五种/株原甲藻核糖体小亚基(18S rRNA)基因克隆及序列分析   总被引：8，自引：0，他引：8  

王波  米铁柱  吕颂辉  孙军  李秀芹  甄毓  李荣秀  于志刚 《海洋与湖沼》2006,37(5):450-456

采用分子克隆及序列比对的方法,对五种/株赤潮原甲藻18SrRNA基因全长序列进行扩增、克隆和序列测定,并从GenBank上下载13个原甲藻18SrRNA基因接近全长的序列,用NJ法和ME法构建了原甲藻属的系统树。结果表明,五种/株原甲藻18SrRNA基因扩增序列长度为1782—1783bp,其中来自南海(中国海域)和来自美国海域的两株微小原甲藻(Prorocentrumminimum)的序列完全一致;东海的赤潮原甲藻(Prorocentrumsp·)与具齿原甲藻(P·dentatum)的序列也完全一致,与微小原甲藻只有5个碱基的差异;而海洋原甲藻(P·micans)与微小原甲藻和具齿原甲藻的序列差异较大,分别为27个和28个碱基。通过NJ法和ME法构建的系统树基本一致。由系统树可以看到:原甲藻属大致分为两支,本实验的微藻全部分布在同一支上。18SrRNA基因序列还将有助于有害赤潮藻快速鉴定的特异性分子探针的研制。  相似文献   

酚氧化酶研究概况Ⅱ——基因结构及其系统演化   总被引：1，自引：0，他引：1  

李国荣  张士璀  李红岩  王昌留 《海洋科学》2003,27(5):8-10

基因克隆、序列测定以及基因表达分析等分子生物学技术是20世纪80年代才开始广泛应用的分析手段。近年来,有关酚氧化酶(Phenoloxidase,PO)的分子生物学研究也取得了很大进展。在脊椎动物中,已知酪氨酸酶DNA和cDNA序列的动物有:人、小鼠、鸡、蛙和青鳉鱼。小鼠酪氨酸酶是编码533氨基酸的蛋白质,其中含有信号肽和6个糖基化位点。与蜘蛛血蓝蛋白的亚基进行序列比较,发现有两个序列保  相似文献   

大黄鱼(Pseudosciaena crocea)热激蛋白的基因克隆、原核表达及抗血清的制备   总被引：1，自引：1，他引：1  

张祖兴  李明云  陈炯  邬勇 《海洋与湖沼》2006,37(4):337-341

应用trizol裂解法提取象山港网箱养殖大黄鱼肝脏总RNA,采用RTPCR获得大黄鱼cDNA;通过设计特异引物进行PCR扩增,将PCR产物转化到质粒并直接测序,得到1.7kb的目的基因;同时将此目的基因连接到表达质粒pSBET中,在大肠杆菌BL21中进行诱导表达以及表达产物的分析。克隆基因的表达产物经SDSPAGE分析表明,HSP基因的蛋白分子量为60kDa左右,与阅读框的编码大小一致;表达蛋白经纯化后免疫小鼠制备抗血清。Westernblotting检测结果表明,制备的抗血清与HSP蛋白起较强的特异性反应。HSP基因的系统进化分析表明,大黄鱼与非洲爪蟾最为接近,从侧面印证了脊椎动物中两栖纲动物与鱼纲动物的亲源关系。通过大黄鱼HSP基因的提取和分析,可为以后制备出核酸探针、筛选和克隆出一批具有优良性状的基因、构建基因文库等研究工作奠定基础。  相似文献   

Isolation and identification of a marine killer yeast strain YF07b and cloning of the gene encoding killer toxin from the yeast   总被引：1，自引：0，他引：1  

WANG Xianghong  CHI Zhenming  LI Jing 《海洋学报(英文版)》2007,26(6):101-108

It was found that the marine yeast strain YF07b could secrete a large amount of killer toxin against a pathogenic yeast strain WCY which could cause milky disease in Portunus trituberculatus.The marine yeast strain YF07b was identified to be Pichia anomala according to the results of routine yeast identification and 18S rDNA and ITS sequences.The gene encoding killer toxin in the marine yeast strain YF07b was amplified by PCR technology.After sequencing,the results show that an open reading frame,consisting of 1 281 bp,encoded a presumed protein of 427 amino acids.The sequence of the cloned gene was found to have 99% match with that of the gene encoding killer toxin in Pichia anomalas strain K.A signal peptide including 17 amino acids appeared in the N-terminal domain of the killer toxin.Therefore,the mature protein consisted of 410 amino acids,its molecular mass was estimated to be 47.4 ku and its isoelctronic point was 4.5.  相似文献   

基因中毒综合症     

Kurel.  B 叶文红 《南海研究与开发》1993,(4):75-77

  相似文献   

抑制螺旋藻胞内核酸酶活性的研究   总被引：7，自引：0，他引：7       下载免费PDF全文

柯珍恋  徐虹  章军 《海洋科学》2003,27(1):34-37

螺旋藻细胞内较高的胞内核酸酶活性是外源基因转化螺旋藻的主要障碍。以供体质粒pEUTISI为酶消化底物，通过多种方法处理螺旋藻细胞，然后检测其内核酸酶粗提液对pEUTISI的降解作用，结果表明，2mmol/L以上的EDTA处理16h或无Mg^2 螺旋藻培养基培养72h以上，都可使处于对数生长期的螺旋藻胞内核酸酶活性显降低；低于28℃（如24℃）培养也可降低螺旋藻的胞内核酸酶活性。根据实验结果，建议在螺旋藻转化前72h开始低温、无Mg^2 培养，转化前16h提高培养基中EDTA的浓度至2mmol/L，就能获得胞内核酸酶活性极低的受体藻，有利于外源基因的转化。  相似文献   

大菱鲆(Scophthalmus maximus)MHCⅡA基因全长cDNA的克隆与组织表达分析   总被引：6，自引：0，他引：6       下载免费PDF全文

张玉喜  陈松林 《海洋与湖沼》2007,38(3):221-226

采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法, 得到1131bp的大菱鲆MHCⅡA全长cDNA片段.该序列包括720bp的开放阅读框(0RF), 75bp的5'末端非编码区(UTR)以及336bp的3'末端非编码区.利用CLASTAL W1.8软件进行MHCⅡA基因的氨基酸序列比对和同源性比较, 结果表明, 大菱鲆MHCⅡA与牙鲆MHCⅡA的相似性最高, 为69.8%, 与真鲷、鲈鱼和丽鱼的相似性次之, 分别为65.5%、69.6%和61.4%, 与人、鼠和鲨鱼MHCⅡA的相似性仅为19.8%、31.6%和26.9%.应用RT-PCR分析其组织表达发现MHCⅡA基因在正常大菱鲆组织中均表达, 但表达量在各个组织中不同, 其中在鳃、脾、头肾、心脏、小肠和皮肤中有较强的转录本, 中等程度表达于肝和血, 在性腺和肌肉中表达最弱.  相似文献   

官井洋野生与养殖大黄鱼同工酶的研究   总被引：16，自引：2，他引：16  

王军  全成干  苏永全  丁少雄  张纹 《海洋科学》2001,25(6):39-41

应用矣丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）法对取自福建宁德官井洋海区养殖群体和野生种群各20尾大黄鱼的9种同工酶15个基因座位于检测分析，结果表明，大黄鱼眼球中浮酸脱氢酶（LDH）酶谱表现为LDH的经典模式即有5种谱型LDH，在氙检测出的15个基因座位中，野生种群样品的编码苹果酸怪酶(sMDH)，苹果酸酶（ME）和琥珀酸脱氢酶（IDDH－1）的3个基因座位具有多态性，养殖群体中仅发现1个基因座位具有多态性（IDDH－1）所检测的野生种群比养殖群体的遗传变异水平高，但从总体上平高，但从总体上来说，官井洋大黄鱼遗传多样性相对较低，表明该种群已出现了种质退化现象，因此，进行科学的遗传管理对保护和恢复大黄鱼资源是相当必要的。  相似文献   

Genetic diversity and its seasonal variation of Jiaozhou Bay phytoplankton determined by rbcL gene sequencing     

LIU Yongjian  YANG Guanpin  GUAN Xiaojing  MEN Rongxin 《海洋学报(英文版)》2006,25(2):125-134

1 IntroductionRibulose-1, 5-bisphosphatecarboxylase/oxyge-nase(RubisCO)isthem ostim portantenzymeforpho-tobiosynthesis. Itcatalyzesboth thereduction ofCO2and the oxygenolysisofribulose-1, 5-bisphosphate.Asthemostabundantproteinonearth (Ellis, 1979),RubisC…  相似文献   

噬藻体遗传多样性的研究进展     

汪岷  闫群 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2010,40(8)

蓝藻是一类最原始、最简单的原核藻类生物,是海洋中的主要初级生产者之一。感染蓝藻的病毒称为噬藻体。噬藻体是水生微生物群落的重要组成部分,在控制蓝藻种群动力学及调节生物生产量等方面具有重要的生态学意义。研究噬藻体的遗传多样性有助于完善噬藻体的分类,为进一步探讨噬藻体之间的进化关系、噬藻体与蓝藻之间的相互关系提供理论依据,同时为探索环境变化对噬藻体进化的影响提供新的视点。本文综述噬藻体的分类、影响噬藻体遗传多样性的因素及噬藻体遗传多样性研究常用的靶基因等方面的研究进展。  相似文献