共查询到20条相似文献，搜索用时 218 毫秒
1.
用逆转录聚合酶链反应检测草鱼出血病病毒的研究 总被引：3，自引：1，他引：3
于１９９４年５月－１９９５年７月，根据已克隆的草鱼出现血病病毒ＧＣＨＶ－８６１株ｃＤＮＡ的部分序列，设计合成了两对ＰＣＲ引物，采用ＲＴ－ＰＣＲ技术对ＧＣＨＶ－８６１ＧＣＨＶ－８７３两病毒株的ｄｓＲＮＡ进行扩增，结果表明，两对引物仅能特异地检测了ＧＣＨＶ－８６１病毒株核素的存在，而不能对ＧＣＨＶ－８７３病毒株的核酸进行特异扩增，该方法是最小可检测出０．１ｐｇ纯化的ＧＣＨＶ－８６１病毒ｄｓＲＮＡ，采用 相似文献
2.
用逆转录聚合酶链式反应检测草鱼出血病病毒的研究 总被引：4，自引：1，他引：4
于1994年5月-1995年7月，根据已克隆的草鱼出血病病毒GCHV-861株cDNA的部分序列，设计合成了两对PCR引物，采用RT-PCR技术对GCHV-861及GCHV-873两病毒株的dsRNA进行扩增。结果表明，两对引物仅能特异地检测出GCHV-861病毒株核酸的存在，而不能对GCHV-873病毒株的核酸进行特异扩增，该方法最小可检测出0.1Pg纯化的GCHV-861病毒dsRNA;采用该方法对GCHV-861人工感染的草鱼和稀有鲫组织进行RT-PCR检测，不仅能检测到发病期显症病鱼中GCHV-861病毒的存在，还能检测发病前期及愈后无出血病症状的病毒携带者中病毒的存在;利用该方法还从本所关桥实验场出血病流行季节收集的发病草鱼体内检测出GCHV的存在，说明所设计的引物具有一定的实际意义;利用该法还能检测出感染病毒的组织培养细胞系GCK和CIK上清液中GCHV的存在。还建立了简易的模板制备方法，采用该方法整个检测过程只需3-4h，可大大缩短检测时间。由此可见，RT-PCR技术是检测GCHV的快速、灵敏而特异的方法，发展和完善该技术对草鱼出血病的早期诊断和防治、抗病育种具有重要意义。 相似文献
3.
4.
5.
白斑综合症杆状病毒（WSBV）PCR检测方法的改进及应用 总被引：7，自引：0，他引：7
斑节对虾Ｐｅｎａｅｕｓ ｍｏｎｏｄｏｎ白斑综合症是由白斑综合症杆状病毒（ＷＳＢＶ）所致。患有典型斑综合症的斑节对虾,用两种提取病毒模板ＤＮＡ的方法,进行ＰＣＲ扩增：一咱是用传统的方法,即蛋白酶Ｋ,ＣＴＡＢ等消化,酚／氯仿抽提,乙醇沉淀得到ＤＮＡ;另一咱是用改进的煮沸法提取病毒ＤＮＡ。对比发现且一种方法稳定性及敏感性比前者高,重复性好。用后一种方法对病虾 的复眼进行检测,ＰＣＲ结果为阳性。应用后一种 相似文献
6.
草鱼出血病是由草鱼呼肠孤病毒(GCRV)引起的草鱼养殖业一种严重的病毒性出血病,给草鱼养殖产业造成重大损失。该病毒是一种双链分节段RNA病毒,根据GCRV多个病毒分离株基因序列分析及临床发病特点,共有三种基因型GCRV,其中基因Ⅰ型和Ⅱ型较为流行。通过细胞分离培养基因Ⅰ型(GCRV-ZV8909)和Ⅱ型(GCRV-HZ13) GCRV,研制出草鱼出血病二价细胞灭活疫苗,通过绝对定量的方法,测定基因Ⅰ型和Ⅱ型的病毒含量分别为2.0×109及1.5×106 copies/mL。用生理盐水将其分别进行50倍稀释和100倍稀释,包括原液及生理盐水对照共4组,分别腹腔注射免疫(20±5)g健康草鱼,剂量均为0.2mL/尾,每组40尾,各组于免疫后3、5、7、14、21、28、42、56、70、84 d分别取3尾采集血液制备血清。分别利用经原核表达并纯化制备两种基因型GCRV的VP7蛋白以及实验室保存的草鱼IgM单抗,建立了三抗体夹心酶联免疫方法(TAS-ELISA)分析评价疫苗体液免疫效果。结果表明,草鱼经腹腔注射不同剂量的细胞灭活疫苗后,与对照组相比,各免疫组血清抗体均有不同程度的提高,且原液组与50倍稀释组基本持平,但都高于100倍稀释组,各免疫组在免疫后5d即可检测到两种基因型GCRV抗体,且抗体水平持续到84d,但两种基因型抗体水平达到高峰的时间不一致,抗基因Ⅰ型GCRV抗体达到高峰是在28d,抗基因Ⅱ型GCRV抗体是在14d达到高峰。两种基因型抗体水平达到高峰时的血清效价分别为1︰800、1︰600。免疫保护率实验结果表明,原液组保护率最高,为67%,50倍稀释组为60%,100倍稀释组只有33%。 相似文献
7.
于１９９０年９－１２月在青岛海区人工养殖筏采集坛紫菜，提取混合藻胆蛋白，第其经羟基磷灰石柱层析，分离出Ｒ－藻红蛋白（ＲＰＥ）、Ｒ－藻蓝蛋白（ＲＰＣ）和变藻蓝蛋白（ＡＰＣ）。测定了３个不同生长发育阶段的北移坛紫菜中各藻胆蛋白的含量，并与南方坛紫菜做了比较研究。结果表明，坛紫菜生长初期和盛期藻胆蛋白含量较高；到末期大幅度降低，降低的幅度为ＲＰＥ〉ＲＰＣ〉ＡＰＣ。各种藻胆蛋白的光谱特性不随藻体的生长发育 相似文献
8.
9.
PHA体外诱导草鱼白细胞产生γ-干扰素的研究 总被引：10，自引：2，他引：10
于1997年10月－1999年3月，采用半数细胞病变抑制等方法，进行植物凝集素（Phytoagglutinin,PHA)体外诱导草鱼白细胞产生γ－干扰素的研究，结果表明，在PHA诱导的草鱼白细胞培养液中出现了一种抗病毒因子，经理化和生物学性质鉴定证明，该因子是一种干扰素活性物质。但它不同于病毒诱导的α／β－干扰素，主要表现为：对56℃、pH＝2和0．1％SDS敏感；其活性不能被病毒诱导的干扰素抗体所中和；其诱生剂为PHA，来源于白细胞；在诱导条件下，佛波酯（PMA）和白细胞介素－2（IL－2）能显著地促进其诱生，这些特性与人类和高等脊椎动物中报道的γ－干扰素相符，表明是一种γ性质的干扰素。 相似文献
10.
甘糖酯对大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)mRNA水平的影响 总被引：2，自引：2，他引：0
从分子水平上探讨海洋新药甘糖酯的抗栓作用机理。实验以大鼠为材料,采用定量ＲＴＰＣＲ方法定量检测口服甘糖酯后大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物（ｕＰＡ）基因ｍ ＲＮＡ水平变化。研究表明大鼠口服甘糖酯后ｕＰＡ基因ｍ ＲＮＡ 水平高于对照组,差异显著。结论认为甘糖酯可提高体内ｕＰＡ基因的ｍ ＲＮＡ 水平,从而提高ｕＰＡ蛋白的活性,激活机体的纤溶系统,达到抗栓作用。 相似文献
11.
Many odontocetes die annually in gillnet fisheries. Why they become entangled is not yet clear. Maybe some species detect the nets too late to avoid collision. Therefore, the target strength of 11 types of bottom-set gillnets was measured under 0 and 45 degrees angles of incidence. From these target strengths and from knowledge on the echolocation abilities of two odontocete species (harbour porpoises, bottlenose dolphins), the detection ranges of the nets by these small cetaceans could be estimated. The 90% detection range by echolocating harbour porpoises, approaching the nets at right (perpendicular) angles under low noise level conditions, varied between 3 and 6 m depending on the net type. For bottlenose dolphins, under high noise conditions, the 90% detection range varied between 25 and 55 m. At other angles of approach, the estimated detection ranges are shorter. The study suggests that echolocating bottlenose dolphins can detect nets in time to avoid collision, whereas echolocating harbour porpoises cannot in most cases. Suggestions for future research to reduce small cetacean bycatch by improving the nets' detectability by echolocation are given. 相似文献
12.
13.
14.
《African Journal of Marine Science》2013,35(2):395-399
To detect behavioural patterns of individually tagged squid Loligo vulgaris reynaudii in a Radio-Acoustic Positioning Telemetry (RAPT) buoy array, trajectories reflecting the four dimensions of latitude, longitude, depth and time were plotted from data collected during field experiments in South Africa. Finding a continuous curve to represent the sampled trajectories required dealing with anisotropic precision and accuracy, non-uniform sampling rates and improbable outliers. A combination of an operator-controlled smoothing option of an approximating cubic spline and a weight factor assignment based on distance from the mass curve gave the most expedient results when compared with video recordings. 相似文献
15.
Induction of vitellogenin in vivo and in vitro in the model teleost medaka (Oryzias latipes): comparison of gene expression and protein levels 总被引：5，自引：0，他引：5
Quantification of the egg yolk precursor vitellogenin (VTG) in fish has become a standard technique to detect estrogenic effects of known chemicals and environmental samples. In the present study, we have analysed VTG induction by estradiol, ethynylestradiol and genistein exposure in the model teleost medaka (Oryzias latipes) and demonstrate that the medaka is a suitable model system to analyse estrogenic effects. By comparing VTG gene expression and protein levels we show that in principal both techniques can be used to study VTG induction in vivo (juvenile and adult males) and in vitro (primary cultures of male liver cells). If a short term in vivo or in vitro exposure is performed, detection of mRNA might be sufficient. For long term studies with the need to detect weak estrogenic chemicals and a precise quantification, immuno-chemical detection may be favoured. 相似文献
16.
Short-term (6 h) behavioural responses and mortality of Scrobicularia exposed to low concentrations of copper in sea water (31%, S) have been investigated.Scrobicularia can detect copper at a concentration of 0·01 ppm. The initial response is valve closure resulting in a rapid drop in heart rate. In concentrations of 0·05, 0·01 and, to a lesser extent, 0·1 ppm copper added to sea water, the clams begin to interact with the polluted water after 2–3 h. In 0·5 ppm, the valves remain closed and the heart rate is maintained at a low level over the 6-h exposure period.Mortality increases with time in 0·5 ppm copper concentration, reaching 50% in 5–7 days. In 0·05 and 0·01 ppm, no mortality was recorded over this period.There is an increase in mantle cavity water calcium concentration after 6 h in 0·5 ppm, in contrast to 0·1, 0·05 and 0·01 ppm. Aspects of anaerobiosis, accumulation of heavy metals and survival are discussed in relation to the behaviour of Scrobicularia exposed to various copper concentrations. 相似文献
17.
核酸探针原位杂交检测白斑综合症病毒的组织特异性 总被引：2，自引：0，他引：2
从白斑综合症病毒 (whitespotsyndromevirus ,简称WSSV)部分基因组文库中得到核酸探针 ,采用原位杂交检测方法检测对虾甲壳下表皮、胃、后肠、鳃、触角腺的上皮细胞、淋巴器官的基质细胞、肌细胞、心肌细胞及结缔组织细胞 ,原位杂交结果均为阳性。对虾甲壳下表皮的上皮细胞、胃的上皮细胞对病毒较其它部位敏感 ,感染程度高 ;中肠上皮细胞、肝胰腺上皮细胞、淋巴器官内皮细胞未发现感染病毒 ,原位杂交用于WSSV检测 ,比组织切片HE染色更准确、更敏感。在同一组织的同一部位 ,原位杂交所得到的阳性细胞个数比HE多。探针大小不同 ,敏感性也有变化。短的探针 41 3bp敏感性较高 ,长的探针敏感性降低。 相似文献
18.
异硫氰酸苄酯（BITC）防污损作用研究：8.防污挂板试验 总被引：1，自引：0，他引：1
以不同浓度（1,10,100,1000,10000mg／1）异硫氨酸等酯（BITC）浸泡处理木板和地砖两种材料,在青岛太平角海区挂板进行BITC防污作用研究。因BITC能被海水稀释,低浓度BITC（≤1000mg／1）处理的挂板不能有效抑制海洋污损生物的附着,但10000ms／1BITC处理的接板短期内对防止污损生物的附着有效。 相似文献
19.
Andrea Fechter David Thistle Günter Arlt Keith Suderman & Kay Vopel 《Marine Ecology》2004,25(3):217-223
Abstract. Harpacticoid copepod food is patchily distributed and individuals must episodically move to new food patches. Key questions in harpacticoid feeding ecology include how individuals detect food patches and how rapidly they move toward patches. Based on literature reports, we hypothesized that harpacticoids locate food parcels by sensing a water-borne cue. We tested this idea using individuals of Leptastacus coulli Huys, 1992 and Praeleptomesochra similis Lang, 1965 from a sandy beach in north Florida (29.948° N, 84.341° W). Individuals from both species selected seawater that had been exposed to food significantly more frequently than they selected control seawater. The rate of movement of these species was millimeters per second, which agreed with previous reports. 相似文献
20.
海鱼AChE监测海水有机磷农药的可行性研究 总被引：10，自引：0，他引：10
有机磷农药(OPs)对乙酰胆碱酯酶(AChE EC 3.1.1.7)具有专一性抑制作用,因此AChE常作为淡水和土壤OPs污染的特异性标识物(biomarker).本文在海水背景下,通过测定两种有机磷农药(马拉硫磷和甲基对硫磷)对海洋鱼类-鲈鱼[Lateolabrax japonicus(cuvier)]脑组织AChE的抑制效应,分析了海鱼AChE监测海水OPs的可行性.结果显示,抑制时间为20min时,抑制程度达到相对稳定;在低浓度OPs抑制下,纯酶液比粗酶液表现出更好的敏感性,对马拉硫磷和甲基对硫磷的灵敏度分别达到0.28μg*L-1和0.2μg*L-1;在一定浓度范围内,AChE活力对OPs具有显著的线性响应.研究表明,利用鲈鱼AChE指示和监测海水OPs的微污染是完全可行的. 相似文献