植物激素对海带配子体克隆附着的影响   总被引：3，自引：0，他引：3  

韩宝芹  崔竞进  刘涛  王霖 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2000,30(4)

实验研究 2 ,4 - D、KT、IAA、NAA四种植物激素对海带配子体克隆附着的影响。结果表明 :2 ,4 - D对附着有较明显的促附着作用 ,最有效浓度为 2 .5mg/L 和 5mg/L,其 4 h的附着率分别是对照的 2 .79倍和 2 .95倍 ;KT的作用较复杂 ,在浓度为 1mg/L 时 ,对附着有明显的促进作用 ,其 4 h的附着率是对照的 2 .3倍 ;IAA对配子体附着没有明显的促进或抑制作用 ;NAA对附着有抑制作用 ,浓度越高 ,抑制作用越强。  相似文献   

一株赤潮甲藻转录单元内间隔区(ITS)和5.8S rDNA序列的克隆     

张宝玉  王广策  张炎  吕颂辉  齐雨藻  邹景忠  曾呈奎 《海洋科学》2004,28(12):49-53

  相似文献   

红螯螯虾网格蛋白轻链的克隆及制备抗体的检测          下载免费PDF全文

黄家骏  李钫  杨丰 《应用海洋学学报》2016,35(2):205-210

网格蛋白为三脚蛋白复合体,其介导的内吞作用是病毒侵染细胞的常用途径之一.而对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是对虾养殖业的主要病原,为了研究分析WSSV的侵染机制及进入宿主细胞的途径,在本研究中,克隆得到红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)网格蛋白轻链的c DNA全长,并将其命名为Cq CLC(Genbank登录号为KR075008).进化树分析表明,其与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)的网格蛋白轻链进化距离较近.此外,在其蛋白序列中选择抗原性较好的片段合成多肽,并以此制备单克隆抗体,而后经免疫荧光和western blot检测从中筛选出具有特异性的抗体,为进一步对WSSV侵染虾细胞机制及入胞途径的研究奠定了基础.  相似文献   

钝顶螺旋藻基因组质粒文库的构建及其在获得功能基因上的应用     

田李  张晓雯  秦松 《海洋科学》2008,32(6):55-60

利用改良的SDS法提取钝顶螺旋藻基因组DNA,经Sau3AI酶切,回收1～2kb大小的片段,与BamHI（Sau3AI的同尾酶）酶切并去磷酸化后的pBR322质粒载体相连接,转入大肠杆菌（Escherichia coli）Top10细胞,构建了螺旋藻基因组质粒文库。根据pBR322载体上多克隆位点两侧序列设计锚定引物,根据丝状蓝藻丝氨酸／苏氨酸激酶（STK）保守序列设计简并引物,以螺旋藻质粒文库为模板,“巢式”扩增出了STK基因部分序列。螺旋藻基因组质粒文库的构建为功能基因研究提供了极大方便。  相似文献   

Cloning, expressing, and hemolysis of tdh, trh and tlh genes of Vibrio parahaemolyticus   总被引：1，自引：0，他引：1  

Yonggang Zhao  Xiaoqian Tang  Wenbin Zhan 《中国海洋大学学报(英文版)》2011,10(3):275-279

Vibrio parahaemolyticus (VP) is one of the pathogenic vibrios endangering net-cage cultured Pseudosciaena crocea,Fennerpenaeus chinensis, and shellfish in coastal areas of China. Several types of hemolysins produced by Vp have been characterized as major virulence factors.They are thermostable direct hemolysin (TDH),TDH-related hemolysin (TRH) and thermolabile hemolysin (TLH). In this study, we cloned tdh, trh, and tlh genes from the genome DNA of VP by polymerase chain reaction (PCR).We ligated the three genes into prokaryotic expression vector pET-28a (+),and transformed the recombinant plasmids into Es-cherichia coli BL21 (DE3). The expression of recombinant proteins was induced by isopropyl-β-D-thiogalacto-pyranoside (IPTG). The recombinant proteins were expressed in a form of inclusion bodies and thus purified with Ni-NTA affinity chromatography. Western blotting results showed that recombinant proteins,TDH, TRH and TLH, could be recognized by rabbit anti-VP serum. The three purified proteins were renatured by gradient dialysis.The renatured proteins exhibited hemolytic activity except for TLH in the presence of phosphatidylcholine. These results not only are helpful for better understanding these genes’ functions under a single factor level, but also provide evidence for VP vaccine engineering.  相似文献   

红笛鲷α-珠蛋白和β-珠蛋白基因的克隆及序列分析     

张新中  鲁义善  吴灶和  简纪常 《广东海洋大学学报》2011,31(3):1-6

应用已知的标签序列通过RACE-PCR和RT-PCR方法成功克隆红笛鲷(Lutjanus sanguineus)α-珠蛋白和β-珠蛋白基因的全长cDNA序列。α-珠蛋白和β-珠蛋白基因的cDNA全长分别为560和563 bp,开放阅读框分别为429和444 bp,各编码143和148个氨基酸,理论相对分子质量分别为15690和16400,理论等电点为7.79和6.61。氨基酸序列BLAST结果表明,红笛鲷α-珠蛋白基因和β-珠蛋白基因编码的氨基酸序列与其他鱼类的相似性分别在59%~79%和55%~80%之间。用邻接法(Neighbor-Joining)构建的α-珠蛋白基因和β-珠蛋白基因的系统发育树表明,红笛鲷与真鲷(Pagrus major)、金头鲷(Sparus aurata)和鰤(Seriola quinqueradiata)等亲缘关系较近。  相似文献   

承德地区两温泉中古细菌基因型多样性分析     

郝春博  张丽娜  李思远  周训  冯传平  方斌 《现代地质》2011,25(6):1207-1213

通过构建16S rDNA克隆文库,对承德地区两个不同温度的温泉中古细菌的基因型多样性进行了分子生态学研究。结果表明:山湾子温泉(A12)74.5℃热水中的古细菌主要分属泉古菌门(Crenarchaeota)和广古菌门(Euryarchaeota)两个门;七家温泉(A14)61.4℃热水中的古细菌则只属于泉古菌门,没有广古菌门微生物的分布。样品A12中的古细菌序列只可分为3种基因型,而A14中的古细菌序列可分为10种基因型。古细菌多样性的差异表明,温度是影响温泉中古细菌多样性水平的重要因素。样品A12中古细菌群落具有厌氧发酵乙酸产甲烷的生理功能,而A14中大多数古细菌均与氨氧化古菌有密切的亲缘关系,其主要生理功能为好氧氨氧化。  相似文献   

香鱼Apo-14基因的克隆、序列分析及其mRNA表达与盐度适应性的关系   总被引：1，自引：0，他引：1  

曹霄  陈炯  史雨红  陆新江 《台湾海峡》2011,30(2):203-209

14 kDa载脂蛋白（Apo-14）是鱼类一种特有的载脂蛋白,是鱼类高密度脂蛋白（HDLs）的重要成分,其生物学功能目前还不明确.本研究采用简并引物,从香鱼（Plecoglossus altivelis）肝脏cDNA文库中筛选香鱼Apo-14基因,该基因cDNA序列全长905个核苷酸,开放阅读框编码一个有144个氨基酸,分子量约为15.9 kDa的蛋白.香鱼Apo-14基因mRNA主要在香鱼肝脏中表达,在肠、肾和鳃中也有少量表达.同源性分析揭示,香鱼Apo-14与已知鱼类中虹鳟（Oncorhynchus mykiss）Apo-14最相似,氨基酸序列同源性为70%.qRT-PCR表明,咸淡水处理组（盐度为10）的肝、肠、肾、鳃中,该基因mRNA均比淡水处理组（盐度为0）明显下调（p〈0.05）,揭示载脂蛋白Apo-14可能与盐度适应相关.  相似文献   

牙鲆F₁代近交系、雌核发育系的建立及遗传检测   总被引：2，自引：0，他引：2  

田永胜  汪娣  王磊  苗贵东  邓寒  陈松林 《海洋学报》2011,33(3):114-123

在牙鲆育种中基于构建的大量家系,已经筛选出生长快成活率高的F₁代家系0719,0750和0751,为了使其优良性状进一步纯化,采集以上3个优良家系中成熟个体的精子和卵子,分别利用家系内兄妹近交和鲈鱼冷冻精子诱导雌核发育的方式,构建了近交系3个、雌核发育系7个,在其生长至127 d和190 d时,测定体长和体重两个性状,并利用方差分析、Student-Newman-Keuls多重比较及绝对增重比较等法对两个性状进行分析,发现0751的雌核发育系较其他近交系和雌核发育系生长更快(P＜0.05)。利用倍性分析仪对0751近交系和雌核发育系的染色体倍性进行分析。结果显示近交系和雌核发育系分别在G₀-G₁期和G₂-M期DNA 相对含量相近,G₀-G₁期DNA指数均为1.000,都具有二倍体的特点。利用筛选的14对具有多态性的微卫星引物分别对近交系和雌核发育系的遗传特征进行检测,发现近交系和雌核发育的等位基因数(N_a)分别为2.214 3和2.000 0,有效等位基因数(N_e)分别为2.082 9和1.936 9,观测杂合度(H_o)分别为0.564 2和0.413 8(P＜0.05),期望杂合度(H_e)分别为0.515 4和0.490 1,遗传杂合度(Ave_Het)分别为0.506 6和0.482 8,多态信息含量(PIC)分别为0.403和0.366,雌核发育系的遗传指数均低于近交系。除EKOP-E1-In,EKOP17-Li,EKOP-E1-Ey 3个位点仅在近交系中为高度多态,其他位点在两个系中均为中度多态。近交系和雌核发育系的遗传偏离指数(d)分别为0.091 5和-0.157 3,反映了近交系杂合子的比例远高于理论上的数值,纯合子缺失;雌核发育系杂合子缺失,纯合子比例高。利用雌核发育较近交方式更有利于基因的纯合,在牙鲆育种中具有较大的应用价值。  相似文献   

大型海藻无性系微球体构建和反应器培养研究   总被引：2，自引：0，他引：2       下载免费PDF全文

王金霞  李爱芬  周百成 《海洋科学》2011,35(2):17-21

利用大型海藻细胞的全能性获得了蜈蚣藻(Grateloupia filicina)、多管藻(Polysiphonia urceolata)和孔石莼(Ulva pertusa Kjellm)的无性系材料,在此基础上分别构建了绒球状微球体、网状微球体和簇生状微球体3种微球体形式,这种微球体形式适合于大型海藻的生物反应器高密度...  相似文献