菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)漆酶型酚氧化酶的纯化及特性分析     

蒋经伟  邢婧  战文斌 《海洋与湖沼》2012,43(2):294-298

采用非变性电泳结合特异性底物发色方法从菲律宾蛤仔血细胞中分离出一种酚氧化酶,研究了该酶的酶促反应动力学参数,金属离子、抑制剂对酶活的影响。结果表明,分离获得的酚氧化酶分子量约为563kDa;对底物邻苯二酚、左旋多巴(L-DOPA)、多巴胺、对苯二酚的米氏常数Km分别为0.42、1.60、1.79和1.76mmol/L;酶的活性在Mg2+、Zn2+、Mn2+、Fe2+、Cu2+和Ca2+浓度为5、10、20、30mmol/L时受到抑制;酶的活性可被抑制剂抗坏血酸、二乙基二硫代氨基甲酸钠(DETC)、半胱氨酸、亚硫酸钠、柠檬酸、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)、叠氮钠和硫代尿素等抑制。根据底物特异性、抑制剂等结果,所分离获得的酚氧化酶属于漆酶型的含铜酚氧化酶。  相似文献   

香鱼(Plecoglossus altivelis)排卵后卵内油球、酶活、丙二醛及受精率、孵化率的变化     

李明云  苗亮  安钦  王成义  汤先念  陈炯  史雨红 《海洋与湖沼》2012,43(2):313-317

以香鱼卵母细胞为研究对象,采用观察卵内油球、有关酶的活力、以及卵的受精率和孵化率等变化的方法,研究了香鱼卵母细胞长时效演化的相关机理,结果表明,随着香鱼卵在腹腔内保存时间的延长,卵内油球从0h的油球直径≤10μm,且均匀分布,逐渐融合增大,至108h增大到120μm,油球数仅有5—6个。同时,SOD、POD的活力及MDA含量均呈先升后降的变化趋势,最大峰值分别出现在60h、36h和24h。随着油球和酶活的变化,卵子质量逐渐下降,表现为受精率和孵化率的降低:排卵后24h、48h、72h、96h的受精率分别为94.37%、88.19%、50.20%、10.83%,孵化率分别为85.78%、68.14%、25.54%、0.53%。  相似文献   

氨氮胁迫对刺参几种免疫酶活性的影响   总被引：3，自引：0，他引：3  

刘洪展  郑风荣  孙修勤  唐学玺  董双林 《海洋科学》2012,36(8):47-52

以养殖刺参(Apostichopus japonicus)为研究对象,对不同浓度的氨氮处理及病菌感染条件下刺参体腔液免疫酶的变化进行了测定.结果表明:随着氨氮处理强度的增加,刺参体腔液中超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(ALP)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)及溶菌酶(LSZ)活性呈现先升高后降低的趋势,而同时感染病菌的情况下,较低质量浓度的氨氮胁迫可使SOD、GPx、ALP及LSZ活性上升,但在较高浓度氨氮处理时,酶活性的诱导则受到抑制.说明适宜浓度的氨氮处理可增强刺参的免疫力,从而减轻病菌感染对刺参造成的免疫功能损伤和提高刺参抗病力.刺参在感染病原菌假交替单胞菌(Pseudoalte-romonas sp)的条件下,3 mg/L、4 mg/L和6 mg/L浓度的氨氮处理第6天,刺参的累积发病死亡率分别为44.4％、55.6％和72.2％,高于对照组,表明较高浓度的氨氮胁迫能够显著降低刺参的免疫力,增加对病原菌的易感性.因此,在刺参养殖过程中,氨氮浓度的调控具有重要的意义.  相似文献   

温度对罗非鱼下脚料蛋白酶解液混合营养培养螺旋藻的影响     

杨萍  孙佳  洪鹏志 《海洋湖沼通报》2012,(2):83-88

在常规的Zarrouk培养基中添加1000∶3(v/v)的罗非鱼下脚料蛋白酶解液对钝顶螺旋藻进行混合营养培养,考察在光照强度230μmol/m2.s、温度15～40℃范围内对螺旋藻生物量、叶绿素、藻胆蛋白和蛋白质含量的影响。结果表明,添加酶解液在15～35℃时能够显著提高螺旋藻生物量,35℃时增幅最大为38.2%;在30～40℃时添加酶解液显著提高螺旋藻叶绿素的含量,30℃时含量提高了11.7%;在15～20℃低温条件下添加酶解液显著提高螺旋藻藻胆蛋白含量,15℃时增幅达15.1%;在15～35℃范围内添加酶解液显著提高蛋白质含量,30℃时增幅最大为13.7%。  相似文献   

菲律宾蛤仔碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究     

焉翠蔚  随建强  王镇  赵庆娅  黎玲屹 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2012,(Z2):33-37

经Tris-HCl缓冲液浸提、硫酸铵分级沉淀盐析、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析等步骤,从菲律宾蛤仔内脏团中分离得到碱性磷酸酶,SDS-PAGE显示为单一条带,提纯倍数为14.42,比活力达到131.08U/mg。酶学性质研究表明:该酶亚基分子量约44kD,最适反应温度为45℃,最适pH值为9.0,米氏常数Km为0.098mmol/L,最大反应速度Vmax为1.01μmol/(mL·min)。Ca2+、Mg2+对酶活力表现出显著的激活作用。  相似文献   

硫酸软骨素酶高产菌株的筛选、鉴定和发酵培养条件的研究     

刘万顺  付静芸  常菁  杨艳  韩宝芹 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2012,(11):35-39,53

通过透明圈法从土样中初筛到2株产硫酸软骨素酶能力较高的菌株,经复筛,28号菌株产酶能力更强,对该菌株的形态特征和生理生化特性考察,初步鉴定为少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)。该菌株的发酵产酶条件研究表明,其产酶最适培养基组分为(%,w/v):酵母粉1.0,硫酸软骨素0.5,NaCl 0.5,KH2PO40.03,MgSO4.7H2O0.5,起始pH=8.5,其余为水。其最适产酶条件为:250mL三角瓶装液量40mL,1%(v/v)接种量,25℃,100r/min培养36h。在最适产酶培养条件下,菌株发酵液中硫酸软骨素酶的活力可达1.2U/mL。本研究筛选出产硫酸软骨素酶高的菌株,并为发酵法制备硫酸软骨素酶提供一定的实验依据。  相似文献   

低盐胁迫对钝吻黄盖鲽幼鱼鳃Na~+/K~+-ATP酶、肝脏抗氧化酶和非特异免疫酶的影响     

《广东海洋大学学报》2017,(6)

研究钝吻黄盖鲽(Pleuronectes yokohama)幼鱼鳃的Na~+/K~+-ATP酶(NKA)和肝脏的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)在低盐(6、18,分别记作S6、S18组)胁迫下的变化规律,探讨其适应盐度的规律,以及抗氧化机制和非特异免疫能力。结果显示,S6组和S18组鳃的NKA活力均呈先增后减的变化趋势,1 d时最大(P0.05),S6组7 d时开始下降,而S18组在3 d时开始下降。肝脏的SOD和CAT活力均先升后降,其中SOD活力S6和S18组均于7 d时最大(P0.05),14 d时S6组活力较S18组大;CAT活力S6和S18组均于7 d时最大(P0.05),在14 d时降至初始水平。肝脏ACP活力S6、S18组均于3 d时升至最高(P0.05),14 d时S18组降至对照组水平,而S6组则低于对照组(P0.05);AKP活力S6和S18组均呈现先升后降的变化,在3 d达到峰值,14 d时仍高于对照组(P0.05)。低盐胁迫影响钝吻黄盖鲽幼鱼的NKA、抗氧化酶和非特异免疫酶,S18组对盐度胁迫的适应能力更大。  相似文献   

鲶爱德华氏菌间接酶联免疫快速检测法的建立     

李重实  李强  刘海燕  叶仕根  李华 《广东海洋大学学报》2010,30(4)

用鲶爱德华氏菌兔抗血清作为一抗,碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗兔IgG作为酶标二抗,建立黄颡鱼"红头病"病原菌—鲶爱德华氏菌的间接酶联免疫(ELISA)快速检测法,并优化检测条件。抗原最佳包被浓度为107/mL,一抗工作的最佳稀释度为1∶211,病原菌的检测灵敏度为105/mL,交叉反应实验证明该方法特异性强,与迟钝爱德华氏菌、弧菌等13种标准菌株无交叉。应用上述技术对人工感染发病鱼中分离的优势菌进行检测,结果表明阳性检出率为80%;对自然发病黄颡鱼体内分离获得的20株优势菌检测结果表明,12株菌为鲶爱德华氏菌。  相似文献   

Effects of copper pollution on the activity of soil invertase and urease in loquat orchards   总被引：1，自引：0，他引：1  

Lijun Fu  Wenjin Yang  Yangye Wei 《中国地球化学学报》2009,28(1):76-80

Dealt with in this paper is the relationship between Cu contents of soil and activity parameters for soil invertase and urease from the Changtai loquat orchards in Fujian Province. The soil invertase activity and maximum reaction velocity (enzyme kinetic parameters: Vmax and Vmax/Km) have no remarkable negative correlation with Cu concentrations, but Cu concentrations have an obvious positive effect on invertase Kin, indicating a reversible com-petitive restraint on the reaction between Cu and invertase. The soil urease activity and maximum reaction velocity (Vmax,Vmax/Km) have a remarkable negative correlation with Cu concentrations, and in this aspect, they can be used as ecological indices of the soil polluted by Cu. A slightly variable Km indicates the non-reversible competitive restraint level.  相似文献   

瘤背石磺体腔细胞分类、免疫相关酶特性及初步转录组学分析     

吕庭莉  杲绍强  张虎  张易婵  陈鹏  王嘉伟  乔帼  杨伯平  张明明 《海洋学报》2022,44(2):84-93

瘤背石磺(Onchidium struma)广泛分布于潮间带和潮下带,是海洋生物向陆地生物辐射进化的重要代表,也是环境监测的指示生物.为丰富瘤背石磺的基础免疫学资料,本文研究了瘤背石磺体腔细胞的类别、细胞密度和体腔液免疫相关酶活性,并通过RNA-Seq测序获得体腔细胞转录本,进行生物信息学分析.结果表明,瘤背石磺主要有...  相似文献