牙鲆(Paralichthys olivaceus)β诺达病毒衣壳蛋白重组表达及复性条件优化 组表达及复性条件优化     

蒋嫣冉  张亦陈  刘逸尘  耿绪云  孙金生 《海洋与湖沼》2014,45(2):370-374

β诺达病毒利用其缺乏校正功能的聚合酶进行基因组复制, 易导致突变, 因而具有广泛的宿主感染性, 而且可引发致死率极高的病毒性神经坏死症, 需要有针对性地研究检测及防御方法。本研究以感染牙鲆(Paralichthys olivaceus)的β诺达病毒为对象, 利用引物设计, 将His标签编码序列连接到完整病毒衣壳蛋白C端, 构建原核表达载体; 采用SDS-PAGE及质谱对表达产物进行分离和鉴定; 重组衣壳蛋白经镍离子亲和柱纯化后进行复性条件的正交优化。结果表明4个肽段经质谱鉴 定与预期一致; 纯化产物产量可达36mg/L; 4°C条件下, 复性缓冲液中尿素和PBS的最适浓度为0.8mol/L和0.05mol/L。本研究建立的制备方案可为研制相关疫苗以及开发针对该病毒的快速检测产品等提供有价值的参考。  相似文献   

三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)胞内氯离子通道蛋白基因克隆及其表达分析     

王渝  吕建建  刘萍  高保全  李健  陈萍 《海洋与湖沼》2014,45(6):1359-1366

本研究克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)胞内氯离子通道蛋白基因,命名为Pt CLIC。该基因c DNA全长2000bp,5’和3’非编码区(UTR)长分别为76bp和1162bp,开放阅读框长762bp,推测编码253个氨基酸,预测分子量为29.2k Da,理论等电点为5.93。生物信息学分析表明,Pt CLIC基因中未发现跨膜结构域,属于不稳定蛋白;同源性分析表明,Pt CLIC基因编码的氨基酸序列与蚤状溞(Daphnia pulex)CLIC基因的同源性高达83%;系统进化分析表明,三疣梭子蟹与拟穴青蟹首先聚为一支;实时荧光定量RT-PCR分析表明,Pt CLIC基因在选取的所有组织中均有表达,在肝胰腺中的相对表达量最高,且显著高于其它组织(P0.05)。低盐度胁迫显著改变了Pt CLIC基因在三疣梭子蟹鳃和肝胰腺中的表达模式,整体呈先上调后下调的趋势,并发现该基因在低盐耐受和低盐敏感家系中的表达规律差异显著。研究结果表明Pt CLIC基因在三疣梭子蟹渗透压调节中发挥重要作用,可辅助三疣梭子蟹耐低盐品系的选育。  相似文献   

三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)CYP2基因的cDNA克隆及表达分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

冯艳艳  李健  张德宁  刘萍  葛倩倩  吕建建  高保全 《海洋与湖沼》2014,45(5):998-1005

通过RT-PCR及Smart?TM Race技术,首次克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)CYP2基因cDNA全长序列。该基因cDNA全长1662bp,编码一个由492个氨基酸组成的多肽,预测理论等电点为6.348,分子量大小为56.68kD。氨基酸序列中含有CYP基因家族所特有的K螺旋保守序列(ExxR)和血红素结合区(FxxGxxxCxG)。经氨基酸序列比对及系统进化树分析发现,与岸蟹(Carcinus maenas)的同源性最高,达到75%。实时荧光定量PCR结果表明,CYP2基因在肝胰腺、鳃、肌肉、血淋巴、心脏和眼柄中均有分布,在肝胰腺中表达量最高。肌肉注射磺胺嘧啶后,三疣梭子蟹高、中、低三剂量组CYP2基因表达较对照组都有上调,并具有时间差异性,低剂量组表达量逐渐降低,趋于对照组,中剂量组和高剂量组表达量先升高后降低,6h后同一时间点,均是高剂量组表达最高,低剂量组最低。表明磺胺嘧啶可诱导三疣梭子蟹CYP2基因,CYP2基因可能参与三疣梭子蟹的药物代谢反应。  相似文献   

牙鲆NPY的体外表达及体内检测     

王倩  谭训刚  孙威  尤锋  张培军 《海洋科学》2014,38(4):15-19

神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)被普遍认为是一种重要的促食因子,在调节鱼类的摄食行为方面起着至关重要的作用。为进一步研究牙鲆NPY蛋白的生物学功能,作者克隆了牙鲆NPY成熟肽序列(m-NPY)及含有信号肽的全长序列(f-NPY),利用原核表达系统分别进行体外重组表达,筛选出诱导剂IPTG最佳诱导浓度为0.8 mmol/L及最佳诱导时间3 h;此外,根据牙鲆NPY第49-64位氨基酸序列制备了多克隆抗体并通过Western blot验证该多抗能够有效检验重组NPY及牙鲆体内NPY的表达。研究结果为研究重组牙鲆NPY蛋白在牙鲆水产养殖产业中的应用及检测提供了依据。  相似文献   

位置地图情境研究     

齐晓飞  王光霞  周转向  孙卫新 《测绘工程》2014,23(11):11-15

随着位置服务、位置地图的兴起,情境作为一种研究客观世界与人类之间关系的抽象工具,已被逐渐地引入到移动地图服务中来.鉴于目前情境理论在地图的应用过程中存在基本概念不清、主要研究内容不明确的问题,重点剖析了位置地图情境的内涵,并从情境建模、情境匹配、情境推理和情境表达四方面,开展了位置地图情境的相关技术研究.  相似文献   

航海英语语义探源     

蒋栋元 《广东海洋大学学报》2004,24(5):84-88

在世界航海过程中 ,人们创造了众多语言词汇 ,丰富了人类语言。英语中也有许多与航海有关的词语 ,它们语义的产生有其特定的背景 ,在使用过程中被赋予新的含义 ,至今广泛使用。  相似文献   

地图的信息表达与美学思维     

缪坤  郭健  李爱光  阚映红  王卉 《测绘与空间地理信息》2015,(1):185-188

长期以来人们偏重于地图的技术研究,导致地图的艺术研究进程落后于技术研究进程。近几年这种情况虽有改善,但对于地图的美学问题研究还是相对偏少。本文从地图的信息表达与美学思维角度出发,从地图的语言、技术、文化及创新4个方面探讨了地图与美学思维融合的问题,并提出了地图学与美学相结合的地图美学论,以期得到适合地图的美学设计。  相似文献   

乌岩岭国家级自然保护区动态监测系统设计与实现     

刘克  雷兵  甘宇航  张晓  胡轶之 《测绘与空间地理信息》2015,(1):3-6,9

面向地理国情监测,以自然保护区监测为突破口,分析自然保护区监测内容,研究自然保护区多源异构数据整合、专题信息建模、多时态信息动态可视化等关键技术。在此基础上,以乌岩岭国家级自然保护区为例,构建保护区多层次、多尺度的基础空间数据库和专题数据库,实现保护区动态监测系统,形成动态标注、动态漫游、动态矢量等多种动态表达方式。该系统的建立为自然保护区监测和管理提供了有力的技术支撑,研究所形成的监测内容、关键技术和动态表达方式对地理国情监测具有一定的参考借鉴意义。  相似文献   

AN ACCURATE MODEL FOR CALCULATING CORRECTION OF PATH FLEXURE OF SATELLITE SIGNALS     

Li Yanxing  Hu Xinkang  Shuai Ping  Zhang Zhongfu 《大地测量与地球动力学》2003,23(Z1)

1　IntroductionTherefractionoflight electronicsignalpropa gatinginatmospherehasbeenstudiedbymanysci entistsandsomemodelofatmosphericrefractioncorreetionhaveheenestablished ,includingHopfieldSaastamoinen,DavisandMarinimodels[1 ] .Butthesemodelscanbeusedonlytocalculatethecorrec tionfortherefractionduetoatmosphericdensityvariation ,whilethecorrectionfortherefractionduetothesignalpathflexurecannotbecalculated .Hop fieldhasestimatedsignalpathflexureerrorbythemethodofraytracing[2 ] ,butastrictcorr…  相似文献   

On the character of distribution of chemical elements in nature     

Jozef Guba 《Mathematical Geology》1986,18(4):429-432

Distribution of chemical elements in nature is controlled by the general physical-chemical state of natural processes, a result of the effort to reach thermodynamic equilibrium. Natural processes, forming geologic objects (e.g., rocks, ores) usually do not reach total chemical equilibrium. This is reflected in distributions of chemical elements in nature. We recognize symmetric as well as asymmetric distributions. The question arises, what distribution in nature is most commonly followed? Evidently, this should be a distribution of chemical elements in thermodynamic equilibrium throughout the system, thus with maximum entropy. This paper notes that Gauss's normal distribution may be derived from statistic explanation of entropy as a function of contnt of chemical elements in a system with application of Einstein's formula.  相似文献