富含古罗糖醛酸的褐藻多糖生产菌株的构建          下载免费PDF全文

胡斌  韩峰  林育姿  宫倩红  于文功 《海洋科学》2008,32(1):14-18

为获得古罗糖醛酸(Guluronate)含量高的细菌胞外褐藻多糖,利用PCR从海洋细菌Pseudomonassp.QDA中克隆了其甘露糖醛酸C-5差向异构酶基因(algG),连接入质粒pMF 54Km,构建了重组表达载体pMF54 Km-algG。利用三亲接合法将pMF54 Km-algG转入菌株QDA中,获得algG过量表达重组菌株QDA-G1。H-NMR测定结果表明,QDA-G所产的褐藻多糖中β-D-甘露糖醛酸(M)与它的C-5差向异构体α-L-古罗糖醛酸(G)的比值为0.38,G的质量分数达到74.2%,比野生菌株QDA提高了26.4%。且重组菌株遗传稳定性良好,连续传代20代后,M/G的比值无明显变化。  相似文献   

应用硫酸苯酚法建立一种甘露糖醛酸C-5差向异构酶活性检测方法的研究          下载免费PDF全文

林育姿  宫倩红  张真庆  韩?? 峰  于文功 《海洋科学》2007,31(2):48-51

建立了一种简便快捷的甘露糖醛酸C-5差向异构酶活性的测定方法。研究发现相同分子质量的聚甘露糖醛酸和聚古罗糖醛酸与苯酚硫酸试剂反应后显色程度不同,以此可以用来测定β-D-甘露糖醛酸/α-L-古罗糖醛酸(M/G)值的变化,从而计算甘露糖醛酸C-5差向异构酶的活性。利用本方法测定了已知结构的褐藻胶片断的M/G比,其结果与传统的1H-NMR测定值基本一致。  相似文献   

褐藻多糖高产菌株的构建     

沈洪波  韩峰  林育姿  王传宁  于文功 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2006,36(4):631-634,626

Pseudomonas sp．QDA是从海水中发现的产生褐藻多糖的细菌，无致病性。为提高QDA菌株褐藻多糖的产量。本文利用PCR克隆了粘性菌株P．aeguginosa FRD1的atgT基因，连接入质粒pMF36-Kan，构建了重组表达载体pMF36-Kan-algT。利用三亲接合法将pMF36-Kan-algT转入菌株QDA中。糖醛酸含量测定结果表明，atgT基因过量表达菌株的褐藻多糖产量比出发菌株QDA平均提高了3．3倍，其中菌株A25提高了4．5倍。通过培养条件的进一步优化，A25菌株的褐藻多糖产量与菌株QDA相比提高到8．18倍。  相似文献