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马粪海胆(Hemicentrotus pulchernimus)在0.5mol dm3KCl或0.5moldm3 LiCl刺激下,能排放出卵子或精子,对海胆没有损伤作用,继续养起来还可再用,卵子在KCl或LiCl溶液中不能同精子受精.为了使两种性细胞进行正常的受精作用,可将卵子从KCl或LiCl溶液中很快移至海水中,或一发现海胆在KCl或LiCl溶液作用下排放性产物时,便立刻转移到海水中,使其产卵或排精于海水里,这样的卵子和精子可进行正常的结合.LiCl溶液诱导排放的卵子的受精率高于KCl溶液,可达98%. 相似文献
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为研究杂交过程中精卵的结合以及相关生物学特征,作者利用扫描电镜观察了云纹石斑鱼(Epinephelus moara)卵子形态结构以及云纹石斑鱼♀×七带石斑鱼(E.septemfasciatus)♂杂交时的精子入卵过程。结果发现,云纹石斑鱼(♀)×七带石斑鱼(♂)杂交与亲本自交的精子入卵过程没有本质的区别。云纹石斑鱼卵表面布满纵横交错、走向不确定的网纹,在受精孔区可观察到前庭、受精孔和微小孔。成熟的精卵相遇时相互激活,产生一系列胞间反应。受精后0~25 s,可观察到精子附着在卵子受精孔周围;受精30~45 s,已有精子进入卵子,并且明显可见精子尾部留在受精孔外;精子入卵后,受精孔内有受精锥形成,周围可观察到絮状的受精塞,将受精孔封闭;授精90 s~3 min,卵表面处于修复状态。整个过程未发现有多精入卵的现象。 相似文献
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采用紫外线遗传失活的太平洋牡蛎精子作激活源，经6-DMAP加倍诱导栉孔扇贝第二极体抑制型雌核发育二倍体；运用石蜡切片显微技术，对雌核发育二倍体卵子早期胚胎发育过程中的核相变化进行观察；采用荧光原位杂交（GISH）技术对担轮幼虫期胚胎进行检测。结果显示，紫外线处理过的精子入卵后发生一次轻微膨胀，形成雄性原核，但不形成染色体，而是浓缩为致密的染色质小体（DCB），DCB或滞留于两卵裂球的分裂沟上或进入其一的细胞质中，不与雌原核融合；GISH检测结果显示，在早期胚胎中没有检测到外源太平洋牡蛎精子的遗传物质。实验结果可为研究异精诱导栉孔扇贝雌核发育二倍体提供细胞学依据。 相似文献
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日本联合科研小组在冲绳的庆良间诸岛经过10多年的调查研究，开发出利用荷尔蒙大量培育珊瑚的新技术。在每年5月的望月之夜，造礁珊瑚在同一时刻，一齐产卵，向海里排放精子和卵子， 相似文献
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对虾成熟卵子的激活都是由海水引起的,海水的刺激引起成熟的卵母细胞发生皮层反应,完成减数分裂,这一过程同有无精子的作用无关(Clark et al.,1977,1980; Lynn et al.,1991; Pillai et al.,1987)。在对锐脊单肢虾(Sicyonia ingentis)的卵子激活研究中发现,其成熟卵子无论受精与否在接触海水以后均具有相同的激活过程,受精卵和未受精卵的皮层反应及减数分裂的恢复没有区别,而海水中刺激卵子发生皮层反应直接因子是Mg2+而不是Ca2+。在无Mg2+人工海水中,锐脊单肢虾的卵子不能激活;而在无Ca2+人工海水中,卵子则可正常激活(Pillai et al.,1987; Lindsay et al.,1992a)。Mg2+对锯额长臂虾(Palaemon serratus)卵子减数分裂的形响的研究表明,锯额长臂虾卵子减数分裂的恢复必须有Mg2+参与,而Ca2+则是非必须的;胞外Mg2+可以诱导卵子的皮层反应,并使卵膜外的微绒毛消失;胞外Mg2+的增加可使卵子内部游离Ca2+浓度发生变化,从而诱导卵子的激活(Goudeau et al.,1986,1991,1996)。
根据前人的报道,胰蛋白酶和胰蛋白抑制剂对对虾精子的顶体反应、卵子的激活都具有明显的影响(Lynn et al.,1987; Griffin et al.,1990; Lindsay et al.,1992b; Chen et al.,1994)。Lynn等(1987)报道褐对虾(Penaeus aztecus)的卵胶前体(jelly procusor)含有约70%-75%的蛋白质及25%-30%的多糖,胰蛋白酶对于人工分离的卵胶前体具有明显的降解作用,胰蛋白酶抑制剂可以抑制卵子在海水中的激活,Griffin等(1990)的研究发现,锐脊单肢虾的卵子内含有类胰蛋白酶的物质,解剖性成熟雌虾获得的卵子置入海水摇匀,上清液-卵水(egg water)可以诱导取自雌虾纳精囊内的精子发生顶体反应,胰蛋白酶也可以诱导对虾精子的顶体反应,而胰蛋白酶抑制剂则完全可以抑制对虾精子在人工海水中发生顶体反应时顶体丝的形成。Lindsay等(1992b)的研究也得出了类似的结果,并对卵水和胰蛋白酶不同浓度及不同作用时间下对对虾精子顶体反应的诱导作用进行比较研究。Chen等(1994)对锐脊单肢虾精子的提取物进行生化分析发现,精子内部也有类胰蛋白酶的物质,并通过免疫电镜技术将其进行定位,精子的提取物可以降解分离的卵黄膜。
激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscope)在海洋动物的受精及发育生物学的研究中已有一些报道(Sardet et al.,1992; Stricker et al.,1992; Shen et al.,1993; Jaffe, et al.,1994; Malinda, et al.,1994)。而在对虾的受精及发育生物学方面应用还比较少,只有锐脊单肢虾的卵子激活及早期发育的研究上有一些报道(Hertzler et al., 1992, 1994: Lindsay et al.,1992a)。
海水中的离子成分是影响卵子激活的关键因子,而胰蛋白酶和胰蛋白酶抑制剂对对虾受精也有着很大影响,这两方面的工作在国内、外中国对虾的受精生物学研究中均未见报道。
作者对上述两类理化因子对中国对虾卵子激活的影响进行研究,并使用激光扫描共聚焦显微镜对中国对虾卵子受胰蛋白酶和胰蛋白酶抑制剂的作用而发生的形态变化进行研究,初步分析了造成异常卵裂的原因。 相似文献
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中国对虾精子和卵子受精能力的初步研究 总被引：5，自引：1，他引：5
１９７３年，Ｃｌａｒｋ等以褐对虾（Ｐｕｎａｅｕｕｓ ａｚｔｅｃｕｓ）为实验材料，将解剖的卵子和精子混合，首次在非鞭毛型不动精子的人工授精研究中获得受精卵，受精率为１０％［２］。１９８６年，Ｍｉｎ－ＮａｎＬｉｎ等在雌虾产卵时，将精子滴入产卵池中使卵子受精，孵化率高达６３．１１［４］。关于中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）精子和卵子受精能力的研究还未见报道。精卵的受精能力直接决定受精率，而受精率的高低影响苗种生产。因此．进行对虾精子和卵子受精能力的研究有利于对受精过程的进一步了解，以使更好… 相似文献
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为研究真鲷(Pagrus major)精子在外源DNA下的生理特性和转染效果,探索真鲷精子介导转基因技术,作者通过计算机辅助分析外源DNA环境下(不同孵育时间、DNA长度、DNA浓度)真鲷精子活率和运动速度的变化,进一步采用PCR和荧光探针的方法检测外源DNA与真鲷精子的结合情况,并通过人工授精来评价外源DNA能否转染精子并传递至F0代。结果表明:外源DNA浓度、孵育时间及DNA长度对精子活率无显著影响。在5μg/106个精子的高浓度10 kb DNA下孵育12 h,真鲷精子仍具有(75.89±5.55)%的精子活率,平均直线速度(70.97±6.37)μm/s,与对照组无显著差异,但精子平均曲线速度显著下降,比对照组低21.85μm/s。真鲷精子与带Fluorescein荧光素的DNA片段共孵育后,部分精子在荧光显微镜下观察到绿光。将DNA孵育后精子进行人工授精表明经过1μg DNA/106个精子孵育后的受精率和孵化率无显著下降,通过PCR法并没有在外源DNA处理的精子和F0代中检测到目的基因,表明外源DNA虽然能够吸附在真鲷精子表面,但并不足以携带进入卵子产生转基因后代。 相似文献
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用普通光镜和石蜡切片技术,系统观察了宽壳全海笋卵子在受精和早期胚胎发育过程中的外形和核相变化。结果发现,宽壳全海笋成熟未受精卵呈梨形或卵圆形,核相处于第一次成熟分裂前期,有明显的生发泡和核仁;精子为鞭毛型,全长(44.042±1.166)μm,头部呈椭圆形,前端的顶体略呈钝锥状;在水温24℃条件下,精、卵混合后,精子迅速附着于卵子表面,启动卵子发育;受精后6~9 min,生发泡逐渐萎缩、破裂,随后精子进入卵内并轻微膨胀;受精后20,30 min,受精卵先后排出第一、第二极体,完成第一次和第二次成熟分裂;成熟分裂结束后,精、卵核体积迅速膨胀,核膜重新出现,形成弥散状的雌、雄原核,雄原核形成略早于雌原核;受精后40 min左右,雌、雄原核在卵子中央以原核联合的方式结合,随后联合核的染色体共同排列在纺锤体的赤道板上,形成第一次有丝分裂的中期分裂相;随着有丝分裂的进行,染色体被纺锤丝拉向两极,结果在受精后约50 min形成2个大小不等的卵裂球,第一次卵裂结束;第二次卵裂过程与第一次卵裂基本相同,只是卵裂方向与第一次卵裂基本垂直,在受精后65~70 min,第二次卵裂完成,形成1大3小4个卵裂球。另外,实验中发现了少量的多精入卵和多极分离现象。 相似文献
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采用紫外线遗传失活的太平洋牡蛎精子作激活源,经6-DMAP加倍诱导栉孔扇贝第二极体抑制型雌核发育二倍体;运用石蜡切片显微技术,对雌核发育二倍体卵子早期胚胎发育过程中的核相变化进行观察;采用荧光原位杂交(GISH)技术对担轮幼虫期胚胎进行检测.结果显示,紫外线处理过的精子入卵后发生一次轻微膨胀,形成雄性原核,但不形成染色体,而是浓缩为致密的染色质小体(DCB),DCB或滞留于两卵裂球的分裂沟上或进入其一的细胞质中,不与雌原核融合;GISH检测结果显示,在早期胚胎中没有检测到外源太平洋牡蛎精子的遗传物质.实验结果可为研究异精诱导栉孔扇贝雌核发育二倍体提供细胞学依据. 相似文献
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本研究观察了铜藻雌雄生殖托的形态、精子卵子的排放和受精卵的发育过程。研究发现,铜藻的雌雄性生殖托均为圆柱状,而雄性生殖托比雌性生殖托更加细长。生殖托发育成熟后会形成生殖孔,卵从生殖孔排出,靠粘液附在生殖托表面等待受精,且有8个核,被透明壁包围。而精子则呈放射状排列在生殖孔周围,排出的精子具有明显的鞭毛结构,游动到卵子周围完成受精过程。受精后的卵由8个核融为1个中央大核,受精卵经过多次细胞分裂后形成假根芽。然后,脱落在培养容器底部,发育成带有假根的幼孢子体。8周后生长成带有2～3个叶的幼苗,幼苗长达18 mm。 相似文献
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运用电脉冲转基因仪对合浦珠母贝卵子进行电脉冲处理以优化电穿孔法转基因的电击参数。实验中调制百分比：100％；脉冲间隔：1．0s：电极距离：2mm；脉冲个数：5个，参数保持不变。用不同的电脉冲参数组合（脉冲电压100-400V、脉冲持续时间0．5～3．0ms、脉冲频率10～50kHz，共28个组合）对卵子电击，然后加入精子进行授精，统计各组受精率和孵化率，以受精率和孵化率达到50％以上为衡量指标。结果表明，合浦珠母贝卵子对低脉冲频率和高电压非常敏感，当频率低于20kHz或脉冲电压高于400V时对卵子损伤较大。脉冲持续时间对其影响不大，适应范围较宽。优化的转基因电击脉冲参教组合为：脉冲电压1.0kV／cm，脉冲持续时间20ms，脉冲频率50kHz，或者脉冲电压1．5kV／cm，脉冲持续时间1．5ms，脉冲频率50kHz。 相似文献
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在受精作用过程中,精子与卵子的识别与结合是全部受精过程能够发生的前提条件。在本综述里,作者将集中探讨有关这方面研究所取得的进展。因为海胆和非洲爪蟾研究得较为彻底,作者将对这两种动物的研究结果做较详细的介绍。１海胆卵细胞表面的精子受体本世纪初,Ｌｉｌｌｉｅ于１９１４年发现,不同种属的海胆纲动物,其卵细胞表面的胶质层能够凝聚同一种类的精子并诱导顶体反应。于是,他最先提出了“精子凝集素抗精子凝集素”的理论。虽然早期的学者认为胶质膜是精子的受体,Ｔｙｌｅｒ于１９４８年明确论证,精子凝集素与抗精子凝集素反应的特异… 相似文献
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1 材料与方法实验用牡蛎为乳山湾当地养殖1a的长牡蛎,平均壳长9.63cm,肥满度20.75%,洗刷干净后,放入池内暂养。实验时随机抽取3～5个牡蛎,剥去右壳,露出软体部分,用水滴法区分雌、雄个体并将雌、雄牡蛎严格分开放置。镜检精卵的质量,选取卵子发育较好的雌体,将卵巢剥离下来,破碎后用78μm的筛绢过滤,去除较大的组织碎片,制成卵液盛于200ml的烧杯中,每隔3h观察卵子的形态,并取约8000～10000个卵子盛入10ml的小瓶中,加入2滴活泼的精液使之受精,2h后统计受精率。选取精子活跃的雄贝,取少量性腺通过滴管的吹打使精子从精巢上脱落下来,制成精液… 相似文献
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通过观察栉江珧 (Atrina pectinata linnaeus)的未分化生殖细胞 ,精原细胞和卵原细胞 ,精母细胞和卵母细胞 ,精子和卵子的形态结构与分布状况及核仁在卵成熟过程中的变化 ,对栉江珧生殖细胞发生及成熟过程的有关问题进行了探讨。 相似文献
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盐度及保存时间对牙鲆精子活力的影响 总被引：4，自引：0，他引：4
人工授精是鱼类养殖过程中的一项重要技术,获取具有受精能力的精子是这一活动中的重要步骤。环境因子对于海产鱼类精子生理状态的影响国内已有初步研究［１,２］,但环境因子对牙鲆精子的作用还需进一步研究。本实验着重研究了牙鲆精子于室温条件下贮存不同时间后,这些精子在不同盐度条件下的活力,以及室温条件下,于精液中保存了不同时期后的精子在天然海水中（盐度为３２）使卵子受精的能力。１材料与方法１．１精、卵的获取实验中所用的牙鲆亲鱼取自山东荣成市寻山养鱼场的亲鱼池。卵子和精子系采用人工挤压的方法获得。挤压过程中防… 相似文献
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分别采用自然排放和解剖的方式获取海湾扇贝(Argopecten irradians irradians)精液,采用传统的分步降温法,从抗冻保护剂、精液稀释比例、降温程序、解冻温度和精子质量评价等方面探究海湾扇贝精液超低温冷冻保存技术。研究发现,海湾扇贝精子超低温冷冻保存效果最好的方案为:以解剖的方式获取海湾扇贝精液,用浓度20%的二甲基亚砜作为抗冻保护剂,以体积比2∶1与精液混合,控制总体积0.5~1 mL;体系经4℃平衡5 min后,于液氮面以上10cm稳定5min,投入液氮保存;解冻时,体系于30℃水浴中摇动融化。此方案下,精子解冻后活力最高,晃动和游动精子比例达到86.0%。将解冻后的海湾扇贝精子与虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)卵子人工授精,发现虾夷扇贝卵子可以受精并孵化,受精率为21.7%,这证实了此冻存方案的可行性。本研究完善了扇贝精液超低温保存的方法和流程,对于海湾扇贝种质资源保护、跨季杂交育种等研究有参考价值。 相似文献