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转鲑鱼生长激素基因酵母菌发酵特性的研究 总被引：2，自引：1，他引：1
张培军、Ball等研究表明,外源性生长激素通过注射或浸泡的方法可加快鱼的生长[1]。根据Mclean1987年、Shunsuke等1993年研究发现鱼类后肠具有吸收部分生长激素进入血液循环的特点,本研究室将鲑鱼生长激素基因克隆进无毒无害的酵母菌中,利用可控制的诱导条件,培养出含鲑鱼生长激素的酵母菌,直接掺入饵料,使生长激素通过消化道吸收,以促进鱼的生长。Jacqueline等1989年指出,由于携带外源基因的酵母菌与普通酵母菌的培养要求不同,既要促使菌体快速生长又要保证外源基因的表达,本研究的目的在于选择适宜的培养条件,实现转基因酵母菌的高密度培… 相似文献
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鲑鱼生长激素基因表达产物的促生长效应 总被引：1，自引：3，他引：1
生长激素用于促进鱼类生长的研究已有几十年历史。国内外一些研究者先后用哺乳类动物和鱼类本身的生长激素，通过体内注射、投喂和注射等方式导入实验鱼体内，均获得不同程度的促进鱼类生长的效果［１，３，５，６，９］。８０年代中期，随着基因工程的发展，国外许多实验室从哺乳动物和多种鱼类中分离出生长激素基因，构建了可在工程菌中表达的重组质粒，实现了这些基因在工程菌中的高效表达和表达产物的有效分离。随后利用工程菌中表达的生长激素所进行的鱼类养殖实验表明，它们具有与天然生长激素相同的促生长效应［２，４，８］。与天然… 相似文献
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中国科学院海洋研究所张培军研究员带领课题组成员采用基因工程技术研制的高新技术产品——基因工程酵母饲料添加剂,在水产养殖中应用取得了显著成效。 国外利用外源生长激素进行鱼类促生长效应的研究,以及应用基因工程 相似文献
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鱼类生长激素的异源表达、应用及安全性评价 总被引：3，自引：0，他引：3
鱼类生长激素对鱼的生长发育起着重要的调节作用,能促进鱼体快速生长,提高饵料转化率,在水产养殖业中具有重大应用价值。转生长激素基因鱼具有快速生长效应,可以缩短养殖周期,降低养殖成本和风险。鱼类生长激素基因异源表达体系的建立和发展,使获得大量廉价的鱼类生长激素产品成为可能,为鱼类养殖业新型饵料添加剂的研制开辟了新的途径。本文综述了转生长激素基因鱼和鱼类生长激素基因的异源表达两方面的研究及其安全性评价。 相似文献
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生长激素/胰岛素样生长因子-I轴(Growth hormone/insulin-like growth factor-I axis,GH/IGF-I轴)是调控鱼类生长的主要内分泌轴线,许多外源化学物质能够影响鱼类的生长,并且能够干扰GH/IGF-I轴。本文介绍了鱼类GH/IGF-I轴的组成、功能及其对鱼类生长的调控模式,并从GH/IGF-I轴角度探究外源化学物质影响鱼类生长的内分泌作用机制,展望了该领域的发展方向。 相似文献
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大菱鲆生长激素基因cDNA的克隆、序列分析及分子系统研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了从分子水平研究大菱鲆生长激素作用机制及进化机制.以大菱鲆(Scophthalmus maximus)为材料从脑垂体中提取mRNA,利用SMART-RACE技术建立大菱鲆脑垂体cDNA文库,并从该文库中克隆出大菱鲆生长激素(growth Hormone,GH)cDNA全长序列.测序结果表明,克隆的大菱鲆GH cDNA序列全长为876 bp,包括108 bp的5'UTR和174 bp的3'UTR序列.该基因的开放阅读框全长591 bp,编码由197氨基酸残基组成的生长激素成熟肽序列,用生物软件DNASTAR计算大菱鲆生长激素蛋白分子量为1*!909.22,等电点为6.24.将大菱鲆与漠斑牙鲆、褐牙鲆等共7种鲆鲽鱼类GH成熟肽氨基酸序列进行比较分析,结果显示大菱鲆与其他6种鲆鲽鱼类序列同源性均为70%左右,而鲆科鱼类与鲽科鱼类间生长激素基因同源性很高(≥80%),说明大菱鲆与鲆科、鲽科鱼类的同源性较低.另外,运用PAUP软件对7种鲆蝶科鱼类与另外8种不同种属鱼类进行了分子系统进化树分析,结果与根据传统的形态学和生化特征分类进化地位基本一致,大菱鲆单独形成1个分支且与鲆科和鲽科鱼类相距较远,此结果为在形态学分类基础上进一步定义菱鲆属鱼类分类提供了理论依据. 相似文献
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重组鲈鱼生长激素酵母饲料添加剂及对网箱喂养海水鱼的促长效应 总被引：8，自引：0，他引：8
该文应用基因工程方法开展了具有加速鱼生长的鱼生长激素基因工程研究，构建了高效表达的66鱼生长激素甲醇半赤酵母工程菌．研究中试规模的培养基配方，解决中试工艺设计和生产试验及质量检验方面的问题；通过发酵培养该工程茵获得重组鱼生长激素产品，研究掺入饲料的合适比例，并进行生产规模的海水经济鱼类喂养试验．先后对花尾胡椒鲷(Plectorhinchus cinctus)，卵形鲳鯠(Trachinouts ovatus)，大黄鱼(Pseudosciaena croces)等3种海水经济鱼(4批共约6万尾)进行生长状况对比，增重比率均值分别为20．0％、17．3％、18．4％和56．8％．饲料添加酵母工程菌具有明显地促进海水鱼生长的作用。 相似文献
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三种鳜鱼(Siniperca)生长激素基因的克隆及序列比较 总被引：4，自引：1，他引：3
采用长片段PCR及T-A克隆技术,从基因组DNA成功克隆翘嘴鳜、大眼鳜和斑鳜含完整阅读框的生长激素（Growth Hormone,GH）基因DNA全序列,翘嘴鳜序列全长5548bp,大眼鳜序列全长5483bp,斑鳜序列全长5789bp,提交GenBank数据库后获得注册号分别为EF205280、EF205281、EF441623。三种鳜鱼GH基因均由六个外显子、五个内含子组成;均在第二内含子中相同位置发现“AG”微卫星重复序列;均在第三内含子末端发现一处剪接位点序列的相邻重复。三种GH基因在第一、二、三内含子处存在碱基长度差异。序列间差异主要表现为邻近序列的重复、DNA片段的缺失或插入及单核苷酸多态性（SNP）。翘嘴鳜与大眼鳜GH基因编码氨基酸序列完全相同,两者与斑鳜序列在第150位有一个氨基酸残基差异。采用MEGA软件对三种鳜鱼GH基因DNA序列及编码氨基酸序列分别构建UPGMA系统发育树,结果表明,在系统发育中,斑鳜可能最先从共有祖先物种中分化出来。 相似文献
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In recent years several studies reported the regulation by growth hormone (GH) of the expression of a variety of P450 forms in mammals. However the effect of GH on the xenobiotic-metabolizing enzymes of fish are still unknown. The aim of this work was to investigate the effects of ovine GH—a growth hormone known to be efficient in trout—on the cytochrome P450 level and on aryl hydrocarbon hydroxylase, aminopyrine-N-demethylase, glucuronyl transferase and glutathione transferase activities in trout. The GH-implanted trout (n = 50) each received a single cholesterol pellet containing ovine GH and were compared to control animals (n = 50) receiving a single cholesterol pellet without GH. After 15 days fish were killed and the liver and gills were excised for the measurement of xenobiotic-metabolizing enzyme activities. GH treatment significantly decreased the level of hepatic cytochrome P450 and the activities of cytochrome P450 dependent monooxygenases. In contrast, no significant effect of the treatment was observed on the glutathione transferase and UDP-glucuronyl transferase activities. Moreover, GH treatment had no effect on branchial phase I and phase II enzyme activities. This study provides evidence that GH level significantly affects the expression of several members of the hepatic cytochrome P450 family in trout. 相似文献
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The cytochrome P450 1 (CYP1) family has expanded with the addition of the CYP1B and CYP1C subfamilies. We recently identified a new CYP1 subfamily in zebrafish, CYP1D, with a single gene, CYP1D1. Here we examined sequences found in other fish genomes, i.e., stickleback (Gasterosteus aculeatus) and medaka (Oryzias latipes), for similarities among fish CYP1D1 genes. The full-length deduced amino acid sequences for CYP1D1 in these two species averaged about 43% identity to the CYP1As, but nearly 50% when sequence alignment ambiguities were masked. CYP1D1 has seven exons, similar in size and position to the exons in CYP1D1 and CYP1A in zebrafish. However, the intronic distances were substantially smaller in the medaka and stickleback. There also were differing numbers of putative xenobiotic response elements in the CYP1D1 of the various species. Whether the stickleback or medaka genes are inducible by aryl hydrocarbon receptor (AHR) agonists is yet to be determined. 相似文献
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将海水鱼类黑鲷Sparusmacrocephalus从盐度为26.6的海水直接转入淡水,考察渗透压的急剧降低对黑鲷的生长激素(growthhormone,GH)及其受体(growthhormonereceptor,GHR)等生理指标的影响。研究发现:(1)黑鲷从海水直接转入淡水后48h有33%的鱼死亡,对照组无死亡现象;(2)黑鲷在转入淡水48h内其血清生长激素(GH)含量、肝脏及鳃中GHR及GHRmRNA含量与对照组均无显著差异;(3)黑鲷在转入淡水48h后其肾脏中GHR含量较对照组显著升高(p<0.05),肾脏中GHRmRNA含量在24h及48h显著高于对照组(p<0.05)。结果表明,从GH含量看,黑鲷从海水环境到淡水低渗环境与鲑鳟鱼类从淡水到海水环境的适应性调节机制有差异,而黑鲷肾脏中GHR的含量变化可能参与黑鲷对外界环境渗透压的这种急剧降低的适应性调节。 相似文献
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本文利用RACE技术克隆获得红鳍笛鲷(Lutjnaus erythropterus)酪氨酸酶相关蛋白1基因全长,并利用生物信息学方法对该基因的m RNA序列特征、氨基酸序列特征、分类及系统发生进行了分析。结果表明,在红鳍笛鲷中,酪氨酸酶相关蛋白1基因含有TYRP1a和TYRP1b两个拷贝,其中TYRP1a序列全长3178bp,开放阅读框(ORF)长1566bp,5?端235bp,3?端1377bp;TYRP1b基因c DNA全长1871bp,ORF区长1656bp,5?端89bp,3?端126bp。序列分析发现,TYRP1a和TYRP1b基因与其它物种的同源基因保守性较高,尤其是酪氨酸酶基因家族典型的酶活性位点序列在脊椎动物中具有高度保守性。进化分析发现,TYRP1a和TYRP1b基因的种间同源性高于两个基因间的同源性。荧光定量PCR数据分析表明,TYRP1a和TYRP1b基因都在眼睛部位具有最高表达,TYRP1b在黑色皮肤也有较高表达。结果可为进一步阐述TYRP1基因在红鳍笛鲷身体和眼睛部位的色素合成机制提供一定的理论基础。 相似文献
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采用RT-PCR技术和RACE技术成功克隆淡水鱼类斑鳢sGST基因cDNA全序列,推测得到氨基酸序列,初步分析其结构功能域及系统进化关系。结果表明,斑鳢sGST基因cDNA序列全长为898bp,编码225个氨基酸。斑鳢sGST与真鲷、金头鲷、鲽、黑头鲦、川鲽、大口黑鲈等最新定名为ρ型的sGST氨基酸同源性较高,ρ型sGST为水生生物所特有并共同占据进化树上独立的分枝;与大鼠、小鼠、人等哺乳动物sGST现有所有类型同源性均很低,并且在进化树上距离也较远,表明本研究成功克隆的sGST基因应属于ρ型,可能在鱼类等水生生物对水栖环境的适应上有重要作用。 相似文献
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双锯鱼(Amphiprion)亦称为海葵鱼,又称为小丑鱼,是一类经济价值较高的海水观赏鱼。目前国内在双锯鱼的胚胎发育、人工饲养以及形态学观察等方面已经取得了有效成果,但在分子生物学水平上对其基因表达的研究较少。为了筛选出适用于双锯鱼胚胎不同发育阶段以及成鱼组织的内参基因,分析酪氨酸酶(TYR)基因的表达情况,以眼斑双锯鱼(A.ocellaris)和白条双锯鱼(A.frenatus)为材料,利用实时定量聚合酶链式反应(qPCR)对18SrRNA、GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因)、Ef-1α(转录延伸因子基因)和β-actin(β-肌动蛋白基因)这4个候选内参基因的表达水平进行检测,同时通过geNorm和Norm Finder软件对其稳定性进行评估,最后以合适的内参基因作为参考,研究TYR mRNA的表达水平。结果表明,在双锯鱼胚胎的不同发育阶段,18S和β-actin的表达量相对于其他基因较为稳定;在双锯鱼的不同组织中,稳定性依次为18S>β-actin>Ef-1α>GAPDH。以18S作为内参基因时分析发现TYR基因的表达在双锯鱼胚胎发育过程中呈先上升后下降的趋势,在体节期表达量最高;在双锯鱼各组织中均有表达,且在眼、尾和红皮中表达量最高。 相似文献
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三种鳜鱼(Siniperca)生长激素基因内含子多态性的比较研究 总被引：2，自引：0，他引：2
鳜(Siniperca chuatsi)、大眼鳜(Siniperca kneri)、斑鳜(Siniperca schezeri)为鳜属中3种主要经济鱼类,具有较近的亲缘关系和相似的生活习性,但生长性状差异较大.为探索3种鳜鱼生长差异与基因差异间联系,以野生群体为材料,采用PCR扩增、电泳及测序等方法,对生长发育相关基因生长激素(GH)基因进行了多态性检测与分析.在第一内含子、第二内含子前段、第二内含子中段微卫星序列及第三内含子中均检测到多态性.各区域共检测到25种长度类型,其中4种为鳜与大眼鳜共有长度类型,3种为鳜、大眼鳜与斑鳜共有长度类型,其余18种为各物种特有长度类型.各区域长度类型共组成14种单倍型,无种间共有单倍型.序列长度差异主要由重复序列及DNA片段的插入或缺失形成.在第1内含子3'端-6位与第3内含子5'端+16位各发现一处靠近剪接位点的序列差异.根据多态性检测结果构建系统发育树,鳜与大眼鳜先聚为一枝.本研究可为进一步确认鳜鱼GH基因差异与生长性状间联系,并利用基因差异进行鳜鱼种质资源保护及分子育种奠定基础. 相似文献