糖苷酶的抑制率达到31.53%。【结论】利用响应面法可优化制备α-葡萄糖苷酶抑制肽的工艺。 相似文献
2.
在实验室条件下探讨氨氮胁迫对马氏珠母贝(Pinctada martensii)血细胞密度、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、溶菌酶(LSZ)、酸性磷酸酶(ACP)活性的影响。结果表明:1)不同浓度氨氮(1.25~40 mg/L)胁迫3 d后,马氏珠母贝血细胞密度随氨氮浓度的增加呈下降趋势,当氨氮浓度超过5 mg/L时血细胞密度较对照组明显下降,差异极显著(P<0.01);2)血清SOD活性随实验氨氮浓度(1.25~40 mg/L)的增加而明显下降,在较低氨氮浓度(1.25~5 mg/L)时,SOD活性高于对照组,氨氮浓度超过10 mg/L时,SOD活性低于对照组,各实验组SOD活性与对照组均存在极显著差异(P<0.01);3)当氨氮浓度为1.25~20 mg/L时,马氏珠母贝血清CAT活性随氨氮浓度的增加而升高,除氨氮1.25 mg/L组外,其余各实验组血清CAT活性较对照组极显著升高(P<0.01),当氨氮浓度为30~40 mg/L时,血清CAT活性呈急剧下降趋势,且低于对照组(P<0.01);4)马氏珠母贝血清LSZ活性随实验氨氮浓度的增加而降低,当氨氮浓度为10 mg/L以下时,血清LSZ活性高于对照组,当氨氮浓度为20 mg/L以上时,血清LSZ活性较对照组极显著降低(P<0.01);5)氨氮浓度为1.25~10 mg/L时,马氏珠母贝血清ACP活性随氨氮浓度的增加而升高,且高于对照组(P<0.01),当氨氮浓度超高20 mg/L时,马氏珠母贝血清ACP活性随氨氮浓度的增加急剧降低,且低于对照组(P<0.01)。 相似文献
3.
《广东海洋大学学报》2017,(4)
为制备马氏珠母贝免疫活性肽,以马氏珠母贝全脏器为原料,利用体外模拟消化的方法对其进行酶解,然后通过超滤系统收集分子量小于3 ku的酶解液。采用细胞培养方法,以体外免疫活性为指标,利用Sephadex G-25凝胶柱层析、Capto Q强阴离子交换色谱等对马氏珠母贝酶解液进行分离纯化与筛选,获得2个具有免疫活性的肽段,利用电喷雾静电场离子阱串联质谱分别对2个活性肽序列进行测定。结果表明:一个肽的相对分子质量为245.0,肽序列为Ala-Arg/Pro-Met;另一个别肽的相对分子质量为274.0,肽序列为Val-Arg。在浓度0.3 mg/m L时,2种肽能显著促进脾淋巴细胞的增殖与提高巨噬细胞的吞噬能力,表明这2种肽均具有较好的免疫活性。 相似文献
4.
溶藻弧菌asp基因在大肠杆菌中表达活性研究及条件优化 总被引：1，自引：0，他引：1
为进一步研究溶藻弧菌碱性丝氨酸蛋白酶(ASP)蛋白生物学活性和功能,将构建的pET23d-asp在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,对表达产物进行纯化分析,并优化表达条件。结果表明:在咪唑洗脱缓冲液浓度为100 mmol/L时,表达的可溶性ASP被大量洗脱,纯化的ASP相对分子质量约为42 000,具有蛋白活性;在诱导温度28℃、异丙基-β-D硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)浓度1 mmol/L及诱导时间16 h时,表达的活性ASP蛋白最多。 相似文献
5.
【目的】探究儿茶酚胺类激素对华贵栉孔扇贝（Chlamys nobilis）循环生理的影响,为贝类应对环境胁迫的生理响应研究提供基础。【方法】将0.2、1.0、2.0μmol/L的儿茶酚胺类激素（多巴胺、去甲肾上腺素、肾上腺素）注射到华贵栉孔扇贝体内,运用多普勒超声成像技术实时监测扇贝在0、5、20、40、60、180、300 min时的心率、舒张末期速度、收缩峰值速度、血流量等循环生理指标变化情况。【结果】注射0.2μmol/L的多巴胺和肾上腺素后,扇贝的心率相对变化率与海水对照组之间均无显著差异（P> 0.05）,而舒张末期速度、收缩峰值速度、血流量分别在注射后20、40 min显著高于对照组（P <0.05）;注射0.2μmol/L的去甲肾上腺素后,仅舒张末期速度在注射后5 min显著高于对照组（P <0.05）;注射1.0μmol/L的儿茶酚胺类激素后,扇贝各循环生理指标的相对变化率平均值在40 min前低于对照组,在60 min时高于对照组;注射2.0μmol/L的儿茶酚胺类激素后,扇贝各循环生理指标的相对变化率平均值在40 min前均低于对照组且为负值,在1... 相似文献
6.
采用罗丹明123(Rh123)和碘化丙啶(PI)两种荧光染料对栉江珧(Atrina pectinata)精子线粒体活性进行检测,比较不同染液浓度和染色时间的检测效果,并用该方法检测和比较超低温冷冻保存对线粒体活性的影响。结果显示:Rh123和PI染色的最适染液浓度均为10μg/mL,染色时间控制在10 min之内;染色后具有线粒体活性的精子发出绿色荧光,死精子发出红色荧光,质膜受损但线粒体还未受损的精子发出红绿色荧光,表明Rh123和PI双荧光染色检测栉江珧精子线粒体活性是可行的;精液经冷冻后,线粒体活性为61.9%、质膜完整率56.8%,显著低于新鲜精液组(95.3%、93.5%),表明冷冻对精子结构会造成不同程度的损伤,Rh123和PI双荧光染色法可用来检测栉江珧精子质量。 相似文献
7.
《广东海洋大学学报》2017,(3)
采用超声波辅助水提法制得张氏马尾藻(Sargassum zhangii)粗多糖,用无水乙醇、丙酮、乙醚脱脂,Sevage法脱蛋白,得到张氏马尾藻初级纯化的多糖(ZSP),分析ZSP化学组成,模拟人体胃肠道pH环境,测定ZSP对胆固醇胶束中胆固醇的抑制作用及结合胆酸盐活性;采用MTT法观察ZSP对HepG2细胞生长影响,并研究ZSP浓度和作用时间对HepG2细胞内胆固醇水平影响。结果表明,在模拟人体胃肠道pH环境中,ZSP对胶束中胆固醇的抑制率高达18.74%,与牛磺胆酸钠、胆酸钠及甘氨胆酸钠的结合率分别高达57.69%、64.72%、69.03%;在48 h内,100、200、400、800、1 600μg/mL的ZSP对HepG2细胞的生长均无抑制作用;100、200、400、800μg/mL的ZSP在48 h内均可降低HepG2细胞内胆固醇水平,降低程度与外源性ZSP浓度和作用时间相关。ZSP具有良好的降胆固醇活性。 相似文献
8.
【目的】优化太平洋牡蛎(Crassostreagigas)酶解工艺条件,并研究酶解产物及其超滤组分对体外培养的睾丸间质细胞增殖及睾酮分泌的影响。【方法】以多肽得率为参考标准,对木瓜蛋白酶酶解牡蛎的加酶量、初始pH、酶解时间、酶解温度进行单因素及正交实验优化;通过MTT法及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测不同浓度牡蛎酶解产物及其超滤组分对TM3小鼠睾丸间质细胞增殖及睾酮分泌的影响。【结果】木瓜蛋白酶最佳酶解条件为加酶量3 000 U/g,初始pH 6. 5,酶解温度62.5℃,酶解时间4.5 h,在此条件下其多肽质量浓度为14.95 mg/mL;牡蛎酶解液及其超滤组分在0.25～1.00 mg/mL质量浓度范围内,与空白对照组相比,能够显著增加TM3细胞的增殖活性(P0.05),且具有浓度依赖性和时间依赖性。其中,5 ku和5～10 ku超滤组分细胞增殖活性及促进睾酮分泌活性均最强。【结论】牡蛎酶解产物及其超滤组分可有效增强小鼠睾丸间质细胞增殖活性并促进其分泌睾酮。 相似文献
9.
将150条斑马鱼随机等分为5组:2,3,7,8-四氯代二苯并二噁英(TCDD)4个染毒组(染毒剂量分别为0.1μg/L、0.2μg/L、0.4μg/L和0.8μg/L)和空白对照组,水质接触染毒5d后,采用分光光度法测定其肝组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的活力,研究TCDD对斑马鱼的脂质过氧化作用。结果发现,TCDD各剂量染毒组MDA含量均有所增加,其中0.2μg/L组差异显著(P<0.05),0.4μg/L和0.8μg/L剂量组差异极显著(P<0.01);各染毒组SOD活性均有所下降,其中0.2μg/L、0.4μg/L和0.8μg/L剂量组差异极显著(P<0.01);各染毒组GST活力均降低且差异极显著(P<0.01)。一定剂量的TCDD能引起MDA含量增加,使SOD和GST活力降低,对斑马鱼具有脂质过氧化作用。 相似文献
10.
《广东海洋大学学报》2020,(5)
【目的】探讨4种亨氏马尾藻岩藻聚糖的结构及其对氧化型低密度脂蛋白诱导HMVEC损伤的保护作用。【方法】以亨氏马尾藻岩藻聚糖(FD1)为原料,过Sepharose Cl-6B琼脂糖凝胶柱层析得到组分FS11,对FS11进行化学组成分析和单糖分析,测定F、FD1、FS1、FS11等4种岩藻聚糖的相对分子质量、糖链构象和红外光谱,进行结构鉴定;采用MTT法测定3种岩藻聚糖对HMVEC存活率的影响,研究4种岩藻聚糖对氧化型低密度脂蛋白诱导HMVEC损伤的保护作用。【结果】与F、FD1、FS1比,FS11硫酸基和多糖含量最高。FS11中岩藻糖含量高达52.744%;F、FD1、FS1、FS11的相对分子质量分布分别为474 576、459 032、201 285、190 049;I-KI紫外扫描和刚果红实验表明岩藻聚糖具有复杂树状分支和多股螺旋结构;红外光谱结果表明各组分均有O—H、C—H多糖特征官能团、S==O活性特征官能团;加药培养24 h,质量浓度为500μg/mL和1 000μg/mL的4种岩藻聚糖(F、FD1、FS1、FS11)均能显著减弱受氧化型低密度脂蛋白损伤的HMVEC的增殖抑制(P0.01)。【结论】尾藻岩藻聚糖对氧化型低密度脂蛋白诱导的HMVEC损伤具有保护作用。 相似文献
11.
The present work is the first report of the biochemical characterization of the venom from nematocysts of the jellyfish Rhopilema esculentum Kishinouye. The nematocysts were isolated by autolysis and centrifugation and separated by flow cytometry. Four types of
nematocysts were identified: mastigophores, euryteles, and atrichous and holotrichous isorhiza. SDS-PAGE and amino acid analyses
demonstrated that most of the proteins in the nematocyst extract were between 10 kDa and 40 kDa, and that glutamic acid was
the main amino acid. A hemolytic activity assay showed that the activity of the nematocyst venom (RNV) was strongest in Tris-HCl
buffer (50 mmol/L, pH 7.8, 5% glycerol, 0.5 mmol/L EDTA, 0.1 mol/L NaCl). The hemolytic activity was related to protein concentration
and the HU50 against chicken erythrocytes was 0.91 μg/mL. 相似文献
12.
An 8-week feeding experiment was performed to evaluate the effect of dietary genistein on growth performance, body composition, and digestive enzymes activity of juvenile Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Four isonitrogenous and isoenergetic diets were formulated containing four graded supplements of genistein: 0, 30, 300, and 3 000 μg/g. Each diet was randomly assigned in triplicate to tanks stocked with 15 juvenile tilapia (10.47±1.24 g). The results show that 30 and 300 μg/g dietary genistein had no significant effect on growth performance of Nile tilapia, but the higher level of genistein (3 000 μg/g) significantly depressed the final body weight and specific growth rate. There was no significant difference in survival rate, feed intake, feed efficiency ratio or whole body composition among all dietary treatments. An assay of digestive enzymes showed that the diet containing 3 000 μg/ggenistein decreased stomach and hepatopancreas protease activity, and amylase activity in the liver and intestine, while a dietary level of 300 μg/g genistein depressed stomach protease and intestine amylase activities. However, no significant difference in stomach amylase activity was found among dietary treatments. Overall, the results of the present study indicate that a high level of dietary genistein (3 000 μg/g, or above) would significantly reduce the growth of Nile tilapia, partly because of its inhibitory effect on the activity of major digestive enzymes. Accordingly, the detrimental effects of genistein, as found in soybean products, should not be ignored when applied as an alternative ingredient source in aquaculture. 相似文献
13.
在建立斑节对虾实验室养殖模式的基础上，对野外采集的有白斑综合症病毒（WSSV）病典型症状的斑节对虾初步纯化其病毒，并进行WSSV的PCR检测，得到WSSV的感染用样品。对健康斑节对虾分别进行浸浴感染，投喂感染和注射感染。对感染死亡个体进行WSSA的PCR检测和细菌检测，证实WSSV感染性和致死性。浸浴感染、投喂感染和注射感染的感染量分别为4mL/L、0.2g/10g虾体、1/2稀释液0.05mL/10g虾体，死亡开始时间分别为16d、42h、28h，三种感染模式最终死亡率100%，从开始死亡到全部死亡延续时间分别为15d、82h、44h。 相似文献
14.
There is considerable concern that isoflavones, such as genistein in fish feed composed of soybean protein, aff ects somatic growth in fish. Our previous works demonstrated that 30 and 300 μg/g dietary genistein had no significant eff ect on growth performance in Nile tilapia (Oreochromis niloticus), but the higher level of genistein (3 000 μg/g) significantly depressed growth. This study was conducted to further examine the eff ects of dietary genistein on the endocrine disruption on growth hormone/insulin-like growth factor-I (GH/IGF-I) axis in Nile tilapia (O. niloticus). Juvenile fish were fed by hand twice daily to satiation with one of four isonitrogenous and isoenergetic diets, each containing either 0, 30, 300 or 3 000 μg/g genistein. Following an 8-week feeding period, plasma GH and IGF-I levels were investigated by radioimmunoassay and gene expression levels of gh, ghrelin, gnrhs, ghr, npy, npyrs, pacap, ghrs, igf-I, igf-Ir, and igfbp3 were examined by real-time PCR. The results show that no significant change in plasma GH and IGF-I levels in fish fed with diets containing 30 μg/g and 300 μg/g genistein. mRNA expression of genes along the GH/IGF-I axis remained unaff ected, except for igf-Ir, which was stimulated by the 300 μg/g genistein diet. While in fish fed the 3 000 μg/g genistein diet, the plasma GH and IGF-I levels decreased, and mRNA expression of gh, ghr2, npyr1, igf-I, and igf-Ir were also significantly depressed. In contrast, npy and igfbp3 mRNA expression were enhanced. This study provides convincing evidence for growth impediment by genistein by disturbing the GH/IGF-I axis in Nile tilapia O. niloticus. 相似文献
15.
在实验室条件下模拟多种氮源共存的虾池水环境,利用稳定同位素示踪剂,研究温度、光照、盐度、pH、藻浓度对波吉卵囊藻氨氮吸收速率的影响。结果表明:温度、光照和藻浓度对波吉卵囊藻氨氮吸收速率影响极显著(P<0.01)。当温度为20℃,照度为4 500 lx,藻浓度为5.5×105/mL,波吉卵囊藻对氨氮均有最大的吸收速率,分别为1.114、1.400、1.482μg g-1 h-1。单因素方差分析得出波吉卵囊藻吸收氨氮的最优组合为:温度20℃,照度4 500lx,盐度15,pH 7.5,藻浓度5.5×105/mL。可通过对环境因子的调控,提高波吉卵囊藻对水体中氨氮的吸收速率。 相似文献
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在水温26±2℃、盐度28条件下,恩诺沙星(enrofloxacin,EF)按5 mg/kg的剂量腹腔注射和口灌红笛鲷(Lutjanus sanguineus),用反相高效液相色谱法研究恩诺沙星在红笛鲷体内的药代动力学和组织分布。结果显示:注射和口灌后红笛鲷血浆的药时数据均符合一级吸收二室模型;血药达峰时间(tp)分别为0.75和1.5 h,血药质量浓度峰值(cmax)分别为5.22和3.94μg/mL,药时曲线下面积(AUC)分别36.98和17.24 mg/(L.h),消除半衰期(t1/2β)分别为13.28和9.18 h;恩诺沙星在组织中分布较广,注射和灌服给药肌肉、肝脏和肾脏的cmax分别为3.53和3.40μg/g、4.08和3.98μg/g、11.23和5.40μg/g,tp分别为1.5和2.0 h、1.0和2.0 h、0.75和1.5 h,AUC分别33.17和23.12 mg/(L.h)、39.36和18.20 mg/(L.h)、98.97和56.69 mg/(L.h);EF在红笛鲷体内消除速度较慢,注射和灌服给药肌肉、肝脏和肾脏的t1/2β分别为22.08和83.32 h、41.52和94.47 h、20.94和21.81 h。表明恩诺沙星注射给药在红笛鲷体内的吸收和消除均快于口灌给药。 相似文献
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以 MC3T3-E1细胞系为实验材料,探讨了真核表达的重组蛋白 rACCBP 对成骨细胞的作用.结果表明:rACCBP 对 MC3T3-E1的分化具有抑制作用,用含有0.001 g/mL rACCBP 的 DMEM 培养液,培养8 d 后细胞的ALP 活性仅为7.187 U/mg,远低于参照的11.917 U/mg; rACCBP 削弱了 dexamethane 和 ascorbic acid 对 MC3T3-E1的诱导作用 相似文献
18.
以红笛鲷Lutjanus sanguineus弧菌病的主要病原菌——溶藻弧菌Vibrio alginolyticus为抗原制备兔抗血清,以辣根过氧化酶标记的羊抗兔血清为酶标二抗,建立了酶联免疫吸附试验检测技术。通过棋盘滴定法测定,得出溶藻弧菌菌悬液的最佳工作浓度为5×108mL-1,兔抗溶藻弧菌血清的最佳稀释度为1∶16000,酶标羊抗兔抗体的最佳稀释度为1∶2000。应用本实验建立的间接双抗体夹心法对红笛鲷进行现场检测,患病红笛鲷特异性抗体的检出率为70%,外观健康红笛鲷的检出率为20%。结果表明,本实验所建立的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测法可以用于红笛鲷弧菌病的血清流行病学研究,而且可以检测出隐性感染状态下的红笛鲷。 相似文献