牙鲆鱼胚胎和仔鱼显微摄影方法   总被引：2，自引：0，他引：2  

王勇  徐永立  张培军 《海洋科学》2001,25(10):15-16

生活在海洋中的硬骨鱼类 ,所产卵子一般为浮性卵 ,即卵内有一至多个油球 ,使卵子能浮于水面。此时的卵子 ,卵黄向上 ,胚盘向下 ,呈倒悬状态。在研究海水硬骨鱼的胚胎发育时 ,如果仅仅观察发育状态 ,还可以做到 ;但如果想把各发育时期的胚胎拍摄下来 ,则非常困难。张崇理１９５９曾使用冻粉 (即琼脂 )来夹住卵子以达到观察的目的。具体做法是 :将１．３%的琼脂倒入培养皿中 ,冷却后在琼脂上挖一稍小于卵子的小槽或小窝 ,加上海水 ,把卵子夹在里面 ,这样就可以把卵子倒转过来。不过倒转过来的时间不能太长 ,由于油球比重低的缘故 ,卵子仍可在…  相似文献   

Forskolin处理真鲷胚胎条件的研究          下载免费PDF全文

谭训刚  杜少军  张培军 《海洋科学》2005,29(4):5-7

研究Forskolin处理真鲷胚胎的条件。对加药时期以及Forskolin浓度进行了优化，得到了处理真鲷胚胎的加药时期为受精后6h，Forskolin的浓度为0．01nmol／L和0．02mol／L，在此条件下处理过的胚胎体节由正常的V型变成U型。该研究结果将有利于研究Hh信号对真鲷成肌因子的影响。  相似文献   

PCR引物设计   总被引：7，自引：0，他引：7  

王艳秋  张培军 《海洋科学》1995,19(5):9-10

多聚酶链式反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）又称无细胞分子克隆系统，是一种体外扩增特异ＤＮＡ片断的技术，１９８５年由美国Ｃｅｔｕｓ公司和加利福尼亚大学联合创建，是９０年代分子生物学领域的一项革命性突破，很快地在分子克隆、遗传病的基因诊断、法医学、考古学等方面得到了广泛应用。ＰＣＲ技术实际上就是在模板ＤＮＡ（ＴｅｍｐｌｅｔｅＤＮＡ）引物（Ｐｒｉｍｅｒ）和４种脱氧核糖核苷酸（ｄＡＴＰ，ｄＧＴＰ．ｄＣＴＰ，ｄＴＴＰ）存在的条件下依赖于ＤＮＡ聚合酶（Ｔａｑｓｅ）的酶促合成反应…  相似文献   

用于基因表达调控及蛋白定位研究中的新型标记——绿色荧光蛋白   总被引：1，自引：0，他引：1  

相渊  张培军 《海洋科学》1997,21(1):15-17

绿色荧光蛋白(Green-fluorescentprotein,GFP)是许多腔肠动物所特有的生物荧光素蛋白。1971年,J.G.Morin等[8]发现维多利亚水母(Aequoreavictoria)发出的绿光不是缘于水母发光蛋白,而是另一种蛋白——GFP造成的。1974年,Morise等[9]首次证明在维多利亚水母体内发出的绿光,是钙离子激活的水母荧光蛋白(发蓝光)将能量传递给GFP后产生的,GFP是一种接收及最终放射能量的物质,所接收的能量来自荧光素酶-氧化荧光素的复合体或钙离子激活的发光蛋白。纯化的GFP,是具有238个氨基酸,分子量为26888Da的单体蛋白[10]。GFP的构像十分稳定[11],…  相似文献   

牙鲆外周血细胞的超显微结构观察研究     

王宏田  张培军  姜明 《海洋科学集刊》2001,(43):166-172

鱼类的外周血细胞是其免疫系统的重要组成部分，对于血细胞形态与结构的观察，有助于更好地理解鱼类免疫机理。作者在实验中发现，不同鱼类血细胞的种类及其结构并不完全相同，因此，有必要进行大量的实验以确定鱼类外周血细胞的组成是否可以反映其种间差异。 牙鲆是中国重要的海水经济鱼类，目前有关其血细胞的形态学的研究尚未见报道。本文以牙鲆外周血细胞为材料研究其超显微结构，以便能准确地了解牙鲆血细胞的分类及不同血细胞的形态结构。  相似文献   

星斑川鲽(Platichthys stellatus)养殖群体的RAPD分析   总被引：4，自引：2，他引：4  

尤锋  吴志昊  李军  王波  徐冬冬  倪静  于道德  朱香萍  张培军  徐永立 《海洋科学进展》2007,25(1):73-78

利用RAPD技术对星斑川鲽养殖群体的遗传多样性进行了研究。将实验用星斑川鲽养殖群体的活鱼苗解剖,取其肌肉,高盐法抽提获得总DNA,质量鉴定和浓度测定后用随机引物进行PCR扩增,从20个随机引物中筛选出18个用于群体遗传学分析,共扩增出133条带,谱带大小为100~2 000 bp,大多数谱带分布在250~1 000bp。多态谱带数为83,每个引物扩增谱带数为1~14条,平均为7条。多态谱带比例为62.41%,Shannon的信息指数和Nei的多样性指数分别为0.21和0.316 6。  相似文献   

鲈鱼群体生化遗传学研究 Ⅰ.同工酶的生化遗传分析   总被引：25，自引：6，他引：25  

徐成  王可玲  尤锋  吴谡琦  张培军 《海洋与湖沼》2001,32(1):42-49

于1994年9月－1995年12月，在青岛近海采集37尾鲈鱼的生化样品，采用淀粉胶和聚丙烯酰胺凝胶2种电泳分析，分析了LDH、MDH、MEP、IDHP、PGM、G3PDH、AK、CK、ADH、SDH、G6PDH、GDH、PGDH、CAT、MPI、EST、SOD等同工酶在鲈鱼眼睛、肌肉、心脏、肝脏、肾脏、鳃、胸鳍等7种组织或器官中的表达情况，并对同工酶表型进行了生化遗传分析，以期为其种质资源保护和开发，以及遗传育种等方面的研究提供基础资料。结果表明，17种同工酶由31个基因座位编码，其中Mep-1,Pgm-1,Sdh,Gdh,Pgdh,Mpi,Est-1,Est-4等8个基因座位为多态。多态座位比例为25．8％。  相似文献   

鱼类微卫星标记的研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

王伟  尤锋  高天翔  张培军 《海洋科学》2006,30(10):81-86

微卫星DNA(microsatellite DNA),又称短串联重复(short tandem repeats,STRs)、简单序列重复(simple sequence repeats,SSRs),由2~6个碱基对的核心序列串联重复而成,与其它常用的分子遗传标记(例如同工酶、RFLP、RAPD、AFLP)相比,微卫星标记具有座位数目巨大并随机分布于基因组  相似文献   

Genetic variation of natural and cultured stocks of Paralichthys olivaceus by allozyme and RAPD     

尤锋  张培军  王可玲  相建海 《中国海洋湖沼学报》2007,25(1):78-84

Population genetics of the left-eyed flounder, Paralichthys olivaceus, including natural and cultured stocks distributed in the coastal waters near Qingdao of eastern maritime China, was analyzed in allozyme and RAPD. The results showed that among total 29 gene loci of 15 isozymes, 9 and 7 were po- lymorphic in natural and cultured stocks, respectively. The status of genetic diversity in P. olivaceus is low in terms of polymorphic loci in chi-square test and genetic departure index of Hardy-Weinberg equi- librium. More alleles in IDHP, CAT, GDH and Ldh-C allozymes were found in the fish, which could be used as markers in assortive breeding and distinguishing stock, population or species evolution. Total 88 and 86 RAPD bands ranging from 200 to 2 500 bp were recognized individually in average of 7.8–8.0 bands per primer. The genetic diversity in cultured stock is lower than that in natural ones showing an ob- viously decreasing genetic divergence. Therefore, effective countermeasures must be taken to protect ge- netic resources of marine cultured fishes. The 2 markers have their own pros and cons. Combining the 2 markers to investigate the genetic variation of populations is suggested. The results provide basic data of this flounder and they are useful for studying genetic improvement and genetic resources of the fish.  相似文献   

同时测定牙鲆肌肉中DNA和RNA的简便方法     

刘宗柱  徐永立  锁宋丽  张培军 《海洋科学》1999,23(4):3-5

组织细胞中ＤＮＡ的含量是基本恒定的,但ＲＮＡ含量则随细胞中蛋白质代谢水平的不同发生很大变异,进一步的研究证实,ＲＮＡ／ＤＮＡ比值与鱼类体重及体长增长速率相关,因而在研究鱼类的生长时,一般要考察其组织中ＲＮＡ含量及ＲＮＡ／ＤＮＡ比值的变化,作为反映其蛋白质代谢及生长速率的生化指标。本文建立了一种可同时测定样品中ＤＮＡ及ＲＮＡ的简便方法。１材料与方法１．１仪器小型离心机、消化炉、水浴锅、７２２－型光栅分光光度计等。１．２肌肉中ＤＮＡ和ＲＮＡ的抽提１．２．１精确称取０．１ｇ左右冰冻保存的肌肉样品,铰碎…  相似文献