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1.
以鹌鹑蛋蛋清蛋白作为原料,探讨酶解鹌鹑蛋蛋清蛋白生成小分子活性肽的加工工艺。采用单因素和响应面分析试验,优化出蛋清蛋白酶解的最佳工艺条件为:选用胰蛋白酶,固液比1∶3,加酶量187.5 U/g底物,水解时间5 h,pH 8.07,酶解温度51.76℃,水解度可达到91.37%,且得到的酶解液风味良好。采用高效液相色谱法分析酶解液中游离氨基酸的组成及含量,结果表明:酶解液含有7种人体必需氨基酸,其中赖氨酸含量达16.22%,是1种天然优质的水解制品,可精制成富含多种氨基酸的蛋白溶液,应用于新型产业的开发。 相似文献
2.
以水解度为指标,比较了6种蛋白酶对香港巨牡蛎(Crassostrea hongkongensis)的水解效果。在单因素考察实验的基础上,采用Box-Behnken模型响应面设计,建立香港巨牡蛎蛋白酶解的二次回归模型,确定最佳的水解条件。实验结果表明,海产品专用蛋白酶对香港巨牡蛎蛋白的水解效果优于其他蛋白酶,该酶的最佳水解条件为:酶与底物比为5.93%,酶解时间为4.07 h,酶解温度为54.6℃。在此条件下,海产品专用蛋白酶酶解香港巨牡蛎蛋白的水解度达到25.73%±2.39%。本研究为香港巨牡蛎的开发和利用提供了理论依据。 相似文献
3.
双酶分步水解金枪鱼(Eleotridae)碎肉制备高F值酶解液的工艺研究 总被引：2，自引：2，他引：0
以金枪鱼碎肉为原料, 采用双酶分步水解法制备高F值酶解液, 通过Box-Behnken试验设计, 分别确定两步酶解的最佳条件, 酶解液经活性炭静态吸附去除游离芳香族氨基酸, 对脱芳后的酶解液进行氨基酸组成分析并测定F值。结果表明, 胃蛋白酶为第一步水解用酶, 酶解的最佳工艺条件为酶用量650U/g, 料水比1∶7(g/mL), 温度35.9℃; 风味蛋白酶为第二步水解用酶, 酶解的最佳工艺条件为酶用量50700U/g, pH 6.51, 温度51℃, 最终水解度达到36.87%±0.54%; 酶解液在pH 3.0, 温度35℃条件下, 经5%(质量体积分数)的活性炭吸附时间3h后, 脱芳率达到63.18%, F值为30.33, 符合高F值肽的要求。 相似文献
4.
以金枪鱼碎肉为原料, 采用双酶分步水解法制备高F值酶解液, 通过Box-Behnken试验设计, 分别确定两步酶解的最佳条件, 酶解液经活性炭静态吸附去除游离芳香族氨基酸, 对脱芳后的酶解液进行氨基酸组成分析并测定F值。结果表明, 胃蛋白酶为第一步水解用酶, 酶解的最佳工艺条件为酶用量650U/g, 料水比1∶7(g/mL), 温度35.9℃; 风味蛋白酶为第二步水解用酶, 酶解的最佳工艺条件为酶用量50700U/g, pH 6.51, 温度51℃, 最终水解度达到36.87%±0.54%; 酶解液在pH 3.0, 温度35℃条件下, 经5%(质量体积分数)的活性炭吸附时间3h后, 脱芳率达到63.18%, F值为30.33, 符合高F值肽的要求。 相似文献
5.
为了能够有效利用糙刺参内脏蛋白,以水解度为主要指标,对酶解蛋白酶进行了筛选,并系统研究了酶解温度、p H、加酶量和水解时间等单因素对水解度的影响。在此基础上,利用响应面中心组合设计实验,对酶解工艺进行了优化,得到以温度、p H、加酶量及水解时间为因子的二次方程,通过方差分析和验证性实验得出,此二次方程能较好反应海参内脏团蛋白水解度的变化规律,得到最佳水解条件为:温度52.66℃,p H 6.71,加酶量2.5%(质量分数),酶解时间10 h,预测最高水解度为49.58%。最佳酶解条件下所得多肽74%以上分子质量小于500 Da。利用DPPH法测定最佳条件酶解所得多肽的抗氧化活性,3 g/L的抗氧化率达到了24.8%,利用ABTS法测定最佳条件酶解所得多肽的抗氧化活性,3 g/L的抗氧化率达到了0.255μmol/g。为海参内脏蛋白的利用提供了参考。 相似文献
6.
为充分开发利用海参资源,优化海参体壁酶解工艺,鉴定海参多肽,本文以水解度为指标,设计了3因素(时间、温度和加酶量)3水平的响应面实验,得到海参水解的最优条件是:仿刺参(Apostichopus japonicus)体壁在加酶量1.97%、温度55.7°C、水解136.8min的条件下,水解度为83.39%;海地瓜(Acaudina leucoprocta)体壁在加酶量1.70%、温度55.4°C、水解115.6min的条件下,水解度为63.68%。之后通过使用超滤膜、反相高效液相色谱(RP-HPLC)、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)技术和蛋白测序仪等分析手段从水解产物中分离鉴定出4种多肽。其中,经N端序列鉴定出仿刺参多肽S1、S2氨基酸残基序列分别为Gly-Pro-Val-Gly-Ala-Ser-Gly-Pro-Gln-Gly-ProGln-Gly-Pro-Gln-Gly-Leu-Ser-Ala-Leu和Trp-Pro-Pro-Gly-Asn-Ser-Gly-Ile-Gln-Gly。海地瓜多肽A1和A2氨基酸残基序列分别为Gly-Ala-Asn-Gly-Asn和Trp-Leu-Pro-Gly-Asp-Thr-Gly-Pro-Gln-GlyVal-Thr-Gly-Pro-Val-Gly-Pro-Ala-Gly。 相似文献
7.
以鳕鱼皮为原料,采用双酶水解法制备鱼蛋白水解物再经亚铁修饰获得鱼蛋白水解物亚铁复合物(Fe-FPH),并对Fe-FPH进行了抗营养性贫血的实验研究。结果表明:(1)以水解度(DH)为5%的鱼蛋白水解物为原料,在pH7.0、温度20℃、螯合时间15min的条件下可获得Fe-FPH6.7%;(2)Fe-FPH蛋白含量为85.1%,铁含量达40254mg/kg,氨基酸价为59.62;(3)抗营养性动物实验研究表明:Fe-FPH给药组第5天可显著提高营养性贫血大鼠的Hb含量,第11天时表现出极显著效果;Fe-FPH组,第11天有显著降低大鼠血中PPIX作用,到第18天时表现出极显著效果。因此,Fe-FPH不仅含有较高的营养价值,而且有显著抗营养性贫血功能,可望成为鳕鱼加工副产物高效利用的有效途径。 相似文献
8.
探讨了用复合酶法制备鱼是鱼活性寡肽及其氨基酸组成和相对分子质量分布情况。应用正交试验法研究了酶量、酶解温度、酶解时间对鱼是鱼蛋白质水解度和酶解液苦味的影响。结果表明,最佳酶解作用条件是:酶量为100u/mL;酶解温度为50℃;酶解时间为4h。此时的酶解液苦味较低,水解度可达62.81%。应用氨基酸分析仪和凝胶排阻高效液相色谱分析了该寡肽的氨基酸组成和相对分子质量的分布范围,其十肽以下的小肽占67.77%,氨基酸组成平衡,必需氨基酸含量丰富。鱼是鱼活性寡肽有望成为保健食品、医药等领域的新型高品质原料。 相似文献
9.
本文对风味蛋白酶水解金枪鱼碎肉蛋白的特性进行了研究, 采用测定不同底物浓度下的瞬时速率的方法来测定米氏常数Km值, 探讨了水解时间、底物浓度与水解速率及水解度的关系, 并拟合出水解时间与水解度之间关系的数学模型。结果表明: 该酶解反应的米氏常数Km=0.0098, 酶解过程的动力学方程为DH = 8.621 ln (1 + 0.053t?0.0003[S]t)。通过动力学方程求得当酶浓度为200U/g时, 最大临界初始底物浓度[S]为176.81g/L。验证实验表明此模型的可信度高(R2=0.99), 实际值与拟合值基本吻合, 可以用于模拟风味蛋白酶水解金枪鱼碎肉蛋白制备活性肽的反应过程和酶解条件的工艺优化。 相似文献
10.
为高质化利用南美白对虾加工副产物蛋白资源,本研究以南美白对虾加工副产物虾头虾壳为原料,蛋白水解度为考察指标,采用单因素和响应面试验优化酶解工艺。检测虾蛋白肽分子量的分布范围,评价其抗氧化能力及免疫调节作用。结果表明,碱性蛋白酶与虾头内源酶自溶酶解具有较好的协同作用,最佳酶解工艺参数值为：酶添加量4%、酶解时间6.5 h、酶解温度40 ℃、料液比1∶5。经蛋白层析仪检测,分子质量分布在75~1 355 Da的蛋白肽占比达到76.35%。虾蛋白肽的羟自由基清除率IC50为4.64 mg/mL、DPPH自由基清除率IC50为3.08 mg/mL,提示其具有一定的抗氧化能力。虾蛋白肽中剂量组（10 mg/kg）能显著促进淋巴细胞增殖,并提高免疫低下模型小鼠的免疫器官指数和吞噬指数,表明虾蛋白肽具有显著的免疫调节作用。 相似文献
11.
为研究带鱼(Trichiuruslepturus)蛋白复合酶解液中抗菌肽(ABP)的抑菌性及表征活性,本文以舟山小带鱼为研究对象,制备蛋白抗菌肽。研究得到抗菌肽分子量在区间(3000Da, 3000—800Da,800Da)内均有分布,在3000—800Da区间内含量达到49.61%,酶解程度最深,氨基酸总量为881.83mg/g,必需氨基酸与氨基酸总量比为44.75%,必需氨基酸与非必需氨基酸比为81.33%,营养价值高。六类提升抗菌效力的氨基酸占氨基酸总量42.71%,抗菌效力较高,具有广谱抗菌活性,为阳离子型抗菌肽,对G–具有较强的抑菌效能。抗菌效力与稀释128倍(10.15U/mL)土霉素抗菌效力相当,与稀释4倍的硫酸链霉素(325U/mL)抗菌效力相当。对抗菌肽的表征活性进行研究表明:该抗菌肽在pH 2—12下溶解度良好,均大于88%,有强适应性;乳化性随pH增大而增强, pH 4时乳化性最低,为53.68%,在pH 12时达到最高值78.34%;乳化稳定性在pH 6时达到最高,为85.83%, pH环境过酸或者过碱的情况下乳化稳定性均较低;发泡性随pH上升呈现增长趋势,在pH 12时达到最大值57.33%, pH 4时抗菌肽泡沫稳定性最低,为22.86%, pH升高,泡沫稳定性也随之增强,在pH 12时达到最大值59.58%。该研究结果对探究带鱼抗菌肽的各项性质提供了理论依据,对带鱼抗菌肽的应用研究具有一定的理论指导意义。 相似文献
12.
青鳞鱼下脚料水解蛋白的制取及其营养评价 总被引：11，自引：0，他引：11
以青鳞鱼（Harengula zunast)下脚料为原料，采用碱萃取，蛋白酶水解，浓缩，喷雾干燥等手段，制得水解鱼蛋白。研究了碱萃取，蛋白酶水解条件及不同沉淀方法对水解鱼蛋白沉淀效果的影响，并对水解鱼蛋白制品营养价值进行了评价，结果表明，下脚料水解鱼蛋白制品含粗蛋白72．9％，氨基酸总量67．6％，其中必需氨基酸占44．6％，氨基酸分为96，苏氨酸为其限制性氨基酸（1973年FAO／WHO标准），无机盐钙，镁，铁，锌，铜，磷含量丰富，以有机溶剂（异丙醇，乙醇)为沉淀剂沉淀水解蛋白时，粗蛋白损失率约为30％（干基计）。 相似文献
13.
Extracellular peptide hydrolysis rates were measured in seawater and sediment from Flax Pond salt marsh using peptide analogs (LYA-peptides) as substrates. This technique allows the direct measurement of specific hydrolysis products and thus provides insights into enzymatic hydrolysis pathways. In sediments, hydrolysis rate constants of LYA-peptides varied seasonally and with depth. Highest activity was found in spring and summer, and most cores exhibited a subsurface maximum. Calculations using the concentrations of chemically-measured peptides suggested that extracellular hydrolysis of peptides is faster than the rate of free amino acids uptake. However, not all peptides may be available for enzymatic hydrolysis. In both seawater and sediment, extracellular hydrolysis of peptides of up to 8 amino acids yielded smaller peptides and free amino acids. Hydrolysis rates depended on size of the peptide substrate, although a clear relationship with number of amino acid constituents was not evident. Peptides containing >2 amino acids were hydrolyzed 10–400 times faster than dipeptides or the fluorogenic substrate Leucine-MCA. Thus, dipeptidases are either uncommon in nature, or hydrolysis is carried out by nonspecific hydrolases that with a low affinity for dipeptides. This is also suggested by the presence of a lag time before dipeptide hydrolysis begins, and the absence of dipeptide hydrolysis in 0.2-μm-filtered. One implication of this finding is that measurements of hydrolysis rates using substrates like Leu-MCA may not accurately predict the magnitude of hydrolysis rates of macromolecules in the marine environment. Even though dipeptide hydrolysis is slow compared to that of larger peptides, LYA-dipeptides are preferentially produced from the hydrolysis of larger substrates. LYA-dipeptides do not penetrate cell membranes of microorganisms because of their size, but natural dipeptides are smaller and can be transported across the cell membrane. Since dipeptides do not appear to accumulate in natural waters, they must be rapidly removed by microorganisms. 相似文献
14.
牡蛎肉质鲜美,营养丰富,具有很高的食用价值。本研究以舟山长牡蛎(Crassostreagigas)为研究对象,以DPPH自由基清除率为测试指标,通过UF、GFC及RP-HPLC等技术,对牡蛎蛋白酶解液进行分离纯化,获得牡蛎蛋白小分子肽样品,并对其氨基酸组成进行营养性评价。研究结果表明:浓度为30%—100%的硫酸铵处理酶解液的分离效果明显优于低于浓度为30%硫酸铵的分离效果,其DPPH自由基清除率达到52.43%;纯化后得到两种牡蛎蛋白小分子肽分别标记为组分a(Mw1kDa)和组分b(1kDaMw3kDa);组分a中牡蛎蛋白小分子肽分子量分布主要为1995.2Da、1258.9Da、1023.3Da、398.1Da;对牡蛎蛋白小分子肽组分a进行检测,发现其中氨基酸种类及含量丰富,其中必需氨基酸(EAA)含量为18.863%,总氨基酸含量(TAA)为43.3748%,必需氨基酸占总氨基酸43.49%,必需氨基酸与非必需氨基酸(NEAA)的比例为76.95%,风味氨基酸(FAA)含量为18.9147%,占总氨基酸含量的43.61%。综上可见,牡蛎蛋白小分子肽具有极高的营养价值和市场经济效益,此研究为牡蛎蛋白抗衰老小分子活性肽(Zel'ner)的开发提供了新的思路和方向。 相似文献
15.
Advances in analytical techniques now allow for the potential analysis of intact peptides and proteins isolated from marine sediments. However, there is no established technique for the extraction of macromolecular materials from marine sediments. Six different methods for extracting the amino acid component from coastal marine sediments were compared to the standard hot acid hydrolysis technique for their percent recovery and amino acid composition. The standard hot acid hydrolysis on dried, whole sediments released the greatest concentration of total amino acids (PS-THAA; 3.52 mg gdwt− 1 ± 10% (SMD)), yet this only accounted for 22% of the total nitrogen in Puget Sound sediments (Washington, USA). Repeated hydrolysis of the same samples did not improve the recovery of nitrogen by more than an additional 10%. Base extraction (0.5 N NaOH) was the second best method for recovering amino acid nitrogen, releasing 60% of the Puget Sound total hydrolyzable amino acids (PS-THAA) (corresponding to 13% of the total sedimentary nitrogen), and has the advantage that it does not rely on peptide hydrolysis to free the nitrogenous component from the sediment matrix. The amino acid distribution of the 0.5 N NaOH extract was not significantly different than the initial THAA. Other non-hydrolyzing methods released lower yields of amino acids (Triton X-100 ≥ hot water > 50 mM NH4HCO3 > HF), but might prove to be of use to investigators interested in specific fractions of sedimentary organic nitrogen because these four methods had distinctly different amino acid compositions (enrichments in basic amino acids and depletions in acidic amino acids). Treatments with HF both before and after traditional hydrolysis and/or extractions with base did not release any more of the sedimentary nitrogen. Our results are consistent with the hypothesis that a large fraction of the sedimentary nitrogen (TN) is protected within an organic matrix. 相似文献
16.
O-phthaldialdehyde is used for the determination of free amino acid in seawater by measuring the fluorescence produced by its reaction with the a-amino group of amino acids. This method is so sensitive that as little as 1-10 nM of amino acids and less than 1 ml of seawater may be sufficient for one test.This method is simple, rapid and accurate and a-amino acids contained in seawater can directly be determined without concentration and extraction. It is free from the interference of large content of inorganic salts and other nitrogenous compounds in seawater.A hundred and fifty-two samples collected at 24 stations in offshore of Zhejiang have been analyzed. The results obtained show that the range of concentration of the total free amino acid is 0.37-4.70 μM. The values are high near shore and low offshore. 相似文献
17.
设置盐度为0(对照组)、5.0、7.5、10.0的4个水体,饲养平均体重为(402.4±44.6)g的乌鳢30天,测定乌鳢生长性能、肌肉成分、游离氨基酸和肌肉物理性能指标,研究盐度对乌鳢生长和肌肉品质的影响。结果表明,各组乌鳢的增重率分别为37.7%、33.9%、31.5%、6.3%,成活率分别为100%、100%、100%和63.6%,表现出随盐度增加而下降的趋势,但盐度0、5.0、7.5各组间无显著差异,在盐度为10.0的水体中,乌鳢成活率和增重率均显著降低(P<0.05),饲料系数显著增加(P<0.05);随盐度增加,肌肉水分和肌肉失水率增加,而脂肪含量减少;肌肉蛋白含量和胶原蛋白含量在盐度0、5.0、7.5各组间无差异,但在盐度10组显著降低;与对照组相比,盐度7.5组的肌原纤维耐折力增加,肌纤维直径减小;随盐度升高,肌肉质构指标(硬度、弹性、黏性、咀嚼性、凝聚性)均有不同程度改善;在肌肉游离氨基酸方面,随盐度增加,肌肉游离呈味氨基酸和总游离氨基酸含量呈上升趋势,其中盐度10.0组较对照组分别增加88.2%、42.7%(P<0.05)。上述研究表明,适宜的盐度可改善乌鳢的肌肉品质,结合鱼体生长性能,适宜的盐度为7.5。 相似文献
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本文对广西钦州(Gq)、福建霞浦(Fx)、浙江温州(Zw)、浙江三门(Zs)、浙江宁海(Zn)、浙江慈溪(Zc)等6个野生群体拟穴青蟹(Scylla paramamosain)肌肉进行了氨基酸及脂肪酸分析。共测定出19种游离氨基酸和26种脂肪酸。氨基酸含量在80.94—191.39mg/g之间, Gq为最高;总脂肪酸含量在7.97—11.38mg/g之间,Zn为最高。主要氨基酸为甘氨酸和精氨酸;主要脂肪酸为C20:5n3(EPA),占总脂肪酸含量的平均值为(22.47±5.84)%。各群体风味氨基酸和多不饱和脂肪酸含量丰富,占总氨基酸比例(TDAA/TFAA)和总脂肪酸比例(PUFA/TFA)分别为(53.62±5.43)%和(59.27±5.29)%。Zs群体的必需氨基酸含量及C22:6n3(DHA)均为最高。主成分分析结果表明:各群体的氨基酸与脂肪酸组成与含量相似性与地理距离分布具有一定的相关性,特别是Gq群体,在氨基酸与脂肪酸的分类中与其他群体区分比较明显。各群体风味氨基酸和多不饱和脂肪酸的聚类分析结果均表明:Zw、Zc与Gq群体较为接近,具有较强的甜味; Fx、Zn与Zs群体较为接近,具有较强的香味及不饱和脂肪酸营养价值。 相似文献
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为研究褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)发育早期氨基酸和脂肪酸的组成及变化规律,采用GC/MS法等方法分析了褐菖鲉的受精卵、初产仔鱼、前仔鱼期和后仔鱼期四个阶段的氨基酸和脂肪酸组成特点及其含量变化。结果表明:(1)总氨基酸含量从受精卵至初产仔鱼显著下降、前仔鱼期又显著回升、至后仔鱼期再次呈显著下降(P0.05);(2)总游离氨基酸量以初产仔鱼最高,是受精卵的10倍,各期的游离氨基酸占总氨基酸比值为1.4%—20.0%;(3)受精卵中以DHA、C16:0两者实际含量最高,分别为104.88 mg/g和68.74 mg/g,C18:1n-9和EPA次之,分别为41.23 mg/g和27.23 mg/g;(4)褐菖鲉内源性营养阶段被选择性消耗的主要脂肪酸依次为C16:0C18:1EPADHAARA,就脂肪酸的利用率而言MUFASFAPUFA;(5)褐菖鲉仔鱼在开口后的外源营养阶段对脂肪酸的利用率为PUFASFAMUFA,其中DHA相对EPA和ARA被选择性消耗。研究表明,褐菖鲉受精卵的游离氨基酸/总氨基酸比值符合海水鱼类沉性卵的特征,褐菖鲉在早期发育不同阶段对脂肪酸消耗具有不同的选择性,C16:1、C16:0、C18:0和C18:1是褐菖鲉早期发育的主要能源物质,在褐菖鲉开口饵料中添加一定水平的异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸等氨基酸及高度不饱和脂肪酸DHA等是十分必要的。 相似文献