聚合酶链式反应在对虾病毒研究中的应用     

丁燏  郑莲 《海洋通报》2001,20(3):77-81

聚合酶链式反应是现代生物学领域一种非常重要的技术，本文介绍了这种技术在对虾病毒研究中的具体应用，包括病原检测、流行病学调查、寄生部位确定、同源性分析、DNA多态性分析、基因克隆与探针制备等。  相似文献   

五种植物提取液的抗鱼病菌和抗鱼病毒效应(英文)   总被引：1，自引：0，他引：1  

童裳亮  F.M.Hetrick  B.S.Roberson  A.Baya 《中国海洋大学学报(自然科学版)》1990,(2)

本文旨在探索用廉价的野生植物防治鱼病。所用的植物有牛繁缕(Stellaria aqu-atica),双花凤仙(Impatiens biflora),夜来香(Oenothera biennis),艾草(Artem-isia vulgaris)和忍冬(Lonicera japonica)。用作试验的鱼病菌共13种(18个菌株),分属于气单孢菌属、假单孢菌属、爱德华氏菌属、耶尔森氏菌属、弧菌属。所用的鱼病毒为传染性胰脏坏死病毒IPNV,传染性造血组织坏死病毒IHNV。上述病原微生物均获自美国马里兰大学微生物系。实验结果表明,五种植物提取液均有不同程度的抗鱼病菌作用,其中以牛繁缕的抗菌谱最广,作用力最强。忍冬、艾草、牛繁缕有抗鱼病毒作用。其中以忍冬的效果最好,它能抑制IPNV和IHNV。而艾草和牛繁缕只能抑制IHNV。  相似文献   

中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)血细胞中一氧化氮合成酶的鉴定及其在白斑综合症病毒感染过程中的变化   总被引：11，自引：0，他引：11  

姜国建  于仁诚  王云峰  颜天  周名江 《海洋与湖沼》2004,35(4):342-350

诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在生物机体免疫，特别在无脊椎动物免疫中的作用近来得到了广泛的关注，由其催化产生的一氧化氯(NO)除具有已知的神经传导、松弛平滑肌等功能外，还具有抗菌、抗病毒、抗寄生虫等作用。作者通过硝基四氯唑蓝(NBT)法和血细胞形态观察等方法，对中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)血细胞中存在的诱导型一氧化氮合成酶进行了初步鉴定。在此基础上，通过亚硝酸盐法和L-瓜氨酸法对比，研究了感染白斑综合症病毒(WSSV)后中国明对虾血细胞中一氧化氯合成酶的变化情况。结果显示，中国明对虾在感染WSSV后，iNOS活性在12h内有上升趋势，实验36h后酶活性显著下降，至60h后酶活性降至对照组的一半左右。同时，被脂多糖(LPS)诱导的一氧化氮合成酶活性与对照相比也有显著下降。与此对应的是，核酸探针斑点杂交法检测病毒的结果显示：实验36h后在对虾体内能够检测到白斑综合症病毒。对照组中国明对虾血细胞的iNOS在实验过程中基本保持稳定。这说明WSSV在感染中国明对虾初期可以诱导血细胞产生iNOS，但随着WSSV在中国明对虾体内的大量增殖及其对血细胞的破坏，使得iNOS活性显著降低，对虾也趋于死亡。因此，iNOS能够作为反映对虾在病毒感染过程中健康状况的有效指标。  相似文献   

冬季和春季长江口及其近海水域浮游病毒丰度的分析   总被引：7，自引：2，他引：7       下载免费PDF全文

白晓歌  汪岷  马晶晶  孙军  梁彦韬  乔倩 《海洋与湖沼》2007,38(4):367-372

采用荧光显微技术,对2006年长江口及近海水域20个站点的表层及10m层或潜水体冬、春两季的浮游病毒丰度进行了检测,对浮游病毒丰度在季节（冬、春两季）、水平分布和垂直分布上的变化进行了探讨.调查区浮游病毒丰度在冬、春季节上并无明显差异,但在水平分布上存在很大差异,河口区浮游病毒直接检测量（Virus Direct Count, VDC）达到10^7个/ml,近海水域VDC为10^6个/ml,河口区的浮游病毒丰度都明显高于近海水域病毒丰度 （P＜0.01）.在垂直分布上,冬、春两季长江口水域水深小于10m的站位,表层浮游病毒丰度与底层病毒丰度无明显差别,水深大于10m的站位,表层水样的浮游病毒丰度都高于10m水层病毒丰度,说明长江口浮游病毒的垂直分布与站位总水深有关.还通过比较各站点VDC与叶绿素a含量的数据,分析了二者之间的相关性：冬季浮游病毒丰度与叶绿素a含量成正相关性;春季浮游病毒丰度与叶绿素a含量成负相关性,但病毒丰度受叶绿素a含量的影响仅为10%-11%.  相似文献   

虾池的蟹类及其药物杀灭          下载免费PDF全文

黄国强  李德尚  董双林 《海洋科学》2003,27(5):69-72

对山东半岛南海岸3个地点虾池内的蟹类组成、分布和携带病毒的情况进行了调查,并用敌百虫和次氯酸钠对天津厚蟹(Helicana fridens)进行了杀灭试验。发现虾池内的蟹类组成相对简单,蟹洞分布 85％集中在水位线以上 100 cm至水位线下 30 cm区域内;敌百虫对天津厚蟹的 96 h半致死浓度 LTD_(50)(96 h)=1.25×10~(-6),96 h全部将天津厚蟹杀死的浓度为 2.75×10~(-6);次氯酸钠(以有效氯计)对天津厚蟹的 72 h半致死浓度为 LTD_(50)(72 h)=63.8×10~(-6),72 h内将天津厚蟹全部杀死的浓度为 111.1×10~(-6)。  相似文献   

石斑鱼虹彩病毒SGIV在宿主细胞内依赖微管运动的行为特征     

王立群  王劭雯  王宏达  秦启伟 《热带海洋学报》2020,39(1):66-73

病毒是非常微小的简单生物, 不能独立生存, 必须借助宿主细胞完成自身的繁衍。病毒侵染进入细胞后, 通常借助于微管通过黏稠的细胞质运动到特定的复制位点。然而, 有关病毒依赖微管运动行为的精细动态研究还比较少。石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus, SGIV)为虹彩病毒科蛙病毒属的一个新种, 是海水养殖鱼类的重要病毒性病原, 对海水养殖业造成重大经济损失。利用单粒子示踪技术实时追踪了SGIV病毒粒子沿微管运动的行为, 观察到SGIV在细胞边缘至微管中心之间的双向运动, 最高瞬时速度约0.2μm·s^-1, 均表现为主动运输。病毒粒子运动至微管交叉位置会减速迂回, 而后或受限于此, 平均运动速率约0.008μm·s^-1, 或通过交叉处继续快速运动, 最高瞬时速度为0.2μm·s^-1。同时, SGIV感染会影响微管的形态结构, 随着SGIV感染, 微管逐渐围绕细胞核和病毒加工厂形成环状结构。研究结果初步揭示了SGIV病毒和细胞微管之间相互作用的复杂过程, 丰富了我们对虹彩病毒胞内生命活动的认识, 有助于深入地理解海水鱼类虹彩病毒感染致病机理。  相似文献   

中国对虾（Penaeuschinensis）杆状病毒的装配和包涵体形成过程研究     

汝少国  李永祺  姜明  刘晓云 《中国海洋大学学报(自然科学版)》1996,(4)

对中国对虾肝胰腺上皮细胞的透射电镜观察，发现杆状病毒可在对虾肝胰腺上皮细胞的细胞质内繁殖。增殖过程中在病毒发生基质表面及附近形成晶格状排列的包涵体，通过包涵体的形成、分化等过程，完成杆状病毒的装配。杆状病毒的装配过程似可分为５个时期：１．病毒发生基质形成期；２．未成熟包涵体期；３．成熟包涵体期；４．包涵体分化与病毒粒子装配期；５．侵染期  相似文献   

Development and characterization of a cell line from the embryos of half smooth tongue sole (Cynoglossus semilaevis)   总被引：2，自引：1，他引：2  

SHA Zhenxi  REN Guocheng  WANG Xianli  WANG N  CHEN Songlin 《海洋学报(英文版)》2010,29(2):81-87

A new cell line,CSEC,has been successfully established from embryos at gastrula stage of a cultured marine fish,half smooth tongue sole(Cynoglossus semilaevis).CSEC cells grow actively and stably more than 50 passages for over 200 d in DMEM medium supplemented with 15% FBS(fetal bovine serum),2.5 ng/cm 3 bFGF(basic fibroblast growth factor),1 ng/cm 3 LIF(leukemia inhibitory factor) and 50 mmol/dm 3 2-ME(2-mecaptoethanol).The cells grew well in the temperature range of 24-30 ℃ and the optimal growth temperature was 24℃.FBS and bFGF concentrations are the two key components for CSEC cells proliferation.Chromosome analysis reveals that CSEC cells have a normal diploid karyotype with 2n=42t.The significant fluorescent signals were observed in CSEC after transfection with the GFP reporter gene,suggesting that the CSEC cell line can be used as a useful tool for transgenic and genetic manipulation studies.CSEC cells showed the cytopathic effect(CPE) after infection with lymphosystis disease virus(LCDV) in 2 d.Moreover,the LCDV particles can be observed in the cytoplasm of virus-infected cells by electron microscopy.It suggests that CSEC could be potentially used for the study of aquatic virus.  相似文献   

中国对虾卵细胞中病毒的初步研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

张进兴  孙修勤 《黄渤海海洋》1997,15(1):48-51

对中国对虾卵巢和受精卵细胞进行了电子显向镜超微结构观察，发现卵巢内有球状病毒粒子，大小为８０ｎｍ左右，受精卵细胞内有传染性皮下和造血组织坏死病毒（ＩＨＨＮＶ）感染，其严重影响对虾受精卵的发育，从获得的结果来看，中国对虾病毒（ＩＨＨＮＶ）垂直传播的可能性极大。  相似文献   

病毒膜蛋白及其表达和纯化技术的研究进展     

解飞霞  宋晓玲  黄倢  徐怀恕 《海洋湖沼通报》2002,(4):76-82

病毒囊膜是包膜病毒除核衣壳外的另一主要成分。它主要由多种蛋白质构成，称为膜蛋白，膜蛋白以单聚体，二聚体，三聚体，甚至更多的聚合体的形式存在，具有中和抗体，与靶细胞受体结合，凝集红细胞，诱导细胞融合等多种功能，膜蛋白可采用将其基因整合入载体，并在昆虫细胞，哺乳细胞或细菌中获得体外表达，膜蛋白可在去污剂的作用下形成蛋白质－脂－去污剂的复合物而被溶解，其中去污剂的临界微团浓度，亲水物－亲脂物平衡值，荷电、紫外穿透性等是选择合适去污剂的主要参考因子，溶解后的膜蛋白多利用聚丙烯酰胺凝胶电泳、凝胶过滤层析，离子交换层析，亲和层析，高效液相层析等技术并结合梯度离心；分级沉淀等进行分离、纯化。  相似文献