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泡叶藻及海带藻渣中岩藻聚糖硫酸酯的提取及其抗氧化活性 总被引：1，自引：0，他引：1
采用超声波辅助提取方法提取泡叶藻(Ascophyllum mackaii)及海带(Laminaria japonica)藻渣中岩藻聚糖硫酸酯, 以均匀试验设计建立回归模型优化高效制备提取工艺。采用高效凝胶过滤色谱法(HPGPC)进行了相对分子质量检测及理化性质分析; 利用Fenton 反应检测法、邻苯三酚自氧化法等进行了抗氧化活性研究。结果表明, 优化的高效制备技术的超声波最佳条件为超声70 min, 温度为90℃,水提时间2 h, 料液比1︰ 80, 泡叶藻及海带藻渣中岩藻聚糖硫酸酯的高效提取率分别为4.49%和3.69%,分子质量分别为142 kDa 和136 kDa, 泡叶藻和海带藻渣中的岩藻聚糖硫酸酯均具有较好的清除超氧阴离子自由基、羟自由基能力及还原能力。海带的抗氧化活性总体略高于泡叶藻。 相似文献
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褐藻多糖硫酸酯是一种含有硫酸基的水溶性杂聚糖,其化学组成对抗氧化活性有较大的影响。本文对三种褐藻来源的褐藻多糖硫酸酯及其降解产物化学组成和抗氧化活性进行了研究,阐明了不同来源褐藻多糖硫酸酯体外抗氧化活性的构效关系。实验结果表明:1)分子量对抗氧化活性有较大影响,但是对不同褐藻来源的褐藻多糖硫酸酯的影响趋势并不一致。2)岩藻糖、硫酸基和糖醛酸含量对清除超氧阴离子自由基的影响与分子量有一定的关系。对于低分子量样品,岩藻糖和硫酸基含量与抗氧化活性成正相关。3)岩藻糖和硫酸根的比值对羟基自由基的清除能力有一定影响,比值越大,羟基自由基的清除能力越强。分子量、岩藻糖、硫酸基和糖醛酸的含量对褐藻多糖硫酸酯的抗氧化活性的影响依次减小。本研究为褐藻多糖硫酸酯在抗氧化剂保健品和功能食品中的应用提供了基础数据,也为裙带菜、羊栖菜和铜藻的高值化利用提供了理论依据。 相似文献
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鮟鱇是一种低脂肪高蛋白的优质海洋生物资源, 其氨基酸含量丰富, 蛋白质含量高达75.30%。本实验选用胰蛋白酶, 胃蛋白酶, 木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶水解鮟鱇鱼糜, 比较各酶解产物对1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除率, 确定木瓜蛋白酶为最佳用酶。在单因素实验基础上进行响应面优化实验, 确定酶解反应的最佳条件为: 加酶量829.51 U/g, pH值7.37, 酶解温度47.09 ℃, 酶解时间5.86 h, 液固比5.79∶1。在最优条件下验证其DPPH自由基清除率为80.22%±0.63%, 接近预测值80.55%。经响应面法实验制备的鮟鱇活性肽粉末呈淡黄色, 具有较好的抗氧化活性, 其羟自由基清除能力的IC50值为1.69 mg/mL, 可作为潜在的抗氧化剂。 相似文献
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利用过氧化氢耐受性实验对北极海洋沉积物中具有高抗氧化活性的菌株进行初筛,通过其对DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基、羟自由基和超氧阴离子清除能力的测定进一步验证其抗氧化能力;并对其进行了分子鉴定与系统发育分析。根据过氧化氢耐受性实验,从145株供测菌株中筛选出25株对过氧化氢具有较强耐受性的抗氧化活性菌株,占总供测菌株的17.2%;其对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子均具有较强的清除能力,可分别高达84.15%,88.61%和45.77%。基于16SrRNA基因的分子鉴定与系统发育分析表明,筛选出的25株活性菌株多样性较高,分别属于细菌域的5个纲,15个属,20个种;其中以γ-Proteobactria纲的菌株数量最多。北极海域的海洋沉积物中存在着丰富的具抗氧化活性的菌株资源,将为了解极地微生物的抗氧胁迫机制及极地来源的新型生物活性物质的研发打下一定的基础。 相似文献
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通过研究不同聚合度琼寡糖对肝细胞的内外抗氧化活性的影响,对琼寡糖聚合度与活性间的关系进行了评价。利用二苯基苦味酰肼自由基(DPPH·)检测方法研究了琼寡糖的细胞外抗氧化活性,结果表明,琼六糖具较高的淬灭自由基活性的能力。采用二氯荧光素检测方法(DCF)细胞内的活性,结果与细胞外的活性结果相吻合,并抑制H2O2所造成的细胞氧化损伤及死亡。通过选用五种聚合度的琼胶寡糖,研究了其抗氧化活性,从细胞内、外两个水平说明琼六糖均有良好的清除自由基活性的能力,进一步证实琼寡糖的抗氧化作用较强。 相似文献
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羊栖菜(Sargassum fusiforme)是一种有"长寿菜"美誉的经济藻类,其中的多糖成分具有良好的抗氧化活性。本文依次用冷水和热水处理羊栖菜藻粉,得到两种多糖:冷水浸提多糖(SFCP)和热水煮提多糖(SFHP);随后对这两种多糖的理化性质进行比较,并通过测定二者对DPPH和羟自由基的清除能力评价其抗氧化活性。结果表明,两种多糖都是含有硫酸根的岩藻聚糖,但是SFCP中糖醛酸含量较高,分子质量分布集中,而SFHP中硫酸根含量较多,分子质量分布较宽,且二者硫酸根取代位置不同。两种多糖对DPPH和羟自由基均有一定的清除效果,且清除率与浓度存在剂量依赖关系。相比较而言,SFCP对自由基的清除效率较好。 相似文献
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通过羟自由基清除作用、超氧自由基清除作用、还原能力和金属螯合能力等抗氧化活性实验，测定了白色霞水母蛋白的抗氧化活性。实验结果表明：白色霞水母蛋白具有较高的清除羟自由基的能力，蛋白质量浓度为41μg／mL时，清除率可达到85％；白色霞水母蛋白对超氧阴离子的清除作用较弱，蛋白质量浓度为77．7μg／mL时，清除率〈50％；白色霞水母蛋白有较强的还原能力，但没有螯合能力；白色霞水母蛋白的抗氧化活性受温度影响不大，且巯基含量不是影响抗氧化活性的主要因素。 相似文献
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褐藻低聚糖对提高大菱鲆免疫机能的作用 总被引：6，自引：0，他引：6
研究了在养殖过程中投喂酶解制备的褐藻低聚糖对大菱鲆(Scophthalmus maximus)鱼苗免疫机能的影响,对大菱鲆鱼苗血液中的酸性磷酸酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶和头肾淋巴细胞吞噬能力进行了测定。实验发现,褐藻低聚糖能够提高大菱鲆血液中酸性磷酸酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶活力;头肾淋巴细胞吞噬率较对照组提高15.4%,吞噬指数则无显著差异。结果表明在大菱鲆鱼苗的养殖过程中褐藻低聚糖可作为一种非特异免疫调节剂提高大菱鲆机体的免疫能力。 相似文献
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为探究Microbulbifer sp. QZHA1褐藻胶裂解(Escherichia coli)酶MAAL1的酶学性质,将褐藻胶裂解酶基因maal1构建至pET-28a表达载体并利用大肠杆菌BL21(DE3)进行异源表达。研究发现：重组酶MAAL1与来源于Microbulbifer sp. ALW1菌株的褐藻胶裂解酶(WP＿23625014.1)同源性最高,为93.69%,且与PL7家族蛋白聚为一支;重组酶MAAL1最适温度为35℃,最适pH为7.5,在pH为5.5～10.5范围内保存24 h仍能保持60%以上的酶活力;MAAL1具备良好的耐有机溶剂特性,在测试的9种有机溶剂中,除异丙醇外,其他有机溶剂在添加量达到30%(体积分数)后,酶活力依然保持在59%以上;重组酶MAAL1最适条件下酶活力为4.3 U/mg,米氏常数(Km)值为1.08 mg/mL,最大反应速率(Vmax)为4.75 mg/(mL·min),催化常数(Kcat)值为4.52 s-1;重组酶MAAL1对聚β-D-甘露糖醛酸(p... 相似文献
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Seven bacterial clones with alginate-utilizing activity were isolated from rotten kelp. By activity test, the Vibrio sp.QD-5 with the potential alginate-degrading capability was chosen to carry out the draft genome sequencing, and the result showed that the Vibrio sp. QD-5 containing an alginate lyase gene cluster. One of these genes, aly-IV,was cloned and characterized for the first time. After overexpression, Aly-IV, with a molecular mass of about62 kDa and a theoretical isoelectric point(pI) of 5.12, was purified to a specific activity of 1 256.78 U/mg and showed highest activity at 35°C in the Tris-HCl buffer at pH of 8.9. Moreover, the enzyme activity was enhanced by the metal ions of Na~+, K~+ and Mg~(2+) under certain concentration. Aly-IV degraded favorably polyG blocks in an endo-type, yielding monomer and dimer as the main products. Due to its high substrate specificity, Aly-IV could be used as a potential tool for production of polyG oligosaccharides with low degree of polymerization(DP) and for determining the fine structure of alginate. 相似文献
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从微泡菌属AG1（Microbulbifer sp. AG1）克隆得到1302 bp大小的琼胶酶基因，该基因编码产物为一个成熟蛋白（413个氨基酸残基）外加一个信号肽（20个残基）。将不含信号肽片段的琼胶酶在E. coli BL21 （DE3）中进行了异源表达和纯化。使用琼脂糖作为底物，该重组琼胶酶的最适反应温度和pH分别为60℃和7.5。该重组酶表现出优良的热稳定性，在50℃和60℃下处理1 h，重组琼胶酶仍能分别保持67%和19%的残余酶活力。除了SDS，重组琼胶酶对于其他测试的抑制剂、去垢剂和尿素变性剂有着较好的抗性。利用薄层色谱和以对硝基苯-α/β-D-吡喃半乳糖苷为底物的酶活力分析结果表明，该重组琼胶酶为β型琼胶酶，它水解琼脂糖的主要终产物为新琼四糖，而且不同聚合度的酶解产物具有抗氧化活性。 相似文献
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海洋脂肪酶ADM47601固定化方法的研究 总被引：1，自引：1，他引：0
采用海藻酸钠、壳聚糖、聚乙烯醇和明胶等材料, 进行对脂肪酶ADM47601的固定化研究。结果表明, 使用壳聚糖固定化脂肪酶, 在最优条件为2% (W/V)壳聚糖, 10% NaOH, 1%乙酸, 0.25%戊二醛, 每克载体添加840U脂肪酶时, 最大固定化酶活力回收率为87.06%。使用海藻酸钠-明胶固定化脂肪, 在最优固定化条件下, 最大固定化酶活力回收率为54.45%。使用聚乙烯醇固定化脂肪酶, 在最优固定化条件下, 最大固定化酶活力回收率为33.22%。使用海藻酸钠固定化脂肪酶, 在最优固定化条件下, 最大固定化酶活力回收率为17.11%。对比四种不同固定化酶方法, 脂肪酶活力回收率高度高低顺序为: 壳聚糖吸附交联法>海藻酸钠明胶协同包埋法>聚乙烯醇-硼酸法>海藻酸钠包埋法。 相似文献
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鲅鱼(Spanish mackerel)加工后的废弃物富含蛋白质,为了提高蛋白质的利用率并减少环境污染,可以采用微生物发酵的方法酶解这部分蛋白质制取抗氧化活性肽。本实验室已经筛选出一株芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Hy-2,以其发酵水产加工废弃物得到了具有较高抗氧化性的产物。为了进一步提高产物的抗氧化性,作者以该株产蛋白酶芽孢杆菌Hy-2为出发菌,采用常压室温等离子体(ARTP)诱变的方法筛选出1株突变菌Hy-23,以鲅鱼加工后的废弃物为原料,接种该突变菌株进行发酵,得到了具有一定抗氧化活性的发酵产物,酶解物总抗氧化活性提高了12.4%。经遗传稳定性测定,该芽孢杆菌突变株在传代8次之后其遗传稳定性仍然良好。 相似文献
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为了寻找安全有效的海洋生物保水剂，本研究以海洋生物多糖/寡糖为研究对象，经多糖筛选和单因素实验确定壳聚糖1号、壳聚糖2号和海藻酸钠的最佳添加量，采用响应面优化实验确定最优复配值为：壳聚糖1号0.29%，壳聚糖2号1.11%，海藻酸钠0.93%，在此条件下测得的鱼丸解冻失水率为1.46%±0.24%，结果表明该多糖复配组合对鱼丸制品具有较好的保水作用。通过扫描电镜观察多糖组鱼丸的微观结构，发现其结构致密，无较大孔隙。通过本实验的开展，能够为水产品的保水保鲜剂的开发提供新思路。 相似文献
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The extent to which marine organic matter is associated with surfaces and the consequences of such associations for organic matter remineralization are the focus of considerable attention. Since extracellular enzymes operating outside microbial cells are required to hydrolyze organic macromolecules to sizes sufficiently small for substrate uptake, the effects of surface interactions–on enzymes as well as on substrates–for hydrolytic activity also require investigation. We used a simplified laboratory system consisting of a free (dissolved) polysaccharide (pullulan) and the same polysaccharide tethered to agarose beads to restrict mobility, plus the corresponding free enzyme (pullulanase) and the same enzyme sorbed to montmorillonite (Mte), to investigate systematically the consequences of surface associations of enzymes and of substrates on hydrolytic activity. Changes in substrate molecular weight were monitored with time to measure the course of enzymatic hydrolysis. Although hydrolysis of free substrate was nearly complete after 2 min incubation with the free enzymes, the sorbed enzymes also effectively hydrolyzed free substrate, and the data suggest that they retained activity longer in solution compared to the free enzymes. Sorbed enzymes progressively hydrolyzed the free substrate from > 50 kD to lower molecular weights during a 24 h incubation, with a final product distribution on average showing only 1.4% and 10.3% of substrate still in the > 50 kD and 10 kD size classes, while 46.6%, 29.3%, and 12.5% of substrate was in the 4 kD, monomer, and free tag size classes, respectively. This product distribution was very similar to that of the free substrate/free enzyme experiment. Tethering the substrate to agarose beads led to lower substrate release (2–3% of total substrate after 98 h incubation) into solution compared to the free substrate case. For tethered substrates, the state of the enzyme (free or sorbed) measurably affected the molecular weight distribution of the hydrolysis products, with free enzymes producing a higher fraction of high molecular weight hydrolysis products (28.7 ± 5.4% of substrate > 50 kD at the end of the incubation) compared to sorbed enzymes (11.6 ± 2.8% of substrate > 50 kD at the end of the incubation.) Tethered substrates were also hydrolyzed in a sediment slurry from surface sediments from Cape Lookout Bight, North Carolina; 0.1% of total substrate was released by enzymes naturally present in 1 cm3 of sediment after 144 h incubation, demonstrating that the enzymes naturally present in marine sediments are also capable of accessing tethered substrates. These investigations suggest that surface associations of enzymes in marine systems may extend the active lifetime of such enzymes, providing an opportunity for hydrolysis over longer periods of time and producing a different size spectrum of hydrolysis products relative to free enzymes. Furthermore, in well-mixed systems, surface-associated enzymes can hydrolyze substrates whose mobility is restricted, highlighting the importance of processes such as resuspension and bioturbation on organic matter remineralization. 相似文献
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褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)是一种海藻酸降解菌.本实验采用PCR的方法,以褐球固氮菌基因组DNA为模板,克隆出约1.05 kb的海藻酸裂解酶基因algL的成熟蛋白编码序列,并将其插入巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPIC9K中,获得重组质粒pPIC9K-algL.重组质粒线性化后用聚乙二醇(PEG)法导入毕赤酵母菌株GS115中,获得高效分泌表达海藻酸裂解酶的毕赤酵母工程菌株.用甲醇诱导培养基进行摇瓶发酵,表达得到43 kDa的目的蛋白,酶活力可达1 400 U/cm3左右.经测定,该重组酶的最适反应pH为8.5,最适反应温度为40℃,并且在20~55℃,pH2.0~11.0具有较好的稳定性.另外,10 mmol/cm3的Cu2+,Fe2+,Co2+,Mn2+和Ca2+对酶有不同程度的抑制作用. 相似文献
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采用海藻酸钠絮凝剂法、双缩脲法、重铬酸钾回流氧化等方法,研究了回收带鱼鱼糜漂洗液中蛋白质的最佳条件,以期为鱼糜漂洗液蛋白质的利用提供参考。结果表明,海藻酸钠回收带鱼鱼糜漂洗液蛋白质的最佳条件为:海藻酸钠添加量为1.11mg/ml,鱼糜漂洗液蛋白浓度16.54mg/ml,pH4.6,温度4℃,处理时间20min;在此条件下蛋白质回收率达86.68%,COD去除率达58.67%。实验表明海藻酸钠对鱼糜漂洗液蛋白质去除效果非常显著。 相似文献