重组质粒HF443-EGFP的构建及其在赤潮毒素检测中的应用初探   总被引：4，自引：1，他引：4       下载免费PDF全文

刘洁生  杨维东  车军  甄熹  江天久  吴春利 《海洋与湖沼》2003,34(5):566-571

采用基因工程的方法，进行重组质粒HF443一EGFP的构建和在哺乳动物细胞中的表达，并进行了其用于赤潮毒素检测的可能性研究。结果表明，用PCR技术扩增EGFP基因，用XbaⅠ、Hind Ⅲ双酶切并纯化，与同样双酶切并纯化的HF443质粒连接，可构建重组质粒HF443-EGFP；利用Lipofect AMINE2000转染体外培养哺乳动物BIU-87细胞。在培养体系中加入不同浓度的GTX，而后加入Na^ 通道激活剂乌头碱以诱导绿色荧光蛋白表达，荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白表达的变化情况。细胞发出的荧光随毒素浓度的增加而减弱，存在一定的剂量效应关系，提示毒素GTX可显著影响绿色荧光蛋白的表达，重组质粒：HF443-EGFP用于赤潮霉素检测有一定的可行性.  相似文献   

冻融循环对不同塑性指数路基土弹性模量的影响研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

王静  刘寒冰  吴春利 《岩土力学》2012,33(12):3665-3668

在季节性冻土区,不同状态（塑性指数,围压等）路基土在通车运营期间经历冻融循环后,其物理力学性质会发生变化,但目前针对冻融循环对其的影响研究还不够广泛和深入,不能给季冻区路基设计提供准确的数据支持,故路基设计时并未将这种变化考虑其中,只取设计前期所采土样的试验值。取季节性冻土区3种不同塑性指数路基土,在室内采用最佳含水率制备成最大压实度试样,在封闭条件下经历0～7次完整冻融循环过程后,进行不同围压下的三轴压缩试验,在偏应力-应变曲线中通过直线段应力-应变关系得到弹性模量数据,结果表明,同种土相同冻融循环次数下,弹性模量随围压增加而增加;相同围压下弹性模量随冻融循环次数基本呈下降趋势。采用指数函数对所有弹性模量数据进行多元非线性拟合,建立不同塑性路基土弹性模量与围压及冻融循环次数的关系,拟合效果理想,可为缺乏相关资料的季冻区路基设计提供参考。  相似文献