引物退火控制技术在差异表达基因克隆中的应用   总被引：4，自引：0，他引：4  

谢芳靖  张子平  林鹏  王艺磊 《海洋科学》2007,31(5):70-75

许多年以来,分离差异表达基因的方法仅限于差异筛选cDNA文库,直到1992年Liang等[1]发明了一种检测基因转录模式的方法,即mRNA差异显示技  相似文献   

乳糖诱导重组别藻蓝蛋白(rAPC)在大肠杆菌(Escherichia coli)中的表达     

唐志红  葛保胜  林凡  任育红  秦松 《海洋与湖沼》2006,37(6):524-528

采用廉价的乳糖替代IPTG诱导重组别藻蓝蛋白(rAPC)在大肠杆菌(Escherichiacoli)JM109中表达,对诱导产物表达的培养基、培养条件、诱导剂的浓度和诱导时机进行了优化,将优化条件用于5L自控发酵罐进行高密度培养。结果表明,对rAPC表达的条件进行优化后,乳糖诱导rAPC的表达率可达26.8%,与IPTG的诱导结果接近;在高密度培养中,OD600最大达21.8。研究结果可为乳糖替代IPTG大规模生产rAPC奠定基础。  相似文献   

病毒膜蛋白及其表达和纯化技术的研究进展     

解飞霞  宋晓玲  黄倢  徐怀恕 《海洋湖沼通报》2002,(4):76-82

病毒囊膜是包膜病毒除核衣壳外的另一主要成分。它主要由多种蛋白质构成，称为膜蛋白，膜蛋白以单聚体，二聚体，三聚体，甚至更多的聚合体的形式存在，具有中和抗体，与靶细胞受体结合，凝集红细胞，诱导细胞融合等多种功能，膜蛋白可采用将其基因整合入载体，并在昆虫细胞，哺乳细胞或细菌中获得体外表达，膜蛋白可在去污剂的作用下形成蛋白质－脂－去污剂的复合物而被溶解，其中去污剂的临界微团浓度，亲水物－亲脂物平衡值，荷电、紫外穿透性等是选择合适去污剂的主要参考因子，溶解后的膜蛋白多利用聚丙烯酰胺凝胶电泳、凝胶过滤层析，离子交换层析，亲和层析，高效液相层析等技术并结合梯度离心；分级沉淀等进行分离、纯化。  相似文献   

6-磷酸山梨醇脱氢酶(gutD)基因克隆、测序和表达     

陈启伟  刘广发  邱凤英 《台湾海峡》2004,23(3):314-317

本研究根据6-磷酸山梨醇脱氢酶基因(gutD)两端序列设计引物，以假单胞杆菌(Pseudonmonas XM)的总DNA为模板通过PCR的方法克隆gutD基因并进行序列分析，将克隆得到的gutD基因与原核表达载体pBV220连接并转化大肠杆菌(Escherichia coli)JM101后检测其蛋白表达及菌株生长耐盐性。  相似文献   

0516号热带风暴过程分析     

李孟植 《海洋预报》2007,24(3):40-45

利用气象海洋数据资料和卫星遥感图片,分析研究了2005年第16号热带气旋"韦森特"(VICENTE)的特征,从最先的初始扰动到自身环流的分裂发展重组过程,以至当时周围相对应的大气环流,发现该热带气旋活动过程具有很多特性。对其移动过程进行的综合分析表明,只要存在合适距离等一定有利的条件,弱的两个涡旋之间完全可以发生强的作用力,高空辐散场的抽气作用对气旋的发展有极好的作用,所得的结论可对今后的预报提供一些启示和参考。  相似文献   

埕岛油田数据基础重组及开发应用     

孔庆慈  于定勇 《海岸工程》2003,22(1):32-40

从数据管理及后期应用的角度提出了数据平台的要领，讨论了该数据平台的物理结构、逻辑结构，在分类与组织的基础上给出了相应的数据字典。同时，还基于该平台探讨了测井曲线库及图形库的建设方法，并实现了具体功能。  相似文献   

脲酶固定化的研究及应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

彭虹旎  刘晨光  刘成圣  陈西广  孟祥红 《海洋科学》2003,27(6):38-41

脲酶(Urease)在自然界广泛存在,但实际应用的主要来源于豆类植物,如刀豆脲酶、黄豆脲酶等;脲酶可催化尿素水解产生CO_2和NH_3,反应速度10~4倍于无脲酶催化时此反应的速度。 脲酶 尿素+H_2O———→CO_2+NH_3 脲酶用途广泛,可用于医疗诊断,环境监测,  相似文献   

棉粕蛋白酶解物对异育银鲫(Carassius auratus gibelio)消化、生长和胰蛋白酶mRNA表达量的影响     

刘文斌  王恬 《海洋与湖沼》2006,37(6):568-574

以棉粕蛋白为酶解底物,用枯草杆菌蛋白酶对其进行酶解,以酶解产物1.5%和3.0%两个梯度等量替代鱼饲料配方中棉粕,在室内流水养殖系统中喂养异育银鲫鱼种[体重为(30±2)g]65天。测定鱼的生长、营养物质表观消化率、消化蛋白酶活性及肝胰脏中胰蛋白酶mRNA表达水平等指标。结果表明,添加1.5%和3.0%棉粕酶解产物的鱼在饲养35天后的特定增长率(SGR)分别比对照组高32.5%和56.7%,且差异显著(P<0.05);在饲养65天后,两组特定增长率分别比对照组高8.0%和21.0%,且差异极显著(P<0.01),肝胰脏中胰蛋白酶mRNA表达水平也随棉粕酶解产物添加梯度提高而相应提高,表明鱼的生长与消化蛋白酶mRNA表达水平相关。同时棉粕蛋白酶解物对肠道蛋白酶的活性和营养物质表观消化率都有促进作用,而棉粕蛋白酶解物对鱼肌肉成分并没有改变,这也表明棉粕蛋白酶解物在促进鱼生长、内源酶活性同时并未降低鱼的品质。  相似文献   

新生相形成的模拟实验研究     

雍国平  陈邦林 《海洋科学》1996,20(2):37-39

通过模拟实验制备了硅酸盐类不溶性固体，从Ｘ射线衍射特征和红外光谱特征两方面看，制得的硅酸盐类与河口新生相成分，结构相似，表明铁水解成的β－ＦｅＯＯＨ胶体吸附Ｓｉ，Ａｌ，Ｍｇ，Ｋ等元素，经结构重组可形成硅酸盐矿物，这可能是河口体系新生相的形成原因。  相似文献   

石鲽同工酶的组织表达和群体遗传变异研究     

徐建鹏  张全启齐洁 王志刚 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2007,37(2):265-265

采用水平淀粉凝胶电泳技术，研究了石鲽（Kareius bicoloratus）同工酶的组织表达和群体遗传变异。结果表明，14种同工酶共记录31个基因座位，各同工酶的表达均有明显的组织差异，基因座位SOD^＊，GDH^＊，G3PDH～2^＊和ADH-2^＊仅在肝脏中表达，SDH-1^＊，MDH-1。和ADH-1。仅在肌肉中表达，LDH—B^＊和LDH—C^＊仅在眼睛中表达，MDH-2^＊，GPI-3^＊和SDH-2^＊在所有检测的组织中均有表达，其余酶的表达则表现出不同程度的组织差异，与各组织完成特有的生化代谢活动有关。选取肌肉和肝脏对中国青岛、威海石鲽2个地理自然群体的遗传结构和遗传分化进行研究。青岛群体和威海群体的多态座位比率分别为29．17％和25．00％，观察杂合度分别为0．028±0．014和0．040±0．019；期望杂合度分别为0．039±0．017和0．052±0．022。结果表明，两群体间的群体分化度和遗传距离分别为0．012和0．0011，表明石鲽群体间的遗传分化较低。与其它鲽形目鱼类相比，石鲽群体的多态座位比率和平均杂合度均处于中间水平。  相似文献