太平洋牡蛎内切葡聚糖酶基因的克隆、序列特性和表达分析     

刘昌海  李琪  孔令锋 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2012,(Z1):87-93

内切葡聚糖酶是一种重要的纤维素酶,在纤维素水解过程中起到重要作用。本实验利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆获得了太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)内切葡聚糖酶基因,并对其基因结构和系统进化进行了分析。内切葡聚糖酶cDNA全长802bp,开放阅读框架630bp,编码209个氨基酸。基因组DNA全长505 6bp,含有两段内含子长度分别为205 3和231 3bp。cDNA具有与已发现的内切葡聚糖酶基因相同的保守区结构和功能域,并且与其他已知贝类的内切葡聚糖酶有较高的同源性。利用RT-PCR方法研究了该基因在太平洋牡蛎消化腺、外套膜、鳃、肌肉、性腺和唇瓣组织中的表达,发现内切葡聚糖酶基因仅在消化腺中表达,而在其他组织中没有表达。  相似文献   

太平洋牡蛎雄核发育卵中核行为的细胞学观察     

袁媛  李琪  于瑞海 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2005,35(6):967-972

利用荧光显微镜观察太平洋牡蛎正常卵子与雄核发育卵子在受精过程、减数分裂和卵裂早期中的核相变化。雄核发育单倍体是将强度为2.8mW.cm-2.s-1的紫外线照射30s的卵子与正常精子受精后得到的。结果表明,尽管紫外线照射并没有影响卵子的成熟分裂及雌性、雄性原核的形成,但使它们的发生过程滞后。在第1卵裂中期,雄核发育卵子中雌性原核并不像雄性原核一样形成染色体,而是形成1个浓缩的染色质小体(DCB)。第1卵裂后期,DCB不参与核分裂。第1卵裂结束时,DCB位于2个分裂球其中之一的细胞质内或在赤道板处被分割成2部分。实验结果首次提供了太平洋牡蛎雄核发育的细胞学证据。  相似文献   

秘鲁外海茎柔鱼渔场分布与表温及表温距平值关系的初步探讨   总被引：4，自引：0，他引：4  

胡振明  陈新军 《海洋湖沼通报》2008,(4)

根据2006年6~11月我国远洋船队秘鲁茎柔鱼生产统计及其表温(SST)、表温距平值(SSTA)数据,利用GIS软件ArcGIS9.0,对各月平均日产量(CPUE)和SST、SSTA关系的分布图进行绘制并分析,计算作业渔场重心。结果表明,6~8月的产量和CPUE比其他月份高。6~11月作业渔场在80°W~85°W,10°S~15°S,渔场重心在81°W~84°W,11°S~14°S。产量主要集中在12°~14°S海域,约占年总产量的72.72%,与2004-2005年有较大差异。6月作业渔场的SST为21~23℃,7、8月分别为19~21℃和18~20℃,9~11月为18~21℃。6月作业渔场的SSTA为0.1~0.2℃,7、8月分别为0.5~0.7℃,9~11月分别为0.2~0.6℃、1.0~1.4℃和0.4~0.7℃。研究认为,茎柔鱼渔场分布与SST、SSTA关系密切,可作为寻找中心渔场的海洋环境指标。  相似文献   

四倍体与二倍体太平洋牡蛎离体精子的存活能力比较     

施坤涛  王昭萍  于瑞海 《海洋科学》2008,32(4):52-56

在不同海水温度和不同精子密度条件下对四倍体(4n)与二倍体(2n)太平洋牡蛎(Crassostrea gigasThunberg)离体精子的存活能力进行了比较.结果表明,四倍体与二倍体太平洋牡蛎精子的存活时间均随水温的升高和密度的降低而缩短,四倍体牡蛎精子的存活能力低于二倍体.四倍体牡蛎精子在海水温度10℃可存活8 h,在28℃仅存活2 h;二倍体牡蛎精子在10℃可存活12 h,在28℃仅存活4 h.四倍体牡蛎精子在较高密度(6.4×10<'7>个/Ml)下可存活8 h,较低密度(2.0×106个/Ml)下低于1 h;在与四倍体牡蛎精子相同的高、低密度下,二倍体存活时间分别超过10 h和1 h.  相似文献   

实时定量RT-PCR方法检测太平洋牡蛎中的诺沃克样病毒   总被引：1，自引：0，他引：1  

岳志芹  汪俊  梁成珠  雷质文  高宏伟  徐彪  朱来华  薛长湖 《海洋科学》2008,32(8):1-4

建立了Taqman 实时定量RT-PCR方法检测诺沃克样病毒(Norwalk-like Virus,NLV)的方法,并对中国的牡蛎样品进行了分析.选取GⅡ型NLV的RNA聚合酶区域,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针,建立了定量RT-PCR反应体系.将含有NLV扩增片段的质粒10倍梯度稀释,作为标准品进行反应以确定检测灵敏度并制备标准曲线.结果表明,质粒密度在6×106,6×105,6×104,6×103,6×102,6×101,6个拷贝之间,共7个数量级的范围内,定量RT-PCR反应都有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为6个拷贝.制备的标准曲线中,病毒拷贝数(X)与Ct值的关系为Ct = -3.36lg X 37.11,相关系数R2=0.998.对中国37批太平洋牡蛎(Crassostrea gigas Thunberg)样品进行了定量检测,有6批样品为阳性,并根据标准曲线测定了NLV的含量.  相似文献   

杂交三倍体太平洋牡蛎群体的染色体数目组成初步观察     

姜波  王昭萍  于瑞海  李慷均  辛荣 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2007,37(2):255-258

探讨多倍体牡蛎的遗传基础,通过染色体计数法对2龄杂交三倍体太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)群体的染色体数目组成进行了分析,发现在80个具良好中期分裂相的牡蛎中,有56个三倍体(70.0%);12个非整倍体(15.0%),4个2n/3n嵌合体(5.0%);8个二倍体(10.0%)。12个非整倍体中包括9个29条染色体的亚三倍体(3n-1)和3个31条染色体的超三倍体(3n 1)。非整倍体与三倍体的生长差异不明显(P>0.05)。可能由于数量较少的原因,嵌合体和二倍体的生长没有表现明显生长滞后(P>0.05)。  相似文献   

Inheritance mode of microsatellite loci and their use for kinship analysis in the Pacific oyster （Crassostrea gigas）     

李琪  郑小东  于瑞海 《中国海洋湖沼学报》2008,26(3)

Five full-sib families of the Pacific oyster(Crassostrea gigas) larvae were used to study the mode of inheritance at eight microsatellite loci,and the feasibility of these markers for kinship estimate was also examined.All eight microsatellite loci were compatible with Mendelian inheritance.Neither evidence of sex-linked barriers to transmission nor evidence of major barriers to fertilization between gametes from the parents was shown.Three of the eight loci showed the presence of null alleles in four families,demonstrating the need to conduct comprehensive species-specific inheritance studies for microsatellite loci used in population genetic studies.Although the null allele heterozygotes were considered as homozygotes in the calculation of genetic distance,offspring from five full-sib families were unambiguously discriminated in the neighbor-joining dendrogram.This result indicates that the microsatellite markers may be capable of discriminating between related and unrelated oyster larvae in the absence of pedigree information,and is applicable to the investigation of the effective number of parents contributing to the hatchery population of the Pacific oyster.  相似文献   

Antiviral active peptide from oyster   总被引：1，自引：0，他引：1  

曾名勇  崔文萱  赵元  刘尊英  董士远  郭瑶 《中国海洋湖沼学报》2008,26(3):307-312

An active peptide against herpes virus was isolated from the enzymic hydrolysate of oyster （Crassostrea gigas） and purified with the definite direction hydrolysis technique in the order of alcalase and bromelin. The hydrolysate was fractioned into four ranges of molecular weight （〉10 kDa, 10-5 kDa, 5-1 kDa and 〈1 kDa） using ultrafiltration membranes and dialysis. The fraction of 10-5 kDa was purified using consecutive chromatographic methods including DEAE Sephadex A-25 column, Sephadex G-25 column, and high performance liquid chromatogram （HPLC） by activity-guided isolation. The antiviral effect of the obtained peptide on herpetic virus was investigated in Vero cells by observing cytopathic effect （CPE）. The result shows that the peptide has high inhibitory activity on herpetic virus.  相似文献   

双酚A暴露对不同黑色素含量长牡蛎的影响研究     

姜秋云  魏磊  王晓娜  陈曼  张镇  孙同振  于文超  何成  宋宏策  李玲玲  王晓通 《海洋通报》2019,38(3)

长牡蛎的壳色有很多种,其中壳色较深个体(黑壳)比较浅个体(白壳)的外套膜中含有更多的黑色素。本研究采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS/MS)测定天然海水中白壳与黑壳长牡蛎外套膜双酚A (BPA)含量,发现黑壳长牡蛎外套膜中的BPA含量较白壳长牡蛎低(P0.05)。由于黑色素合成过程中的关键——酶酪氨酸酶是一种酚氧化酶,可以通过对氧化酚类或芳胺类等多种底物的氧化起催化作用,推测其在BPA等酚类毒物的降解中也发挥重要作用。为了进一步研究不同黑色素含量牡蛎对BPA降解能力和对BPA损伤抵抗能力的差异,本实验进行了浓度为1 mg/L,1.5 mg/L和2 mg/L的BPA亚慢性暴露实验:通过对暴露后长牡蛎外套膜组织中BPA含量分析发现,白壳与黑壳长牡蛎外套膜中BPA含量均随着暴露浓度的升高而升高,且3种浓度BPA亚慢性暴露后,黑壳长牡蛎外套膜BPA含量均低于白壳长牡蛎,但是差异不显著(P0.05)。采用3种浓度BPA亚慢性暴露后,黑壳长牡蛎外套膜组织中活性氧(ROS)荧光值均显著低于白壳长牡蛎(P0.01)。通过对外套膜组织学观察发现,2 mg/L的高浓度BPA暴露使白壳长牡蛎外套膜组织发生了明显的病理变化,黑壳长牡蛎外套膜未发生明显的病理变化。可见,黑壳长牡蛎对BPA暴露可能具有更强的抵抗能力。  相似文献   

长牡蛎贝壳损伤后的再固着能力初探     

胡乐彬  范妮妮  蔡帅  王晓梅  郑言鑫  魏磊  黄宝玉  刘雅琼  韩怡静  王晓娜  孙宗哲  张美溦  王晓通 《海洋通报》2023,(2):173-181

牡蛎是重要的养殖贝类,营固着生活,能聚集形成牡蛎礁,在海洋生态系统中发挥着重要作用。本研究以成体长牡蛎为研究对象,将牡蛎从附着基上剥离下来,去掉其左壳腹缘端的表面鳞片并打磨平整,露出棱柱层,将其紧密粘合于水泥砖、橡胶片、磨砂玻璃三种固着基表面,背缘端用水泥固定,观察并记录牡蛎贝壳的修复及再固着情况。结果发现：左壳损伤后,在贝壳边缘会生长出新的透明壳膜,此时壳膜虽然会紧靠固着基表面生长,但却不能再次固着;将牡蛎从固着基上剥离下来,在三种固着基表面均未发现有“附着斑”形成。因此,为了进一步研究左壳损伤后贝壳修复的分子机制以及不能再次固着的原因,对长牡蛎左壳损伤后的外套膜转录组进行了分析,发现在损伤后的第1 d、第5 d、第9 d、第13 d、第17 d和第21 d,左侧外套膜中差异上调表达的基因显著富集在TGF-β等信号通路,而下调表达的基因显著富集在对温度以及对非生物刺激反应相关通路。通过基因表达数据,还发现壳损伤后Cgfmp、CgTyr、EGF-P1等与黏附相关的基因呈下调表达,这可能是导致成体长牡蛎无法再次固着的原因。长牡蛎贝壳损伤后再固着能力的研究,为贝类生物矿化、附着等机制的研究...  相似文献