分子生物学技术在水产养殖动物病原快速检测中的应用   总被引：2，自引：0，他引：2       下载免费PDF全文

贺电  吴后波 《海洋科学》2007,31(3):76-81

在动植物病原体的检测中,方法学历经了生物培养、显微镜观察、生化检测、免疫学到分子生物学几个阶段的变更,朝着更特异、更快速、更便捷、更安全、集成化、微量化、定量化、费用低廉化的方向发展。传统病原检测主要依据致病病原体在介质或细胞中的培养、分析病原体表型或血清型特征,或采用组织学检测病原体对宿主器官的影响[1]。这类方法耗时、特异性和灵敏度低,远远不能满足日常快速检测工作的需要。免疫学方法可以在一定程度上缩短检验时间,就灵敏度而言,酶联免疫吸附试验(ELISA)要高于免疫荧光、反向免疫凝胶电泳和免疫扩散,是最常用的免疫学检测病原体方法[2]。  相似文献   

莫桑比克罗非鱼孵卵期间口腔粘膜变化的研究     

楼宝城  林华英  蒋明星 《中国海洋大学学报(自然科学版)》1990,(2)

用组织学、组织化学和酶技术,对雌性莫桑比克罗非鱼在孵卵前后口腔粘膜的组织结构、抗菌酶的比活力变化进行初步研究。结果表明:在口腔粘膜的上皮中,杯状细胞是一个重要的结构,它随着雌鱼的生理状态的改变而变化。雄鱼、雌鱼和孵卵期的雌鱼口腔粘膜上皮中的杯状细胞数量上的差别显著。孵卵期的雌鱼口腔粘膜类似于哺乳动物的子宫粘膜也是受性激素影响的靶器官。该种鱼的口腔粘膜中存在着两种抗菌酶;蛋白质水解酶和壳多糖酶。孵卵前后,这两种酶的比活力分别提高1.4—2.03倍。说明孵卵时,口腔粘膜为使卵及仔鱼健康的发育,增强了抗菌能力。研究结果证明:抗菌力的增加与口腔粘膜中的杯状细胞的大量增生有着密切的关系。  相似文献   

甘糖酯对大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物活性的诱导作用     

姚子昂  马洪明  姜招峰  管华诗 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2001,31(2):215-219

为了研究甘糖酯对大鼠体内尿激酶型纤溶酶原激活物 (urokinase PlasminogenActivator,u PA)活性的影响 ,采用溶解圈中和抑制法和发色底物法检测了大鼠口服甘糖酯后体内u PA活性的变化情况。结果表明 :甘糖酯可提高大鼠体内血液的纤溶活性 ,主要表现为 u PA活性升高。以不同剂量的甘糖酯连续喂药 10 d后 ,发现喂药组大鼠 u PA活性明显高于对照组 ,喂药组大鼠血浆 u PA活性升高同喂药剂量正相关 ,在 0～ 10 0 mg/ kg的剂量范围内 ,随喂药剂量增加而升高。提示在一定的剂量范围内甘糖酯可提高大鼠体内 u PA活性 ,激活纤溶系统 ,提高血液纤溶活性 ,表现出良好的抗栓作用  相似文献   

用16S rRNA基因的内切酶图谱快速鉴别几种对虾病原菌   总被引：4，自引：0，他引：4  

孔杰  刘萍  张岩  杨丛海  叶军  徐怀恕  郭华荣 《海洋与湖沼》1997,28(5):449-452

坎普氏弧菌是青岛海洋大学生物系微生物实验室于１９８９－１９９０年自对虾养殖场中国对虾红腿病心脏及血淋巴中分离并鉴定的菌株，副溶血菌和溶藻胶弧菌两菌株于１９９４年９月得自中国科学院微生物研究所，为建立快速、准确的中国对虾病原菌的诊断技术，根据几种细菌的１６ＳｒＲＮＡ基因的序列，设计并合成该基因的多聚酶反应的引物ＰＬ１和ＰＬ２。并用该对引物分别从坎普氏弧菌、副溶血弧菌和溶藻胶弧菌的ＤＮＡ要品中扩增出分  相似文献   

金属离子对锯缘青蟹NAGase活力的影响     

杨学敏  谢进金  张继平  林建成  陈清西 《台湾海峡》2006,25(3):343-347

本文研究了几种金属离子对锯缘青蟹（Scylla serrata）N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase）活力的影响．其结果表明：Li^＋、Na^＋和K^＋对酶活力没有明显影响，Mg^2＋、Ca^2＋和Ba^2＋对该酶均有激活作用，激活程度依次为Ca^2＋〉Ba^2＋〉Mg^2＋．Al^3＋、Fe^3＋、Cd^2＋、Pb^2＋和Hg^2＋对该酶具有一定的抑制作用，2．0μmol／dm^3的Hg^2＋可以使酶活力完全丧失．Co^2＋对酶的效应是先激活后抑制，Mn^2＋对酶仅有轻微的激活作用．Cd^2＋和Fe^2＋对锯缘青蟹NAGase的抑制作用都呈竞争性-反竞争性混合Ⅱ型效应，Cd^2＋的抑制常数Ki和KiS分别为23．9、5．0mmool／dm^3，Fe^3＋的抑制常数Ki和KiS分剐为395．5、135．6μmol／dm^3．Ki〉KIS说明酶一底物络合物（ES）与抑制剂的亲和力比游离酶（E）与抑制剂的亲和力大．  相似文献   

肝素酶Ⅰ对合成的肝素五糖的酶解作用及对其抗Xa因子活性的影响     

于广利  管华诗  Jawed Fareed 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2001,31(4):529-535

研究肝素酶Ⅰ(来源于Flavobacterumheparinase，EC4.2.2.7)对人工合成的且含有与抗凝血酶Ⅲ特定结合位点的肝素五糖(SHP)的酶解作用，并对酶解作用的动力学进行研究。利用强阴离子高效液相色谱(SAX-HPLC)对酶解混合物进行分离，利用质谱(ESIMS)和核磁共振波谱(1H-NMR)技术对得到的二糖和三糖的结构进行确证。研究结果表明，这种被作为肝素反向试剂的肝素酶Ⅰ可水解人工所合成的肝素五糖，从而使之丧失抗Xa因子活性。  相似文献   

扇贝裙边酶水解工艺条件的研究   总被引：10，自引：0，他引：10       下载免费PDF全文

魏玉西  田学琳 《海洋科学》1993,17(4):5-7

扇贝在加工完干贝后,大量的含有较高营养价值的扇贝裙边有待利用。本文就扇贝裙边利用不同蛋白酶的水解工艺条件进行了较深入的探讨,以期找出扇贝裙边酶水解的最佳工艺条件。  相似文献   

二色桌片参酶解液对转化细胞的效应   总被引：3，自引：2，他引：3  

陈正明  陈玉强  曹顺达  吴乔  苏文金 《台湾海峡》1997,16(3):270-274,T001

用二色桌片参（Mensamariaintercedens）酶解液处理转化的人胚肺成纤维细胞（NLF）后，细胞生长受到显著抑制，抑制率达64．84％，光镜下细胞透光性加强，铺展较好，细胞核形更为规则，核畸形现象减少；线粒体结构趋于正常；软琼脂集落实验表明，细胞集落形成率由23ｘ10－5下降至12．5ｘ10－5，裸小鼠致瘤实验显示抑瘤率为82．39％，差异显著（p＜5％）。结果提示，二色桌片参酶解液可能逆转转化的HLF细胞的恶性表型，对其有一定的诱导分化作用。  相似文献   

贻贝粉酶解液提取复合氨基酸   总被引：1，自引：1，他引：1  

叶眉  高昕 《海洋科学》1996,20(1):56-60

报道了以脱脂后的贻贝粉为原料，采用酶解法从其酶解液中分离提取复合氨基酸的工艺。其收率为２０％，纯度约为９０％。其中必需氨基酸（不计色氨酸）约占复合氨基酸总量的５５％，其氨基酸模式与ＦＡＯ／ＷＨＯ组织确定的模式及人乳模式进行了对照，通过适量添加个别氨基酸可使其配比接近人乳模式。  相似文献   

裙带菜原生质体的分离和培养   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴少波 《中国海洋大学学报(自然科学版)》1988,(4)

本文以裙带菜(Undaria pinnatifida(Harv.)Suringar)为材料,进行原生质体分离和培养研究。取得以下结果: 1、使用海螺酶(sea snail enzymes)和纤维素酶(cellulase,Onozuka R-10),酶解裙带菜细胞壁,在一定的条件下,能够大量地分离成活的裙带菜原生质体。 2、实验表明,氯化钠可作为分离裙带菜原生质体研究中的一种理想的渗透刑。 3、荧光增白剂染色镜检法可作为鉴定裙带菜原生质体的一种辅助方法,并适用于原生质体再生壁的观察。 4、光照(2000—2500Lux)能促使原生质体再生细胞壁,含有蔗糖(W/V,1％)的培养液有助于原生质体再生细胞壁。 5、分离的裙带菜原生质体,经培养,已能长成幼体。  相似文献