cDNA-AFLP分析方法在中国对虾中的应用     

李吉涛  李健  陈萍  刘萍  刘博  何玉英  王清印 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2009,39(6)

将cDNA扩增片段长度多态性(cDNA-AFLP)分析方法在中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)中进行了应用,旨在建立1套适于中国对虾研究的cDNA-AFLP反应体系.对总RNA提取、cDNA双链合成、双酶切反应、连接反应、预扩增反应、选择性扩增反应和银染等步骤进行了优化和改进.结果表明,用EcoR Ⅰ/Mse Ⅰ双酶切、核心序列加3个选择性碱基的选择性扩增引物、1∶1摩尔比的EcoR Ⅰ端与Mse Ⅰ端选择性扩增引物比和12 μL选择性扩增体积,可得到十分稳定的结果,所得产物经电泳和银染后可获得条带清晰的图像.该方法的建立为cDNA-AFLP技术在中国对虾功能基因组研究中的应用奠定了基础.  相似文献   

脊尾白虾C-型凝集素基因cDNA全长的克隆和表达分析     

王有昆  刘萍  李吉涛  李健 《海洋科学》2016,40(8):27-34

本研究利用本实验室构建的脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)血细胞c DNA文库中的C-型凝集素基因EST序列,采用c DNA末端快速扩增(rapid amplification of c DNA end,RACE)技术克隆获得脊尾白虾C-型凝集素基因c DNA全长,命名为Ec CTL。该基因全长1285 bp,包含1041 bp的开放阅读框,编码346个氨基酸组成的蛋白质,分子量为38.56 k Da,为甘露糖型凝集素。同源性分析表明,脊尾白虾Ec CTL基因氨基酸序列与秀丽白虾(Palaemon modestus)的同源性最高,达到91%。荧光定量PCR分析结果表明,Ec CTL基因在血细胞、肝胰腺、肌肉等组织中均有表达,其中在肝胰腺当中的相对表达量最高。感染鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)后6~12 h,脊尾白虾血细胞和肝胰腺中Ec CTL的表达量较对照组均显著增加(P0.05),且具有明显的时间差异性。本研究证明脊尾白虾C-型凝集素在其免疫反应中起到重要作用,为进一步探索脊尾白虾免疫系统打下基础。  相似文献   

仿刺参(Apostichopus japonicus) mtDNA三个基因片段的序列分析   总被引：10，自引：0，他引：10  

李颖  刘萍  孙慧玲  马甡  高天翔  王清印 《海洋与湖沼》2006,37(2):143-153

采用PCR技术对中国烟台、威海和莱州三个地点仿刺参的16S rRNA、COI、IrRNA-COI三个mtDNA基因片段进行了扩增和测序,分别得到了长度约为570bp、640bp和900bp的三段序列,分析了三个采样点样品的遗传多样性。结果表明,每段基因序列扩增均获得两种单倍型,已在Genbank中注册(注册号码:AY852278—AY852283)。通过比较,三个地点样品的序列差异不显著,无缺失、插入、颠换的现象,只有个别位点出现转换,其中16S rRNA序列最为保守,16S rRNA、COI、IrRNA-COI三段序列A T的平均含量为56·2%、59·2%、61·8%,均大于G C含量。三个采样点样品同源性为99·84%—99·96%。将获得的仿刺参DNA序列和Genbank中的来自东太平洋8个外群进行基因序列比较,结果发现,不同目、科的海参的序列差异显著。采用DNAsp统计了各类位点数;MEGA2·1分析了碱基组成和遗传距离,构建了系统树。系统树体现的分类关系与这些物种的形态学分类关系完全一致。  相似文献   

沸石在水产养殖中的应用概况   总被引：1，自引：2，他引：1  

李健  刘萍 《海洋科学》1996,20(4):39-40

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影像地图质量的多层次模糊综合评价方法研究     

罗胜  刘萍  何乔 《海洋测绘》2007,27(5):66-69

分析了影像地图质量的各级质量元素,并针对影像地图的多质量因素,且大部分因素无法用固定数学模型描述等特点,引入多层次模糊综合评价的方法进行综合评估,经实例证明此方法可行、有效。  相似文献   

中国对虾一种C型杆状病毒随机扩增多态性DNA分析   总被引：13，自引：1，他引：13  

孔杰  石拓  刘萍  韩玲玲  徐怀恕  相建海 《海洋与湖沼》1997,28(4):394-398

于１９９４年和１９９５两年的７月从青岛崂山上马镇养虾场中染病的中国地虾中分离纯化出一种Ｃ型杆状病毒。为建立中国对虾病毒的鉴别和检测技术，利用随机扩增多态性ＤＮＡ技术对电泳纯化的病毒ＤＮＡ进行分析和研究。将病虾匀浆、经差速离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得完整病毒粒子；从病毒中提取ＤＮＡ后再进行电泳纯化，收集长度完整，均一的病毒ＤＮＡ：在其他参数保持不变的情况下，对Ｏｐｅｒｏｎ生产的１０碱基随机引物Ｋ试  相似文献   

随钻801堵漏剂的性能及其机理     

彭振斌  刘萍 《地质与勘探》1992,28(3):55-58

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新生单体在中空发展成降雹单体的一次过程分析     

宋丽亚  朱玉民  刘萍 《沙漠与绿洲气象(新疆气象)》2003,26(6):23-25

根据2002年8月5日新疆昭苏盆地的雷达回波资料，对该雹云初始雷达回波的出现及演变过程的主要特征进行分析。  相似文献   

人影高炮常见故障及简便排除方法     

刘萍 《贵州气象》2005,29(2):43-44

根据从事人影高炮装备的维修和检测经验，总结出一些高炮常见故障和排除方法以及高炮保管与保养的简易办法。  相似文献   

矿业遗迹的开发和矿山公园的建设   总被引：1，自引：0，他引：1  

侯万荣  黄志强  陈小伍  刘萍  胡鸿飞 《西部资源》2005,(4)

矿业为国民经济发展提供了资源方面的保证,为我国工业化、城市化和农业现代化奠定了基础,推动了经济发展、社会进步和城市化进程。随着社会的发展,人们对生活质量要求的提高, 对自己周围环境的重视,加上可持续发展战略的提出,矿业城市因矿产资源开发造成的环境问题日益引起人们的关  相似文献